Tromboembolismo Venoso na Distrofia Miotônica Tipo 1 (DM1-VTE)

Investigadores identificaram na coorte de 1.084 pacientes com distrofia miotônica tipo 1 (DM1) uma prevalência de 10% de tromboembolismo venoso (TEV) e uma incidência anual de 7‰, que é 10 vezes maior do que na população geral e 3 vezes comparada a pacientes com outras miopatias.

As apresentações clínicas dos pacientes foram muito semelhantes às observadas em pacientes com estados graves de hipercoagulabilidade causados ​​por mutações em genes que codificam fatores envolvidos na coagulação, fibrinólise ou sua regulação e representaram uma causa frequente de morte.

Para o conhecimento do investigador, esta associação entre VTE e DM1 nunca foi relatada até o momento e nenhum projeto concorrente foi iniciado neste tópico por qualquer outra equipe.

Os investigadores levantam a hipótese de que o TEV no DM1 pode estar relacionado a um estado de hipercoagulabilidade resultante de um desequilíbrio entre os processos de coagulação e as propriedades da fibrinólise. Como a expressão de repetições CTG patogênicas em DM1 leva a um mecanismo de ganho de função de RNA, os investigadores propõem que essas anormalidades podem ser consequência de má regulação do splicing alternativo e/ou expressão anormal de genes de coagulação, fatores de fibrinólise ou outros fatores envolvidos em sua regulação .

Os investigadores aplicaram uma estratégia de gene candidato para rastrear perfis de splicing de 33 genes que codificam fatores de hemostasia em um contexto de DM1. Usando conjuntos de dados de expressão em larga escala de amostras de tecido DM1 do músculo esquelético e do coração, os investigadores identificaram defeitos de splicing em 4 genes envolvidos na hemostasia, em particular 3 envolvidos no sistema fibrinolítico: PLAT, PLAU e SERPINE1. No entanto, essas análises preliminares não foram realizadas em amostras de fígado, enquanto os genes que codificam os fatores de hemostasia são sintetizados e expressos principalmente no fígado. A análise de amostras de RNA de fígado e monócitos/megacariotos parece ser uma etapa essencial.

Os objetivos são (i) estudar as propriedades hemostáticas de uma coorte de pacientes com DM1 com e sem história pessoal de TEV, a fim de determinar se um estado de hipercoagulabilidade pode estar associado ao DM1 e se pode estar correlacionado com a ocorrência de TEV, e (ii) realizar uma abordagem transcriptômica global usando sequenciamento paralelo massivo (RNAseq) em fígado e monócitos/megacariotos. Amostras de RNA obtidas de pacientes com DM1 ajudarão a identificar genes candidatos com expressão alterada ou má regulação de splicing alternativo que pode estar por trás de TEV em DM1.

O estudo incluirá duas partes complementares em pacientes DM1 com e sem histórico pessoal de TEV e voluntários saudáveis: testes de hemostasia e análise transcriptômica em amostras de RNA isoladas de biópsias hepáticas e amostras de monócitos/megacariócitos sanguíneos. Três equipes estarão envolvidas no estudo: Equipe 1 (estudo clínico), Equipe 2 (hematologia) e Equipe 3 (análise transcriptômica).

Os testes de hemostasia serão realizados pela Equipe 1 e analisados ​​pela Equipe 2 em (i) 100 pacientes matriculados prospectivamente na Instituição do Investigador pela Equipe 1, com idade > 18 anos, com DM1 geneticamente comprovado, após fornecer consentimento informado por escrito, sem qualquer tratamento antitrombótico atual, incluindo 80 sem e 20 com história pessoal de TEV e (ii) 30 voluntários saudáveis ​​pareados em idade e sexo. O RNAseq será realizado em (i) tecido hepático de 3 pacientes com DM1 e 6 controles e (ii) monócitos/megacariócitos isolados do sangue de 15 pacientes com DM1 (7 com e 8 sem TEV) e 15 controles prospectivamente inscritos no estudar. Os critérios de inclusão e exclusão serão semelhantes aos dos pacientes incluídos no estudo das propriedades de hemostasia.

Os tecidos do fígado já estão disponíveis em um banco de tecidos. O sangue será coletado prospectivamente em pacientes com DM1 e controles pela Equipe 1. Monócitos e megacariócitos serão isolados e cultivados pela Equipe 2.

A equipe 3 extrairá RNA total de amostras de fígado, monócitos e megacariócitos para o Centre National de Génotypage para sequenciamento de RNA e realizará a análise dos dados e a validação dos novos candidatos identificados.

A duração estimada do estudo é de 72 meses, incluindo (i) 66 meses para inclusão de pacientes, testes de coagulação e isolamentos de monócitos/megacariócitos e (ii) 6 meses para testes de fibrinólise, extração e sequenciamento de RNA, análise de dados, validação.

Os investigadores acreditam que o estudo terá implicações importantes para o manejo clínico de pacientes com DM1. Estratégias específicas serão propostas para a prevenção de TEV com indicações potencialmente maiores para tratamentos anticoagulantes profiláticos e maior duração após um primeiro episódio de TEV.

Em relação à alta mortalidade associada ao TEV e à identificação no registro da embolia pulmonar como causa frequente de morte, súbita e não súbita, em pacientes com DM1, a modificação dessas estratégias de tratamento pode estar associada a um importante benefício clínico. A identificação de anormalidades da hemostasia por testes de coagulação e fibrinólise podem ser úteis para a estratificação de risco em pacientes com DM1 e podem permitir tratamentos direcionados.