Laskimotromboembolia tyypin 1 myotonisessa dystrofiassa (DM1-VTE)

Tutkijat ovat tunnistaneet 1084 tyypin 1 myotonista dystrofiaa (DM1) sairastavan potilaan kohortissa laskimotromboembolian (VTE) 10 %:n esiintyvyyden ja 7‰ vuotuisen ilmaantuvuuden, mikä on 10 kertaa korkeampi kuin yleisväestössä ja 3-kertainen verrattuna. potilaille, joilla on muita myopatioita.

Potilaiden kliiniset oireet olivat hyvin samankaltaisia ​​kuin potilailla, joilla oli vakavia hyperkoaguloituvia tiloja, jotka johtuivat hyytymiseen, fibrinolyysiin tai niiden säätelyyn osallistuvia tekijöitä koodaavien geenien mutaatioista, ja ne olivat yleinen kuolinsyy.

Tutkijan tietojen mukaan tätä VTE:n ja DM1:n välistä yhteyttä ei ole koskaan raportoitu tähän mennessä, eikä mikään muu tiimi ole käynnistänyt kilpailevaa projektia tästä aiheesta.

Tutkijat olettavat, että VTE DM1:ssä voi liittyä hyperkoaguloituvaan tilaan, joka johtuu epätasapainosta hyytymisprosessien ja fibrinolyysiominaisuuksien välillä. Koska patogeenisten CTG-toistojen ilmentyminen DM1:ssä johtaa RNA:n toiminnan vahvistumismekanismiin, tutkijat ehdottavat, että nämä poikkeavuudet voivat johtua vaihtoehtoisesta silmukoinnin väärinsäätelystä ja/tai koagulaation, fibrinolyysitekijöiden tai muiden niiden säätelyyn liittyvien tekijöiden epänormaalista geeniekspressiosta. .

Tutkijat käyttivät ehdokasgeenistrategiaa seuloakseen 33 hemostaasitekijöitä koodaavan geenin silmukointiprofiileja DM1-kontekstissa. Käyttämällä laajamittaisia ​​ilmentymistietosarjoja DM1-kudosnäytteistä luurankolihaksista ja sydämestä, tutkijat tunnistivat silmukointivirheitä neljässä hemostaasiin osallistuvassa geenissä, erityisesti kolmessa, jotka osallistuivat fibrinolyyttiseen järjestelmään: PLAT, PLAU ja SERPINE1. Näitä alustavia analyysejä ei kuitenkaan tehty maksanäytteille, kun taas hemostaasitekijöitä koodaavat geenit syntetisoidaan ja ilmentyvät pääasiassa maksassa. Maksan ja monosyyttien/megakaryoottien RNA-näytteiden analyysi näyttää olevan olennainen vaihe.

Tavoitteena on (i) tutkia hemostaattisia ominaisuuksia DM1-potilaiden kohortissa, joilla on tai ei ole anamneesissa laskimotromboembolia, jotta voidaan määrittää, voiko hyperkoaguloituva tila liittyä DM1:een ja voiko se korreloida laskimotromboembolian esiintymiseen, ja (ii) suorittaa globaali transkriptominen lähestymistapa käyttämällä massiivista rinnakkaissekvensointia (RNAseq) maksassa ja monosyyteissä/megakaryooteissa. DM1-potilailta saadut RNA-näytteet auttavat tunnistamaan ehdokasgeenejä, joilla on muuttunut ilmentyminen tai vaihtoehtoinen silmukointivirhe, joka voi olla VTE:n taustalla DM1:ssä.

Tutkimus sisältää kaksi toisiaan täydentävää osaa DM1-potilailla, joilla on tai ei ole VTE:tä ja terveitä vapaaehtoisia: hemostaasitestit ja transkriptominen analyysi RNA-näytteistä, jotka on eristetty maksabiopsioista ja veren monosyytti-/megakaryosyyttinäytteistä. Tutkimukseen osallistuu kolme ryhmää: Ryhmä 1 (kliininen tutkimus), ryhmä 2 (hematologia) ja ryhmä 3 (transkriptominen analyysi).

Ryhmä 1 suorittaa hemostaasitestit ja ryhmä 2 analysoi (i) 100 potilaasta, jotka ryhmä 1 on mahdollisesti ilmoittautunut tutkijalaitokseen, jotka ovat yli 18-vuotiaita ja joilla on geneettisesti todistettu DM1, saatuaan kirjallisen suostumuksen ilman nykyistä antitromboottista hoitoa, mukaan lukien 80 ilman laskimotromboembolia ja 20, joilla on henkilökohtainen anamneesissa laskimotromboembolia, ja (ii) 30 tervettä vapaaehtoista iän ja sukupuolen mukaan. RNAseq suoritetaan (i) maksakudokselle, jotka on saatu 3 potilaalta, joilla on DM1 ja 6 kontrollia, ja (ii) monosyyteille/megakaryosyyteille, jotka on eristetty 15 DM1-potilaan verestä (7 VTE:llä ja 8 ilman VTE) ja 15 verrokkia, jotka on mahdollisesti ilmoittautunut tutkimukseen. opiskella. Sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerit ovat samanlaiset kuin hemostaasiominaisuuksia koskevaan tutkimukseen osallistuvien potilaiden kriteerit.

Maksakudoksia on jo saatavilla kudospankissa. Ryhmä 1 kerää verta DM1-potilailta ja kontrolleilta. Ryhmä 2 eristää ja viljelee monosyytit ja megakaryosyytit.

Ryhmä 3 erottaa kokonais-RNA:n maksanäytteistä, monosyyteistä ja megakaryosyyteistä Centre National de Génotypagelle RNA-sekvensointia varten ja suorittaa tietojen analyysin ja äskettäin tunnistettujen ehdokkaiden validoinnin.

Tutkimuksen arvioitu kesto on 72 kuukautta, mukaan lukien (i) 66 kuukautta potilaiden inkluusioille, koagulaatiotesteille ja monosyyttien/megakaryosyyttien eristämiselle ja (ii) 6 kuukautta fibrinolyysitesteille, RNA:n erottamiselle ja sekvensoinnille, data-analyysille ja validoinnille.

Tutkijat uskovat, että tutkimuksella on tärkeitä vaikutuksia DM1-potilaiden kliiniseen hoitoon. Laskimotromboembolian ehkäisyyn ehdotetaan erityisiä strategioita, joilla on mahdollisesti suurempi indikaatio profylaktiseen antikoagulanttihoitoon ja pidempi kesto ensimmäisen laskimotromboembolian jälkeen.

Mitä tulee laskimotromboemboliaan liittyvään korkeaan kuolleisuuteen ja keuhkoembolian tunnistamiseen rekisterissä yleiseksi kuolinsyyksi, äkillisiksi ja ei-äkillisiksi DM1-potilailla, näiden hoitostrategioiden muuttamiseen voi liittyä tärkeä kliininen hyöty. hemostaasipoikkeavuuksien määrittäminen hyytymis- ja fibrinolyysitesteillä voisi olla hyödyllinen riskin jakautumisessa potilailla, joilla on DM1, ja mahdollistaa kohdennettuja hoitoja.