TGF-beta rezistentní cytotoxické T-lymfocyty v léčbě EBV-pozitivního nasofaryngeálního karcinomu / RESIST-NPC

Pacientovi bude odebrána krev za účelem vytvoření LMP/BARF1/EBNA1 (NPC)-specifických T buněk. K růstu NPC-specifických T-buněk musíme použít speciální buňky zvané antigen-prezentující buňky, které trénují pacientovy T-buňky, aby byly NPC specifické. Buňky prezentující antigen, tzv. monocyty nebo dendritické buňky, budou pěstovány/izolovány z pacientovy krve. Kromě toho používáme buněčnou linii nazvanou K562 jako buňky prezentující antigen, do kterých jsou vloženy geny, které podporují růst T-buněk pacienta. Buňky K562 jsou rakovinné buňky. Pokud by byly injekčně podány, mohly by způsobit rakovinu. Buňky byly ošetřeny zářením, takže nemohou růst.

Tyto buňky prezentující antigen jsou potaženy speciálně vyrobenou směsí proteinových fragmentů LMP, EBNA1 a BARF nazývaných peptidy. Tyto potažené buňky prezentující antigen se pak použijí k vytvoření NPC-specifických T buněk pacienta v přítomnosti růstových faktorů. Aby se DNR připojil k povrchu těchto NPC-specifických T-buněk, vložili jsme také DNR gen do NPC-specifických T-buněk (DNR.NPC-specifické T-buňky). To se provádí pomocí viru zvaného retrovirus, který byl vytvořen pro tuto studii. Tento virus přenese gen DNR do buněk.

Jakmile vytvoříme dostatečný počet DNR.NPC-specifických T buněk, zmrazíme buňky a otestujeme je, abychom se ujistili, že rozpoznávají EBV proteiny přítomné v NPC.

Pacienti budou léčeni 1) buď dvěma dávkami T lymfocytů specifických pro DNR.NPC (druhá dávka bude podána 2 týdny po první dávce) nebo 2) cyklofosfamidem a fludarabinem po dobu 3 dnů před podáním T lymfocytů specifických pro DNR.NPC buňky.

Cyklofosfamid a fludarabin budou podávány jehlou zavedenou do žíly nebo pacientova portu-a-cath).

T buňky budou rozmraženy a budou podávány infuzí centrální linií nebo žílou na paži pacienta po dobu 1 až 10 minut. Pacienti budou po infuzi sledováni na klinice po dobu 1 až 4 hodin.

Všechny léčebné postupy bude poskytovat Centrum pro buněčnou a genovou terapii v Texaské dětské nemocnici nebo Houstonské metodistické nemocnici.

Lékařské testy před léčbou:

Před léčbou pacient podstoupí řadu standardních lékařských testů:

Fyzikální vyšetření Zobrazovací studie Krevní testy pro měření krevních buněk, funkce ledvin a jater Měření nádoru pomocí rutinních zobrazovacích studií. Ke sledování pacientova nádoru použijeme zobrazovací studii, která byla použita dříve: počítačový tomogram (CT), magnetická rezonance (MRI) nebo pozitronová emisní tomografie (PET/CT).

Lékařské testy během a po léčbě:

Pacient dostane standardní lékařské testy, když dostává infuze a poté:

Fyzikální vyšetření Krevní testy pro měření krevních buněk, funkce ledvin a jater Zobrazovací studie 8 týdnů po první infuzi T lymfocytů (pro pacienty, kteří dostávají pouze T lymfocyty specifické pro DNR.NPC) nebo Zobrazovací studie 6 týdnů po infuzi T lymfocytů (např. pacientů užívajících fludarabin a cyklofosfamid před infuzí T-buněk specifických pro DNR.NPC).

Chcete-li se dozvědět více o tom, jak DNR.NPC-specifické T buňky fungují a jak dlouho vydrží v těle, bude před chemoterapií odebráno dalších 60 ml nebo 3 ml/kg tělesné hmotnosti krve (podle toho, co je méně) (např. pacienti, kteří dostávají chemoterapii), v den infuze T-buněk (před a na konci infuze T-buněk), 1, 2, 3, 4, 6 a 8 týdnů (poslední časový bod pouze pro pacienty příjem pouze DNR.NPC-specifických T-buněk) po infuzi T-buněk a každé 3 měsíce po dobu 1 roku, každých 6 měsíců po dobu 4 let, poté jednou ročně po dobu celkem 15 let. Jeden další vzorek krve může být odebrán 3 až 4 dny po 1. infuzi T-buněk; toto je volitelné. Tento objem je považován za bezpečný, ale může být snížen, pokud je pacient anemický. Kromě krevních testů dostane pacient 2 zobrazovací studie, jak je uvedeno výše.

Pokud jsou během výše uvedených časových bodů v krvi pacienta nalezeny specifické T buňky DNR.NPC v určitém množství, může být nutné odebrat dalších 5 ml krve pro další testování.