Studie DAWL (Dairy and Weight Loss). (DAWL)

„Ground zero“ pro studii DAWL bude University of Guelph Body Composition and Metabolism Lab (www.uoguelph.ca/bodycomp), pod vedením PI.

Velikost vzorku. Vyšetřovatelé plánují dokončit sběr dat o celkem 46 ženách. Tato velikost vzorku je založena na očekávané ztrátě celkového tělesného tuku (FM) za 16 týdnů 5,5 kg ve skupině s vysokým obsahem mléka a 3,8 kg v kontrolní skupině. Tyto hodnoty vycházejí z dat publikovaných ze 4 studií (5; 20-22). Abychom byli při výpočtu velikosti vzorku konzervativní, použili jsme vyšší SD, než je uváděná ztráta FM 2,0 kg. Tyto hodnoty dohromady ukázaly, že potřebujeme 23 žen v každé skupině, aby detekovaly významný rozdíl v celkové tělesné FM, s 80% silou a 5% alfa. Předpokládá se, že úbytek a neadherence bude přibližně 20 % až 25 %, proto bude v každé skupině přijato 30 žen. Předpokládáme, že screening bude vyšetřován u přibližně 300 žen, abychom shromáždili 16 týdnů údajů o celkem 46 způsobilých a dodržujících absolvujících, jak ukazuje obrázek 1 níže.

Kritéria zahrnutí/vyloučení. Kritéria pro zařazení zahrnují nekuřáky, netěhotné a nekojící ženy ve věku 18 až 50 let; premenopauzální (určeno ukončením menstruace a nedávnou menstruační anamnézou, aby se vyloučily ty, které jsou perimenopauzální nebo amennorheické); BMI ≥25,0 kg/m2 (54); obvyklá spotřeba vápníku pod EAR ve výši 800 mg/den (55), která má být měřena pomocí validovaného dotazníku o četnosti příjmu vápníku a vitaminu D (FFQ) (56); žádná citlivost na mléčné výrobky; normální funkce jater a ledvin, sérový vápník a kompletní krevní obraz; 3 měsíce historie stability hmotnosti; a ochotu dodržovat protokol studie po dobu 16 týdnů bez ohledu na léčbu a včetně žádné změny úrovně fyzické aktivity. Všichni uživatelé vitaminových/minerálních doplňků budou požádáni, aby přerušili suplementaci po dobu 4 týdnů před zařazením do studie (tj. "vymýt"), jakož i po dobu trvání soudního řízení.

Kritéria vyloučení zahrnují porušení kteréhokoli z výše uvedených nebo přítomnost zdravotního stavu, který by mohl ovlivnit hubnutí (jako je cukrovka, KVO, rakovina, onemocnění štítné žlázy) nebo pravidelné užívání léků, které mohou způsobit totéž (jako jsou kortikosteroidy).

Komplexní screening / návštěva sběru podkladových dat. Ženy, které projdou úvodním screeningem a zúčastní se náborového sezení, budou po 12 hodinách půstu (bez jídla a pití kromě vody) pozvány zpět do laboratoře, kde budou nejprve požádány, aby podepsaly informovaný souhlas. Další údaje o screeningu/pozadí, které budou shromažďovány, budou zahrnovat:

• Biochemie včetně kompletního krevního obrazu, jaterních testů (ALT, AST), dusíku močoviny v krvi, kreatininu a celkového vápníku v séru. Účastníci podstoupí venepunkci flebotomem LifeLabs (přiložený dopis s podporou). Pro výsledky se očekává obrat do 3 pracovních dnů. Účastníci s hodnotami v rámci normálních limitů budou pokračovat v registraci. V této fázi náboru budou účastníci s jakýmkoli známým zdravotním stavem/léky, u nichž existuje podezření, že interferují s výsledky studie, vyřazeni, a proto se očekává, že většina bude mít hodnoty v normálních mezích.
• Mezinárodní dotazník fyzické aktivity (IPAQ) (57) k posouzení obvyklých návyků při aktivitě.
• Klidová rychlost metabolismu (kcal/d) pro stanovení energetické hladiny individuálních stravovacích plánů, která bude vypočítána jako (RMR x PAL) - 500 kcal/d. RMR bude měřeno pomocí kontinuální nepřímé kalorimetrie s otevřeným okruhem za použití přístroje MAX-IIa (AEI Technologies Inc.). Měření RMR bude prováděno s účastníky ležícími vzhůru, ale v úplném fyzickém klidu, s ventilovanou kapucí umístěnou přes hlavu a krk. Účastníci podstoupí měření po dobu 30 až 40 minut; prvních 5 až 10 minut dat bude vyřazeno, aby se umožnila aklimatizace na testovací prostředí. Po tomto testu poskytneme džusový box a granola bar, aby účastníci neměli hlad. Pro konzistenci napříč studijními návštěvami změříme účastnice ve folikulární fázi jejich menstruačních cyklů.

