Pilotní hodnocení účinku suplementace riboflavinem na krevní tlak a možná modifikace účinku genotypem MTHFR C677T (RiboBP)

Jedná se o randomizovanou, jednoduše zaslepenou, placebem kontrolovanou studii suplementace mikronutrienty s ohledem na každý genotyp. Biobanka Keneba bude použita k identifikaci všech potenciálních účastníků, tj. jedinců s genotypem MTHFR C677T pro tuto pilotní studii.

Vyšetřovatelé pozvou všech 163 dospělých s genotypem CT v biobance Keneba a podobný počet homozygotů CC shodného s věkem, pohlavím a vesnicí, aby se zúčastnili studie. Terénní asistenti navštíví domovy potenciálně způsobilých účastníků, aby poskytli úplné informace o účelu a metodách studie, potenciálních rizicích a přínosech a právech účastníků. Účastníci poté poskytnou písemný informovaný souhlas. Terénní asistent zajistí, aby proces konverzace a souhlasu probíhal v soukromé oblasti nebo místnosti, aby bylo zachováno soukromí a důvěrnost. Po vyloučení a nesouhlasu vyšetřovatelé očekávají alespoň 102 subjektů na skupinu. S použitím odhadů směrodatné odchylky z naší vlastní a publikované literatury (14 mmHg pro SBP a 10 mmHg pro DBP) budou mít vyšetřovatelé 95% jistotu (při p<0,05) v detekci rozdílů 3,88 mmHg pro SBP a 2,76 mmHg pro DBP.

Účastníci v každé ze skupin budou randomizováni na riboflavin nebo placebo v poměru 1:1 podle počítačem generovaného randomizačního schématu. To bude provedeno náhodným přiřazením čísel studií v rámci přenašečů CT do léčebné skupiny a zařazením účastníků postupně od nejnižšího po nejvyšší identifikační číslo studie. Subjekty budou randomizovány po vydání studovaného léku spojeného s identifikačním číslem studie dvojice subjektů. Terénní, klinický, laboratorní personál a personál pro zadávání dat bude zaslepen, pokud jde o genotyp účastníků studie a identitu léčebného ramene, do kterého je účastník zařazen od doby randomizace do doby odslepení. Placeba jsou navržena tak, aby byla k nerozeznání od aktivních léků. Dvojité zaslepení není možné, protože subjekty randomizované na riboflavin budou mít žlutou moč (neškodný výsledek, který jim bude vysvětlen).

Oprávnění účastníci budou poté pozváni k návštěvě terénní stanice MRC Keneba. Při úvodní návštěvě budou provedena sociodemografická data a antropometrická měření (výška, váha, obvod pasu a boků a složení těla pomocí BIA). Poté bude TK měřen automatickým zařízením v triplikátech za použití standardního protokolu stejným výzkumníkem, který bude zaslepený vůči genotypu a léčené skupině. Vyšetřovatelé také odeberou 10 ml vzorku krve pro laboratorní posouzení stavu vitaminu B. Během intervenční fáze studie budou vyšetřovatelé účastníkům doplňovat 5 mg/den riboflavinu nebo odpovídající placebo po dobu 16 týdnů. Pilulky budou dodávány každý týden s pokyny k vrácení všech nepoužitých pilulek. Další měření TK podle podobného protokolu jako dříve bude provedeno za 8 týdnů a také za 16 týdnů po zahájení intervence. Nakonec bude v 16. týdnu odebrán vzorek krve o objemu 10 ml. Vzorky krve budou analyzovány na riboflavin, homocystein, folát z červených krvinek, kobalamin a pyridoxin. Účastníkům, kteří byli randomizováni k podávání placeba, bude na konci studie nabídnuta suplementace riboflavinem.

Výzkumníci použijí víceúrovňový modelovací test pro hlavní účinek intervence na delta TK od výchozí hodnoty do 16 týdnů (a opakování po 8 týdnech) upravený podle pohlaví a věku. Chí-kvadrát test bude použit k testování změn frekvence zvýšeného TK (>140/90). Poté vyšetřovatelé otestují modifikaci účinku podle varianty MTHFR.