Nové biomarkery a plazmatický protrombotický potenciál u srdeční transtyretinové amyloidózy

Úvod: Rozvoj srdeční amyloidózy je způsoben ukládáním špatně poskládaných nerozpustných proteinů v extracelulární matrix tkání. Více než 30 prekurzorových proteinů může tvořit amyloidní fibrily, ale dva typy odpovídají za 95 % případů amyloidní kardiomyopatie (CA): amyloidóza lehkého řetězce imunoglobulinu (AL) a amyloidóza transtyretinu (ATTR). Existují dvě formy ATTR – získaný ATTR divokého typu (ATTRwt) a dědičná forma (ATTRm), vyvíjející se na základě mutací v genu pro transtyretin (TTR) [1]. U pacientů s CA se s progresí onemocnění rozvíjí srdeční selhání, a pokud se neléčí, vede onemocnění během 6 měsíců až 3 let ke smrti. Vzhledem k jedinečné patologii onemocnění zahrnuje klinický obraz rozvoj: periferní polyneuropatie, autonomní dysfunkce a zvýšené riziko tromboembolických komplikací. Důležitým prvkem klinického obrazu onemocnění je zvýšené riziko tromboembolických komplikací nezávisle na výskytu fibrilace síní a přítomnost intrakardiálních trombů. Patomechanismus může souviset se zvýšením plnícího tlaku nebo amyloidní infiltrací vedoucí k poškození myokardu a endoteliální dysfunkci, která může aktivovat protrombotickou zánětlivou kaskádu, což má za následek zvýšený trombogenní potenciál. Scintigrafie se stala klíčovou technikou při identifikaci pacientů s ATTR – při absenci detekovatelného monoklonálního proteinu umožňuje neinvazivní diagnostiku ATTR [2]. Vzhledem k vývoji terapií specifických pro onemocnění (stabilizační léky, genová terapie) je důležité diagnostikovat onemocnění v časném stadiu, kdy jsou příznaky relativně mírné, a nasazení léčby umožňuje zastavit rozvoj onemocnění a snížit úmrtnost. V současné době jsou k dispozici omezené publikované údaje o potenciální roli nových biomarkerů srdečního selhání při hodnocení ATTR kardiomyopatie, zejména při hodnocení asymptomatických nosičů patogenních variant TTR [3,4,5]. Navíc existuje jen málo literárních zpráv o přímém hodnocení koagulačního systému u této skupiny pacientů a patomechanismus zvýšeného tromboembolického rizika není prozkoumán [5].

Účel studie: Posoudit diagnostickou hodnotu biomarkerů souvisejících se srdečním selháním (růstový diferenciační faktor-15 (GDF15), solubilní suprese tumorigenicity-2 (ST2), galektin-3), amyloidóza (TTR, tkáňový inhibitor metaloproteinázy- 1 (TIMP-1), matrix metaloproteináza-9 (MMP-9, matrix metaloproteináza-9), lehký řetězec neurofilamentů (NfL)) a generační potenciál trombinu jako marker protrombotického stavu v průběhu ATTR.

Metody: Tato prospektivní jednocentrická studie bude zahrnovat po sobě jdoucí pacienty s diagnózou ATTR kardiomyopatie (SKUPINA 1, n=30), asymptomatické nosiče patogenních variant TTR (SKUPINA 2, n=30) a odpovídající kontrolní skupinu zdravých dobrovolníků ( SKUPINA 3, n=20). Materiál pro výzkum byl shromážděn a zajištěn od všech účastníků studie. Po udělení informovaného souhlasu budou všichni pacienti testováni metodou ELISA z periferní krve (enzyme-linked immunosorbent assay) GDF15, ST2, TTR, TIMP-1, MMP-9, galektin-3, NfL. Hodnoty těchto biomarkerů budou porovnány v podskupinách a korelovány s klinickými daty, výsledky laboratorních testů, echokardiografií včetně analýzy globálního napětí levé komory (GLS) a scintigrafií. Kromě toho bude u obou skupin pacientů testován protrombotický potenciál plazmy pomocí metody kalibrovaného automatického trombogramu (CAT) v souladu s protokolem dříve používaným v laboratoři [odkaz]. Výsledky budou porovnány s referenčními hodnotami pro kontrolní skupinu. Všechny testy budou prováděny kvalifikovaným a zkušeným personálem.

Očekávané výsledky: Projekt poskytne informace o významu biomarkerů při hodnocení ATTR kardiomyopatie, zejména při hodnocení asymptomatických nosičů patogenních variant TTR, což se může promítnout do vytvoření diagnostického algoritmu pro včasnou identifikaci vývoje choroba. Navíc nám umožní určit, zda jsou pacienti se srdeční ATTR charakterizováni protrombotickým stavem, který dosud nebyl v literatuře popsán a může mít potenciální klinické důsledky. Získané výsledky mohou být použity jako výchozí data pro další výzkum koagulačního systému v ATTR v navazujících vědeckých projektech.