Hodnocení účinnosti léčby stromální vaskulární frakcí u osteoartrózy kolena

Výzkum spočívá v jednoleté navazující prospektivní observační studii. Zahrnuje pacienty a pacienty (starší 18 let) s jednostrannou nebo oboustrannou osteoartrózou kolena léčenou intraartikulární injekcí stromální vaskulární frakce (SVF), kterou vyvinula Cellab Laboratory (Celstem®).

Cílem studie je posoudit účinnost léčby SVF proti bolesti u pacientů s osteoartrózou kolene. K posouzení bolesti se používá vizuální analogová škála (VAS).

Sekundárně se studie zaměřuje na stanovení rozdílů před léčbou SVF v měření sekundárních výsledků: funkčnosti, kvalitě života a invaliditě. K hodnocení těchto opatření se používá škála KOOS, dotazník Short Form-36 (SF-36) a Světová zdravotnická organizace Disability Assessment Schedule 2.0 (WHODAS 2.0). Dále si klade za cíl popsat a zhodnotit regeneraci kloubní chrupavky každého jedince systematickým srovnáním zobrazení magnetickou rezonancí (MRI) před a jeden rok po léčbě SVF, měřeno škálou MOCART (Magnetic Resonance Observation of Cartilage Repair Tissue). Dále budou identifikovány specifické sociodemografické a klinické faktory, které mohou predikovat nebo ovlivnit terapeutické účinky a jejich korelaci s biologickými daty (celularita, imunofenotyp, potence tvorby kolonií a sterilita). Budou hlášeny nežádoucí účinky nebo vedlejší účinky související s léčbou.

Primární i sekundární výsledná měření jsou hodnocena před léčbou, 1 měsíc, 6 měsíců a jeden rok po léčbě s výjimkou hodnocení invalidity a radiologických znaků kloubní chrupavky, které se provádějí pouze před a jeden rok po léčbě. Radiologické posouzení dle MOCART klasifikace provádí radiolog. Tento specializovaný lékař si není vědom vývoje pacientů s cílem minimalizovat subjektivní zkreslení. Kromě toho se shromažďují biologická data produktu SVF, jako je množství vzorku extrahované tukové tkáně, účinná dávka, celularita, imunofenotyp, kolonie vzorků potence a sterilita, aby bylo možné produkt lépe popsat a bylo možné korelovat klinický účinek s biologickým funkce.

Studie byla schválena Etickou komisí klinického výzkumu nemocnice Nostra Senyora de Meritxell dne 20. září 2018. Očekává se, že bude trvat 4 roky, od roku 2018 do roku 2022.

Velikost vzorku se určuje pomocí kalkulátoru velikosti vzorku GRANMO (verze 7.12. dubna 2012). Očekává se, že náhodný vzorek 77 jedinců postižených osteoartrózou kolenního kloubu bude dostatečný k odhadu, s 95% spolehlivostí a přesností +/- 5 procentních jednotek, procento populace, které se očekává kolem 5 % ve studované populaci (populace regiony Andorra a Katalánsko). Očekává se požadovaný náhradový poměr ve výši 5 %.

Jakmile je indikace léčby provedena a pacientem přijata, pacienti, kteří splňují kritéria zařazení (viz Způsobilá kritéria), podepíší informovaný souhlas. Je také podepsán souhlas s přenosem osobních údajů lékařskému týmu.

Pacienti mohou být odvoláni, pokud nevyplní dotazníky v předem stanoveném čase a formě nebo pokud dojde ke ztrátě jeho sledování. Odnětí pacienta nepředstavuje pro pacienta žádnou újmu při kontrole jeho onemocnění nebo při jeho léčbě lékařským týmem nebo laboratoří.

Pro sběr klinických dat shromažďuje hlavní zkoušející (PI) nebo spolupracovníci při každé následné lékařské návštěvě pacientovu anamnézu a fyzikální vyšetření. Pro lepší shodu pacienta s protokolem studie byla vyvinuta webová platforma (https://www.cellab.com/escalas-de-dolor). Byl navržen společností PI za pomoci externího počítačového týmu. Umožňuje virtuální pacientský výkon funkčních vah v celém protokolu studie. Tento nástroj ukládá všechna data zadaná pacienty do databáze Excel, kterou lze exportovat pro statistickou analýzu pomocí PI. Platforma navíc varuje pokaždé, když má pacient dotazník vyplnit, nebo i když nevyhoví včas a/nebo stanovené formě.

Přestože se jedná o observační studii, studovaným objektem je specifická léčba regenerativní medicíny: léčba SVF vyvinutá Cellab Laboratory (Celstem®). Hlavním rysem této úpravy je, že zvyšuje důležitost této studie, je to, že použitý produkt je vyroben podle přísných výrobních pokynů, které zajišťují jeho reprodukovatelnost, kvalitu a bezpečnost. Je schválena orgány vlády Andorry pro její použití.

Je třeba poznamenat, že postup pro získání, přípravu a aplikaci Celstemu® provádějí vždy stejní odborníci: plastický chirurg, biotechnolog a lékař fyzikální medicíny a rehabilitace (který se jeví jako PI), resp. vyhnout se mezilidským předsudkům v procesu.

Získání Celstem® vyžaduje liposukci břišního tuku. Provádí ji plastický chirurg pod sedací a lokální anestezií na operačním sále pod dohledem anesteziologa. Množství extrahované tukové tkáně se liší podle dostupnosti u každého pacienta, s minimální extrakcí 200 ml. Extrahovaná tkáň je okamžitě transportována (do 1 hodiny) do Cellab Laboratory ve standardizovaných podmínkách chlazení. Pro zajištění jeho uchování je vyplněn certifikát sledovatelnosti.

Příprava produktu se provádí výhradně v laboratorní čisté místnosti, v souladu s normami American Association of Blood Banks (AABB) s podmínkami hygieny a biologické bezpečnosti. Vyžaduje důkladné promytí tuku extrahovaného fyziologickým roztokem, aby se odstranily zbytky krve nebo lidokainu a adrenalinu použitého v procesu extrakce. Potom se tuk zahustí a smíchá s enzymatickým štěpícím roztokem (sestávajícím z kolagenázy v množství 0,75 mg/ml). Vše se inkubuje při 37 °C a míchá po dobu 30-40 minut. Po dokončení tohoto procesu se kolagenáza inaktivuje prostřednictvím lidského albuminu a poté se znovu důkladně promyje fyziologickým roztokem, aby se odstranily zbytky nestráveného tuku a kolagenázy. Získá se koncentrovaná buněčná suspenze ve zmenšeném objemu.

Jakmile je produkt připraven, vrátí se na kliniku, opět za správných chladících podmínek a se správně doplněným certifikátem sledovatelnosti, aby bylo zajištěno jeho správné uchování. Aplikace ošetření se provádí ve stejný den extrakce, v určitém okamžiku do 6 hodin po extrakci. V rámci opatření na sterilitu se provádí intraartikulární infiltrace léčby SVF (Celstem®) na postiženém koleni nebo kolenech. V případě potřeby se provede předchozí aspirace synoviální tekutiny. Po dokončení procedury jsou poskytnuta rehabilitační doporučení a informace o klinickém sledování.