Badanie DAWL (nabiał i utrata masy ciała). (DAWL)

„Strefą zerową” badania DAWL będzie Laboratorium Składu Ciała i Metabolizmu Uniwersytetu Guelph (www.uoguelph.ca/bodycomp), pod kierunkiem PI.

Wielkość próbki. Badacze planują zakończyć zbieranie danych na temat łącznie 46 kobiet. Ta wielkość próby opiera się na przewidywanej całkowitej utracie tkanki tłuszczowej (FM) w ciągu 16 tygodni, wynoszącej 5,5 kg w grupie o wysokiej zawartości mleka i 3,8 kg w grupie kontrolnej. Wartości te oparte są na danych opublikowanych z 4 badań (5; 20-22). Aby być konserwatywnym w naszych obliczeniach wielkości próby, zastosowaliśmy wyższą niż podana SD wynoszącą 2,0 kg utraty FM. Razem te wartości wskazywały, że potrzebujemy 23 kobiet w każdej grupie, aby wykryć znaczącą różnicę w całkowitym FM ciała, z 80% mocą i 5% alfa. Oczekuje się, że wyniszczenie i nieprzestrzeganie zaleceń wyniesie około 20% do 25%, dlatego w każdej grupie zostanie zatrudnionych 30 kobiet. Przewidujemy badanie przesiewowe około 300+ kobiet w celu zebrania danych z 16 tygodni dotyczących łącznie 46 kwalifikujących się i przestrzegających zaleceń, jak pokazano na rysunku 1 poniżej.

Kryteria włączenia/wyłączenia. Kryteria włączenia obejmują kobiety niepalące, niebędące w ciąży i nie karmiące piersią w wieku od 18 do 50 lat; przedmenopauzalny (określony na podstawie ustania miesiączki i niedawnej historii menstruacji, aby wykluczyć kobiety w okresie okołomenopauzalnym lub bez miesiączki); BMI ≥25,0 kg/m2 (54); zwykłe spożycie wapnia poniżej EAR wynoszące 800 mg/d (55), które należy zmierzyć za pomocą zwalidowanego kwestionariusza częstotliwości spożycia wapnia i witaminy D (FFQ) (56); brak wrażliwości na nabiał; prawidłowa czynność wątroby i nerek, stężenie wapnia w surowicy i morfologia krwi; 3-miesięczna historia stabilności wagi; oraz gotowość do przestrzegania protokołu badania przez 16 tygodni niezależnie od leczenia, w tym brak zmian w poziomie aktywności fizycznej. Wszyscy użytkownicy suplementów witaminowo-mineralnych zostaną poproszeni o przerwanie suplementacji na 4 tygodnie przed włączeniem do badania (tj. „wymyć”), a także na czas trwania procesu.

Kryteria wykluczenia obejmują naruszenie któregokolwiek z powyższych punktów lub stan zdrowia, który może mieć wpływ na utratę wagi (taki jak cukrzyca, choroby układu krążenia, rak, choroba tarczycy) lub regularne przyjmowanie leków, które mogą powodować to samo (takich jak kortykosteroidy).

Kompleksowa wizyta przesiewowa/zbieranie danych ogólnych. Kobiety, które pomyślnie przejdą wstępną selekcję i wezmą udział w sesji rekrutacyjnej, zostaną ponownie zaproszone do laboratorium, po 12-godzinnym poście (bez jedzenia i picia z wyjątkiem wody), gdzie najpierw zostaną poproszone o podpisanie formularza świadomej zgody. Dalsze dane przesiewowe/tła, które należy zebrać, będą obejmować:

• Biochemia, w tym pełna morfologia krwi, testy czynnościowe wątroby (ALT, AST), azot mocznikowy we krwi, kreatynina i całkowity wapń w surowicy. Uczestnicy zostaną poddani nakłuciu żyły przez flebotomistę LifeLabs (list poparcia w załączeniu). Przewidywany czas oczekiwania na wyniki to 3 dni robocze. Uczestnicy z wartościami mieszczącymi się w normalnych granicach będą kontynuować rejestrację. Na tym etapie rekrutacji uczestnicy z jakimikolwiek znanymi schorzeniami/lekami podejrzewanymi o zakłócanie wyników badania zostaną wykluczeni, dlatego oczekuje się, że większość z nich będzie miała wartości w normalnych granicach.
• Międzynarodowy kwestionariusz aktywności fizycznej (IPAQ) (57) w celu oceny zwyczajowych nawyków związanych z aktywnością.
• Spoczynkowa przemiana materii (kcal/d) w celu określenia poziomów energetycznych zindywidualizowanych planów żywieniowych, które zostaną obliczone jako (RMR x PAL) - 500 kcal/d. RMR będzie mierzona przy użyciu ciągłej kalorymetrii pośredniej w obwodzie otwartym przy użyciu aparatu MAX-IIa (AEI Technologies Inc.). Pomiary RMR będą przeprowadzane z uczestnikami leżącymi rozbudzonymi, ale w całkowitym spoczynku fizycznym, z wentylowanym kapturem założonym na głowę i szyję. Uczestnicy będą poddawani pomiarom przez 30 do 40 minut; pierwsze 5 do 10 minut danych zostanie odrzuconych, aby umożliwić aklimatyzację w środowisku testowym. Po tym teście zapewnimy pudełko z sokiem i batonik granola, aby uczestnicy nie byli głodni. Aby uzyskać spójność między wizytami badawczymi, będziemy mierzyć uczestniczki w fazie folikularnej ich cykli menstruacyjnych.

14.5 Faza wprowadzająca W ciągu dwóch tygodni po kompleksowej wizycie przesiewowej uczestnicy zostaną poproszeni o prowadzenie 3-dniowego rejestru żywności, z którego personel badawczy stworzy zindywidualizowane plany posiłków o ograniczonej wartości 500 kcal, jak opisano poniżej. Od tego momentu uczestnicy będą proszeni o utrzymanie zwykłego poziomu aktywności fizycznej.

14.6 Diety badawcze Uczestnicy otrzymają zindywidualizowane plany posiłków – wysokobiałkowe lub kontrolne – co dwa tygodnie przez cały czas trwania badania. Personel badawczy udzieli im porad dotyczących przydzielonych im diet podczas wizyty wyjściowej i podczas całego badania. Poziomy energetyczne planów posiłków (np. 1200 kcal, 1400 kcal, 1600 kcal, itp.) zostanie określona na podstawie poziomów RMR i PAL w następujący sposób: (RMR x PAL) - 500 kcal/d, gdzie RMR to spoczynkowe tempo przemiany materii (kcal/d, mierzone metodą kalorymetrii pośredniej), PAL to poziom aktywności fizycznej uzyskany z badania przesiewowego IPAQ, a 500 kcal to dzienne ograniczenie energetyczne. Poziomy energii będą dostosowywane w trakcie badania w razie potrzeby. Rzeczywista żywność w planach posiłków będzie oparta na „Dobrym odżywianiu się” z kanadyjskim przewodnikiem żywnościowym (EWCFG, http://www.hc-sc.gc.ca/fn-an/food-guide-aliment/index-eng.php) oraz 3-dniowe rejestry żywności wypełnione podczas fazy wstępnej. Diety dla dwóch leczonych grup zostaną dopasowane pod względem spożycia energii i makroskładników (białka, tłuszczu, węglowodanów) zgodnie z załączonym przykładowym planem posiłków 1400 kcal i przy użyciu ESHA Food Processor SQL (wersja 10.8.0, ESHA Research, Salem OR) zaktualizowany o kanadyjski plik składników odżywczych z 2010 r.