14.5 Úvodní fáze Během dvou týdnů po komplexní screeningové návštěvě budou účastníci požádáni, aby vedli 3denní záznam o jídle, ze kterého výzkumní pracovníci vytvoří individuální jídelní plány s omezením 500 kcal, jak je popsáno níže. Od tohoto okamžiku budou účastníci požádáni, aby udržovali obvyklou úroveň fyzické aktivity.

14.6 Diety ve studii Účastníkům budou poskytnuty individuální jídelní plány – s vysokým obsahem mléčných výrobků nebo kontrolní – každé dva týdny po dobu trvání studie. Výzkumní pracovníci jim budou během základní návštěvy a během studie radit ohledně jejich přidělené stravy. Energetická hladina jídelních plánů (např. 1200 kcal, 1400 kcal, 1600 kcal atd.) se určí z hladin RMR a PAL následovně: (RMR x PAL) - 500 kcal/d, kde RMR je klidová rychlost metabolismu (kcal/d, měřeno nepřímou kalorimetrií), PAL je úroveň fyzické aktivity odvozená ze screeningového IPAQ a 500 kcal je denní energetické omezení. Hladiny energie budou v průběhu studie upravovány podle potřeby. Skutečná jídla v jídelních plánech budou vycházet z kanadského průvodce potravinami (Eating Well with Canada's Food Guide, EWCFG, http://www.hc-sc.gc.ca/fn-an/food-guide-aliment/index-eng.php) a 3denní záznamy o jídle dokončené během úvodní fáze. Strava pro dvě léčebné skupiny bude přizpůsobena příjmu energie a makroživin (bílkoviny, tuky, sacharidy) podle přiloženého vzorového jídelního plánu 1400 kcal a pomocí ESHA Food Processor SQL (verze 10.8.0, ESHA Research, Salem OR) aktualizováno 2010 Canadian Nutrient File.

Mléčné výrobky pro skupinu s vysokým obsahem mléka budou darovány společnostmi Agropur Coopérative a Ultima Foods (přiložený dopis o podpoře). V souladu s doporučeními EWCFG budou zahrnuty různé mléčné výrobky (mléko, jogurt, sýr). Za jednu porci bude považován 1 šálek tekutého bílého kravského mléka nebo čokoládového mléka; 1,5 unce sýra; a 1 kelímek jogurtu. Přestože EWCFG považuje 1 porci jogurtu za 0,75 šálku, zvýšíme na 1 šálek, abychom zajistili ekvivalent vápníku ve všech mléčných výrobcích. Očekává se, že minimální příjem vápníku v mléce u skupiny s vysokým obsahem mléka bude 1200 mg/den; příjem vápníku ve stravě bude vyšší. Očekává se, že vápník v potravě kontrolní skupiny bude < 450 mg/den, proto předpokládáme rozšíření přibližně 1000 mg vápníku z potravy denně mezi skupiny. Pokud to energetická hladina jídelních plánů dovolí, začleníme běžný tuk (vs. nízkotučné) mléčné výrobky, aby odrážely skutečný příjem mléčných výrobků Kanaďanů a maximalizovaly příjem CLA. Účastníkům skupiny s vysokým obsahem mléka bude poskytnuta zásoba mléčných výrobků na 2 týdny najednou, v izolovaných transportních taškách.

14.7 Základní návštěva (0. týden)

Po úvodu se účastníci vrátí do laboratoře na základní návštěvu. V této době budou účastníci nejprve informováni, ke které léčbě byli biostatistikem náhodně přiřazeni (pomocí generátoru náhodných čísel) a ke které budou požádáni, aby dodržovali po dobu 16 týdnů. Než budeme pokračovat, prozradíme to, abychom účastníkům poskytli příležitost odstoupit. Ochotní účastníci poté podstoupí sérii měření:

• Hmotnost, jak je popsáno výše.
• Obvod pasu bude měřen dvakrát u stojících účastníků na úrovni hřebene kyčelního kloubu (58) pomocí neelastického metru Gulick II; pokud se měření liší o > 5 %, použije se třetí a použije se průměr dvou nejbližších hodnot. Obvod boků bude měřen dvakrát u stojících účastníků kolem nejširší části hýždí (59); pokud se měření liší o >5 %, použije se třetí a použije se průměr dvou nejbližších hodnot. Převážně androidní obezita bude definována jako poměr pasu k bokům > 0,85, převážně gynoidní obezita bude definována jako poměr pasu k bokům ≤ 0,85 (59, 60).
• Složení těla. Celotělová a regionální tuková hmota a netuková hmota budou měřeny duální energetickou rentgenovou absorpciometrií (DXA) pomocí vějířového paprsku Hologic Wi aktualizovaného softwarem APEX 3.2. Viz obrázek 2. Účastníci budou požádáni, aby nosili pouze spodní kalhotky a nemocniční šaty a odstranili všechny kovové šperky.
• Venipunkce. Flebotomista LifeLabs odebere každému účastníkovi vzorky krve nalačno. Biochemické analýzy, které mají být dokončeny v LifeLabs, zahrnují glukózu, inzulín, 25(OH)D, lipidy (celkový cholesterol; HDL; LDL; triglyceridy), vysoce citlivý C-reaktivní protein (hsCRP) a parathormon (PTH). Různé izomery CLA (c9, t11; t10, c12) v červených krvinkách (Dr. David Ma) a jaterní lipáza, lipoproteinová lipáza a mRNA exprese syntázy mastných kyselin (Dr. Marica Bakovic) bude analyzována v ročních dávkách na University of Guelph. Účastníci jsou povinni se na tuto návštěvu postit; následně zajistíme box na džus a granola tyčinku.
• Vizuální analogová škála (VAS) k posouzení touhy po jídle, hladu, sytosti a budoucí spotřeby jídla (61). Stupnice mají délku 100 mm a na obou koncích jsou ukotveny slovy vyjadřujícími nejvíce pozitivní a negativní hodnocení. VAS bude dokončen v laboratorní konferenční místnosti po venepunkci.
• Měření tlaku v sedě pomocí digitální manžety na měření krevního tlaku (Physio Logic model 106-94, Montreal PQ).

14.8 Návštěva v polovině studie (8. týden) Účastníci zopakují následující testy: hmotnost, obvod pasu/boků, DXA, klidový metabolismus, krevní tlak.

14.9 Závěr studie (16. týden) Účastníci zopakují všechny stejné testy jako během základní návštěvy. 14.10 Adherence a průběžné návštěvy Během studie budou účastníci udržovat denní kontrolní seznam příjmu mléčných výrobků a týdenní deníky o jídle a aktivitě, aby určili dodržování léčebné skupiny, příjem energie a fyzickou aktivitu. Účastníci budou jednou za dva týdny navštěvovat laboratoř, aby odevzdali kontrolní seznamy; nechat si přehodnotit jídelníček; a nechat si změřit váhu, BMI a obvod pasu/boků. Ti ze skupiny mléčných výrobků si vyzvednou zásobu mléčných výrobků na 2 týdny. Účastníci absolvují měsíční FFQ vápníku a vitaminu D (56).

14.11 Analýza dat Opakovaná měření ANOVA bude provedena pro všechna měření shromážděná ve více než dvou časových bodech, aby se určily rozdíly mezi léčebnými skupinami. Patří mezi ně: složení těla (DXA, váha, BMI, obvod pasu/boků), dietní údaje, fyzická aktivita, klidová rychlost metabolismu, vizuální analogová stupnice a krevní tlak. V souladu s návrhem pre/post budou párové t-testy určovat rozdíly v biochemických proměnných měřených v týdnech 0 a 16. K predikci kilogramů ztracené tukové hmoty budou použity regresní analýzy s predikčními proměnnými včetně fenotypu obezity (převážně androidní vs. převážně gynoidní upravený o případné rozdíly v BMI), výchozí stav 25(OH)D, věk atd.

14.12 Překlad znalostí

Komunitní, provinční a národní oslovení spotřebitelů, registrovaných dietologů (RD), dalších zdravotnických pracovníků a vědců bude dosaženo několika způsoby:

• Gwen Laughton a Janine Robertson, spolupracovníci RD se sídlem v Guelphu, poskytnou pomoc KT specificky přizpůsobenou místnímu kontextu. To zahrnuje prezentace a diskusní skupiny s dalšími RD se sídlem v Guelphu, které pomáhají spotřebitelům se zdravotní gramotností, a šíření prostřednictvím Regionální nutriční sítě Waterloo Wellington. Studii také zveřejníme na webovém Ontarijském centru nutričních zdrojů, iniciativě Ontarijské asociace veřejného zdraví.
• Studie DAWL bude zveřejněna na webových stránkách Canadian Inventory of Nutrition and Dietetic Associated Research (CINDAR) a Canadian Obesity Network (CON) a v sekci "Members in Action" newsletteru Dietitians of Canada. PI, spoluřešitelé a postgraduální studenti budou spolupracovat na vědeckých publikacích a prezentacích na výživových setkáních (např. Kanadská společnost pro výživu). Výzkumný tým bude spolupracovat s mediálními specialisty, aby oslovil a vzdělal veřejnost, a se zemědělsko-potravinářským řetězcem (průmysl, neziskové obchodní sdružení, marketingová skupina) včetně Dairy Farmers of Canada, Agropur Coopérative a Ultima Foods, Dairy Farmers of Ontario, Ontario Dairy Council.