Urinární 5-HIAA pro diagnostiku akutní apendicitidy u dětí, pomáhá?

1.1- Návrh studie: Pacienti byli náhodně rozděleni do dvou skupin A a B. Randomizace bylo dosaženo pomocí metody uzavřené obálky.

Skupina A (n= 95) zahrnovala pacienty, kteří byli hodnoceni pomocí našeho institucionálního protokolu. Tento protokol sestává z hodnocení dětí pomocí PAS, ultrazvuku břicha a pánve a sérových hladin C-reaktivního proteinu.

Skupina B (n= 96) zahrnovala děti, které byly hodnoceny podle našeho institucionálního protokolu. Kromě toho všechny děti poskytly vzorek moči ze středního proudu pro detekci 5-HIAA v moči. Byla pořízena podrobná historie. Šlo především o vyloučení případů s anamnézou potravin nebo léků, které mohou ovlivnit hladinu serotoninu v moči, jako jsou inhibitory monoaminooxidázy.

Všechna související klinická data a laboratorní vyšetření byla zaznamenána. 1.2- Kvantifikace hladiny 5-HIAA v moči: Od každého účastníka byl získán náhodný vzorek moči k posouzení hladiny 5-HIAA v moči pomocí techniky kompetitivního enzymového imunosorbentního testu na pevné fázi (ELISA). Komerční souprava byla zakoupena a poskytnuta společností LDN, DN Labor Diagnosika Nord GmbH & Co. Nordhorn, Německo; Katalogové číslo: BA E-1900. Jak uvádí výrobce, vzorky moči byly methylovány za účelem derivatizace 5-HIAA. Na dodanou mikrotitrační destičku jsou přidány metylované standardy, kontroly a vzorky. Poté bylo přidáno 5-HIAA antisérum a inkubováno po dobu 1 hodiny. Po ekvilibraci se přebytečný volný antigen a komplexy antigen-protilátka vymyjí. Navázané navázané protilátky na pevnou fázi byly detekovány anti-králičím IgG-peroxidázovým konjugátem za použití TMB jako substrátu. Reakce se měří na čtečce mikrodestiček (Tecan Spectra II, Švýcarsko), při 450 nm. Kvantifikace neznámé koncentrace vzorku se zpracuje nakreslením standardní křivky se známými koncentracemi standardu. Výsledky 5-HIAA byly vyděleny kreatininem v moči a vyjádřeny jako mg/g kreatininu. Inter-test a intra-test variační koeficient byly 10,8 %, respektive 8,6 %.

1.3- Klinický výsledek: Diagnóza akutní apendicitidy byla potvrzena histopatologickým vyšetřením resekovaného apendixu. Podle operačních nálezů a patologických zpráv se stav pohyboval od negativního apendixu až po různé typy akutní apendicitidy (katarální, hnisavá, perforovaná nebo gangrenózní).

Děti nesplňovaly plně požadavky pro diagnózu, protože akutní apendicitida byla propuštěna na symptomatickou léčbu nebo po odeslání na dětskou pohotovost.

Převzaté případy byly zaznamenány. 1.4- Statistická analýza: Statistická analýza byla provedena pomocí IBM SPSS V. 24 (IBM, NY, USA). Pro pacienty zařazené do studie byla získána popisná analýza. Shapiro-Wilkův test byl proveden ke kontrole normální distribuce závislých proměnných, jako je 5-HIAA v moči, CRP a histopatologické nálezy. K porovnání kategoriálních dat byl použit test X2. Studentský T-test byl použit k porovnání normálně rozdělené proměnné mezi dvěma skupinami. Mann-Whitney U test a Kruskal-Wallisův test byly použity pro srovnání nenormálně distribuovaných proměnných dvou, respektive více než dvou skupin. Binární logistická regrese byla provedena za účelem stanovení nezávislých prediktorů akutní apendicitidy a ke kombinaci výsledků 5-HIAA a PAS v obou skupinách. Pearsonova korelace byla použita pro korelaci 5-HIAA v moči s dalšími prediktory akutní apendicitidy. Křivka operační charakteristiky přijímače (ROC) byla zkonstruována pro posouzení diagnostické účinnosti prediktorů akutní apendicitidy. Optimální mezní hodnota pro každý prediktor byla hodnocena pomocí Youdenova indexu. Hodnota AUC se pohybovala od 0,5 do 1,0. Schopnost diagnostického testu identifikovat pacienty s apendicitidou byla považována za optimální, protože hodnota AUC dosáhla blíže 1,0. P-hodnota <0,05 byla považována za významnou