Produkty mleczne dla grupy produktów mlecznych zostaną przekazane przez Agropur Coopérative i Ultima Foods (list poparcia w załączeniu). Zgodnie z zaleceniami EWCFG uwzględnione zostaną różne produkty mleczne (mleko, jogurt, ser). Jedna porcja będzie uważana za 1 szklankę płynnego białego mleka krowiego lub mleka czekoladowego; 1,5 uncji sera; i 1 szklanka jogurtu. Chociaż EWCFG uważa, że ​​1 porcja jogurtu to 0,75 filiżanki, zwiększymy ją do 1 filiżanki, aby zapewnić odpowiednik wapnia we wszystkich produktach mlecznych. Przewiduje się, że minimalne spożycie wapnia w mleku w grupie o dużej zawartości nabiału wyniesie 1200 mg/d; spożycie wapnia w diecie będzie wyższe. Przewiduje się, że wapń w diecie grupy kontrolnej będzie wynosił <450 mg/d, dlatego przewidujemy rozrzut około 1000 mg wapnia w diecie dziennie między grupami. Jeśli pozwolą na to poziomy energii w planach posiłków, włączymy zwykły tłuszcz (w porównaniu z. produktów mlecznych o niskiej zawartości tłuszczu, aby odzwierciedlić faktyczne spożycie nabiału przez Kanadyjczyków i zmaksymalizować spożycie CLA. Uczestnicy grupy wysokomlecznej otrzymają jednorazowo 2-tygodniowy zapas produktów mlecznych, w izolowanych torbach transportowych.

14.7 Wizyta wyjściowa (tydzień 0)

Po wprowadzeniu uczestnicy wrócą do laboratorium na wizytę wyjściową. W tym czasie uczestnicy zostaną najpierw poinformowani, do jakiego leczenia zostali losowo przydzieleni przez biostatystyka (za pomocą generatora liczb losowych) i do którego zostaną poproszeni o przestrzeganie przez 16 tygodni. Ujawnimy to, zanim przejdziemy dalej, aby dać uczestnikom możliwość wycofania się. Chętni uczestnicy zostaną następnie poddani serii pomiarów:

• Waga jak opisano powyżej.
• Obwód talii zostanie zmierzony dwukrotnie u uczestników stojących na wysokości grzebienia biodrowego (58) za pomocą nieelastycznej taśmy mierniczej Gulick II; jeśli pomiary różnią się o > 5%, zostanie podjęta trzecia i zostanie użyta średnia z dwóch najbliższych wartości. Obwód bioder będzie mierzony dwukrotnie u stojących uczestników wokół najszerszej części pośladków (59); jeśli pomiary różnią się o > 5%, zostanie podjęta trzecia i zostanie użyta średnia z dwóch najbliższych wartości. Przeważająca otyłość androidalna zostanie zdefiniowana jako stosunek talii do bioder > 0,85, głównie otyłość gynoidalna zostanie zdefiniowana jako stosunek talii do bioder ≤0,85 (59, 60).
• Składu ciała. Masa tkanki tłuszczowej całego ciała oraz regionalna i masa beztłuszczowa zostaną zmierzone za pomocą absorpcjometrii rentgenowskiej o podwójnej energii (DXA) przy użyciu wiązki wachlarzowej Hologic Wi zaktualizowanej za pomocą oprogramowania APEX 3.2. Zobacz Ryc. 2. Na czas tego testu uczestnicy zostaną poproszeni o założenie tylko majtek i fartucha szpitalnego oraz o zdjęcie wszelkiej metalowej biżuterii
• nakłucie żyły. Specjalista LifeLabs pobierze próbki krwi na czczo od każdego uczestnika. Analizy biochemiczne wykonywane w LifeLabs obejmują glukozę, insulinę, 25(OH)D, lipidy (cholesterol całkowity; HDL; LDL; trójglicerydy), białko C-reaktywne o wysokiej czułości (hsCRP) i hormon przytarczyc (PTH). Różne izomery CLA (c9, t11; t10, c12) w krwinkach czerwonych (Dr. David Ma) oraz lipazy wątrobowej, lipazy lipoproteinowej i ekspresji mRNA syntazy kwasów tłuszczowych (Dr. Marica Bakovic) będą analizowane w corocznych partiach na Uniwersytecie w Guelph. Uczestnicy są zobowiązani do poszczenia podczas tej wizyty; później zapewnimy pudełko z sokiem i batonik granola.
• Wizualna skala analogowa (VAS) do oceny chęci do jedzenia, głodu, sytości i przewidywanego spożycia pokarmu (61). Skale mają długość 100 mm i są zakotwiczone na obu końcach słowami wyrażającymi najbardziej pozytywne i negatywne oceny. VAS zostanie ukończony w sali konferencyjnej laboratorium po nakłuciu żyły.
• Ciśnienie krwi w pozycji siedzącej przy użyciu cyfrowego mankietu do pomiaru ciśnienia krwi (Physio Logic model 106-94, Montréal PQ).

