Badanie dysfunkcji jelitowych w środowisku Bangladeszu (BEED)

Projekt badania Będzie to badanie interwencyjne oparte na społeczności. Ankieta, badania przesiewowe, rekrutacja uczestników zostaną przeprowadzone w Mirpur w mieście Dhaka.

Tematyka Uczestnicy będą rekrutowani z dwóch grup wiekowych: kohorty dziecięcej (od 12 do 18 miesięcy) i dorosłej (od 18 do 45 lat). Kohorta dzieci będzie składać się z dwóch grup dzieci – dzieci z karłowatością (wynik LAZ < -2) i dzieci zagrożonych karłowatością (LAZ <-1 do -2). Grupa niedożywionych osób dorosłych (BMI <18,5) zostanie również zarejestrowana od rodziców dzieci i poprzez badanie przekrojowe z rejonu Mirpur w mieście Dhaka.

Wielkość próbki:

Uczestnicy będą zbierani i rekrutowani w sposób przekrojowy. W oparciu o obliczenie wielkości próby z 10% precyzją i 95% przedziałem ufności, zostanie zrekrutowanych co najmniej 35 dzieci z karłowatością, 35 dzieci zagrożonych karłowatością i 35 dorosłych. Tak więc ostateczna wielkość próby do endoskopii to 105 osób (35+35+35). Ponieważ endoskopia jest zabiegiem inwazyjnym, założono, że tylko jedna trzecia osób, które nie zareagują na interwencję żywieniową, zgodzi się na endoskopię. Tak więc podstawowy rozmiar próby zwiększono trzykrotnie dla minimum 105 (35 x 3) karłowatych dzieci (LAZ <-2), 105 (35 x 3) dzieci zagrożonych karłowatością (LAZ <-1 do 2) i 105 ( 35 X 3) niedożywionych dorosłych (BMI < 18,5), którym nie udałoby się dobrze prosperować. Aby to osiągnąć, zostanie zwerbowanych 525 karłowatych dzieci, 525 dzieci zagrożonych karłowatością i 525 niedożywionych dorosłych do interwencji żywieniowych, ponieważ założono, że ~20% z każdej grupy nie zareaguje pomimo interwencji żywieniowej. Do tego celu rekrutacji wymagane jest przebadanie co najmniej 3977 (1312+2665) dzieci w wieku 12-18 miesięcy i 2100 osób dorosłych w oparciu o aktualne rozpowszechnienie niedożywienia w obu grupach wiekowych. W przypadku dorosłej grupy kontrolnej ta sama liczba (35) dorosłych osób kontrolnych zostanie zwerbowana z Dhaka Medical College i międzynarodowego centrum badań nad chorobami biegunkowymi, kliniki personelu Bangladeszu, przy użyciu wygodnej metody pobierania próbek

Opis terenu pola:

Badanie zostanie przeprowadzone wśród mieszkańców Mirpur, jednej z 21 jednostek administracyjnych stolicy kraju, Dhaki.

Rekrutacja, selekcja i wyrażanie zgody Jeśli uczestnicy są zainteresowani wolontariatem w badaniu, wyznaczony personel przystąpi do selekcji i wyrażania zgody. Badanie przesiewowe będzie polegać na przeglądzie kryteriów włączenia i wyłączenia wymienionych powyżej. Jeżeli podmiot kwalifikuje się do udziału, nastąpi proces wyrażenia zgody polegający na dokładnym zapoznaniu się z pisemnym formularzem zgody w sposób odpowiedni do poziomu umiejętności czytania i pisania rodziców/uczestników dziecka. Przed podpisaniem formularza zgody będą mieli możliwość zadania pytań dotyczących badania. Jeśli Asystent ds. Badań Terenowych (FRA) stwierdzi, że uczestnicy wykazali się odpowiednim zrozumieniem badania, formularz zgody zostanie podpisany przez FRA i rodzica/rodziców dziecka/dorosłych uczestników. Jeśli rodzic (rodzice) / dorośli uczestnicy nie są wystarczająco kompetentni, aby przeczytać i/lub podpisać formularz zgody, zgodę i odcisk kciuka uzyska się w obecności świadka niezwiązanego z badaniem. Rodzice dziecka / dorośli uczestnicy otrzymają kopię podpisanego formularza zgody.

Szczegółowa procedura terapii żywieniowej pod bezpośrednią obserwacją:

Po rejestracji uczestnicy będą otrzymywać codziennie bezpośrednio obserwowaną terapię żywieniową. Terapia żywieniowa składa się z jajek i mleka i będzie zapewniona przez badanie bezpłatnie. Czas trwania interwencji żywieniowych będzie wynosił odpowiednio 3, 2 i 2 miesiące dla dzieci z karłowatością, dzieci zagrożonych karłowatością i niedożywionych dorosłych, a terapia żywieniowa będzie prowadzona między porannym a południowym posiłkiem, o dowolnej porze w godzinach od 10:00 do 11:00: 30 rano. Uczestnicy będą proszeni o codzienne przychodzenie do wyznaczonego centrum żywienia (które zostanie utworzone w Mirpur) na terapię żywieniową, aby uniknąć problemu dzielenia się jedzeniem. Personel odwiedzi gospodarstwo domowe rodziny, jeśli uczestnik zwleka z przybyciem do centrum żywieniowego. Oprócz terapii żywieniowej opartej na żywności, uczestnicy otrzymają następujące wsparcie żywieniowe i zdrowotne:

• Leczenie przeciw robakom (Albendazol/Pyrantel Pamoate) zgodnie z krajowymi wytycznymi
• Rodzice/opiekunowie otrzymają poradę żywieniową
• W przypadku kohorty dzieci rodzice będą otrzymywać jedną saszetkę z wieloma mikroelementami do posypania dziennie przez dwa miesiące.
• Wszelkie współistniejące choroby wykryte przez zespół badawczy również zostaną uwzględnione.

Żywieniowa terapia żywieniowa: Uzupełnienie zwykłej diety domowej jednym jajkiem i 150 ml pełnego mleka, co zapewni dodatkowe 178 kilokalorii, 11,1 g białka i 11,5 g tłuszczu do dziennej diety zakwalifikowanych osób. Saszetki z wieloma mikroskładnikami odżywczymi w proszku zostaną dostarczone do użytku w domu podczas kolacji.

W celu wyjaśnienia roli terapii żywieniowej opartej na żywności zostaną porównane podgrupy 40 dzieci z karłowatością i 40 dzieci zagrożonych karłowatością, które będą obserwowane odpowiednio przez 3 i 2 miesiące, bez żadnej terapii żywieniowej. Pod koniec okresu obserwacji wynoszącego 3 i 2 miesiące, tym dzieciom zostanie zapewniona terapia żywieniowa taka sama, jak w przypadku zapisanych uczestników.

Wycofanie się z badania: Dziecko zostanie przerwane w badaniu i skierowane na badania lekarskie, jeśli przez kolejne 7 dni wykaże niechęć do jedzenia, co obejmuje dzienne spożycie 50% lub mniejszej ilości pożywienia, które zostanie zaoferowane. Nowe kwalifikujące się dziecko zostanie zatrudnione na jego stanowisku do interwencji żywieniowej.

Pobieranie próbek biologicznych:

Wszystkie próbki biologiczne (krew, mocz, kał, aspiraty z dwunastnicy i biopsje endoskopowe) zostaną pobrane zgodnie ze standardowymi procedurami operacyjnymi (SOP), które zostaną przygotowane dla tego protokołu. Od każdego uczestnika zostanie pobrana łączna ilość 5 ml krwi przed i po interwencji żywieniowej. Mocz zostanie pobrany do oznaczenia laktulozy-ramnozy oraz do badań metabolomicznych; zostaną pobrane próbki oddechu do badania w kierunku przerostu bakteryjnego jelita cienkiego (SIBO). Drugi SIBO zostanie wykonany 1-2 tygodnie przed endoskopią, aby wyniki z endoskopii można było porównać z testami oddechowymi. Zostaną pobrane próbki kału do biomarkerów, testów Taqman array card (TAC) i mikrobiomu/mikrobioty pod kątem wieku Z-score (MAZ)/aktywowanego fluorescencją błędów sortowania komórek.