14.8 Wizyta w trakcie badania (tydzień 8) Uczestnicy powtórzą następujące testy: waga, obwód talii/bioder, DXA, spoczynkowa przemiana materii, ciśnienie krwi.

14.9 Wnioski z badania (tydzień 16) Uczestnicy powtórzą wszystkie te same testy, co podczas wizyty początkowej. 14.10 Wizyty kontrolne i okresowe W trakcie badania uczestnicy będą prowadzić listę kontrolną dziennego spożycia produktów mlecznych oraz cotygodniowe dzienniki żywności i aktywności, aby określić przestrzeganie grupy terapeutycznej, spożycie energii i aktywność fizyczną. Co dwa tygodnie uczestnicy będą odwiedzać laboratorium, aby oddać listy kontrolne; ponownie ocenić plany posiłków; i zmierz wagę, BMI i obwód talii/bioder. Osoby z grupy mleczarskiej otrzymają 2-tygodniowy zapas produktów mlecznych. Uczestnicy będą wypełniać miesięczne FFQ wapnia i witaminy D (56).

14.11 Analiza danych Powtórzone pomiary ANOVA zostaną przeprowadzone dla wszystkich pomiarów zebranych w więcej niż dwóch punktach czasowych, aby określić różnice pomiędzy grupami leczenia. Należą do nich: skład ciała (DXA, waga, BMI, obwód talii/bioder), dane dotyczące diety, aktywność fizyczna, spoczynkowe tempo metabolizmu, wizualna skala analogowa i ciśnienie krwi. Zgodnie z projektem przed/po, sparowane testy t określą różnice w zmiennych biochemicznych mierzonych w tygodniach 0 i 16. Analizy regresji zostaną wykorzystane do przewidywania utraty kilogramów masy tłuszczowej, ze zmiennymi predykcyjnymi, w tym fenotypem otyłości (głównie androidalna vs. głównie gynoidalna, skorygowana o wszelkie różnice w BMI), wyjściowy status 25(OH)D, wiek itp.

14.12 Tłumaczenie wiedzy

Dotarcie do społeczności, prowincji i kraju do konsumentów, zarejestrowanych dietetyków (RD), innych pracowników służby zdrowia i naukowców zostanie osiągnięte na wiele sposobów:

• Gwen Laughton i Janine Robertson, współpracownicy RD z Guelph, zapewnią pomoc KT specjalnie dostosowaną do lokalnego kontekstu. Obejmuje to prezentacje i grupy dyskusyjne z innymi RD z siedzibą w Guelph, aby pomóc konsumentom w zdobywaniu wiedzy na temat zdrowia oraz rozpowszechnianie za pośrednictwem Regionalnej Sieci Żywienia Waterloo Wellington. Wyniki badania opublikujemy również w internetowym Centrum Zasobów Żywieniowych Ontario, będącym inicjatywą Ontario Public Health Association.
• Badanie DAWL zostanie opublikowane na stronach internetowych Canadian Inventory of Nutrition and Dietetic Associated Research (CINDAR) i Canadian Obesity Network (CON) oraz w sekcji „Members in Action” biuletynu Dietitians of Canada. IP, współbadacze i doktoranci będą współpracować przy publikacjach naukowych i prezentacjach na spotkaniach żywieniowych (m.in. Kanadyjskie Towarzystwo Żywienia). Zespół badawczy będzie współpracował ze specjalistami ds. mediów, aby dotrzeć do opinii publicznej i edukować ją, a także z łańcuchem rolno-spożywczym (przemysł, stowarzyszenie handlowe non-profit, grupa marketingowa), w tym Dairy Farmers of Canada, Agropur Coopérative i Ultima Foods, Dairy Farmers Ontario, Ontario Dairy Council.