Szczegółowa procedura badania Biomarkerów

Biomarkery, które będą testowane pod kątem to:

Biomarkery kału

• Gen regeneracji 1Beta
• Neopteryna
• mieloperoksydaza
• Alfa-1-antytrypsyna
• kalprotektyna
• Karta TaqMan Array dla enteropatogenu
• Analiza mikrobiomu jelitowego
• Sortowanie komórek aktywowane fluorescencją błędów.

Biomarkery moczu

• Test laktulozowo-ramnozowy

Biomarkery krwi

• Białko C-reaktywne
• Alfa-1-kwaśna glikoproteina
• Rozpuszczalny klaster zróżnicowania 14
• Stosunek kynureniny do tryptofanu
• Peptyd podobny do glukagonu-2
• Insulinopodobny czynnik wzrostu-2
• Transglutaminaza tkankowa
• Ferrytyna
• Cynk
• Stosunek pesynogenu I/II
• Receptor 1 związany z lipoproteinami o niskiej gęstości (LRP1)
• Metabolomika osocza krwi

Inne proponowane biomarkery

• Przerost bakteryjny jelita cienkiego

Po zakończeniu terapii żywieniowej wszyscy zapisani uczestnicy zostaną poddani ocenie odpowiedzi, która będzie obejmować:

• Pomiary antropometryczne
• Pobranie jednej 5 ml krwi na oznaczenie biomarkerów funkcji jelit w surowicy oraz badania przesiewowe do endoskopii z biopsją, jeśli zabieg jest wskazany w przypadku braku wzrostu
• Pobieranie próbki kału na biomarkery funkcji jelit
• Podanie roztworu laktulozy-ramnozy i pobieranie moczu do 2 godzin na biomarkery funkcji jelit w moczu

W tym czasie zostanie ocenione ostateczne kryterium włączenia do endoskopii z biopsją w celu ustalenia, czy terapia żywieniowa uczestników zakończyła się niepowodzeniem lub czy mieli odpowiednią odpowiedź, lub czy u uczestników występuje choroba podstawowa, która spowodowała niedożywienie. Niepowodzenie terapii żywieniowej w tym badaniu lub brak odpowiedzi definiuje się przy braku innych chorób podstawowych, takich jak gruźlica:

• Wynik LAZ pozostaje < -2 dla kohorty dzieci karłowatych
• Wynik LAZ pozostaje < -1 dla kohorty dzieci „zagrożonych karłowatością”.
• BMI < 18,5 i < 10% wzrost BMI u dorosłych.

Uczestnicy, którzy spełniają definicję badania „brak odpowiedzi”, zostaną zbadani pod kątem obecności jakiejkolwiek wtórnej przyczyny niedożywienia, takiej jak gruźlica, rak, wszelkie infekcje pasożytnicze itp. Mikroskopia kału w celu identyfikacji pasożytów zostanie przeprowadzona w laboratorium parazytologicznym icddr,b tak szybko, jak możliwe po pobraniu próbek kału. W przypadku braku jednoznacznych wyników uczestnicy mogą zostać poproszeni o przygotowanie do endoskopii górnego odcinka przewodu pokarmowego z biopsją, ponieważ mogą skorzystać z dalszej oceny w celu ustalenia potencjalnej przyczyny (przyczyn) niepowodzenia interwencji i ustalenia odpowiedniego postępowania terapeutycznego. Przyniesie to również korzyści innym, poprzez walidację nieinwazyjnej sygnatury biomarkera środowiskowej dysfunkcji jelit. Uczestnicy, którzy zostaną poddani endoskopii otrzymają niezbędne zabiegi zgodnie z diagnozą.

Uczestnicy z celiakią i zaburzeniami krzepnięcia krwi (oznaczeni na podstawie czasu protrombinowego / koagulopatii międzynarodowego współczynnika znormalizowanego) zostaną wykluczeni z badania. Endoskopia górnego odcinka przewodu pokarmowego zostanie wykonana zgodnie ze standardami zalecanymi przez North American Society for Pediatric Gastroenterology, Hepatology and Nutrition (NASPGHAN0, American College of Gastroenterology (ACG) oraz American Society for Gastrointestinal Endoscopy (ASGE).