Tromboembolia venosa nella distrofia miotonica di tipo 1 (DM1-VTE)

I ricercatori hanno identificato nella coorte di 1084 pazienti affetti da distrofia miotonica di tipo 1 (DM1) una prevalenza del 10% di tromboembolia venosa (TEV) e un'incidenza annuale del 7‰, che è 10 volte superiore rispetto alla popolazione generale e 3 volte rispetto a pazienti con altre miopatie.

Le presentazioni cliniche dei pazienti erano molto simili a quelle osservate nei pazienti con gravi stati di ipercoagulabilità causati da mutazioni nei geni che codificano fattori coinvolti nella coagulazione, nella fibrinolisi o nella loro regolazione e rappresentavano una frequente causa di morte.

A conoscenza dello sperimentatore, questa associazione tra VTE e DM1 non è mai stata segnalata fino ad oggi e nessun progetto concorrente è stato avviato su questo argomento da nessun altro team.

I ricercatori ipotizzano che il TEV nel DM1 possa essere correlato a uno stato di ipercoagulabilità derivante da uno squilibrio tra i processi di coagulazione e le proprietà della fibrinolisi. Poiché l'espressione delle ripetizioni CTG patogene nel DM1 porta a un meccanismo di guadagno di funzione dell'RNA, i ricercatori propongono che queste anomalie possano essere la conseguenza di un'errata regolazione dello splicing alternativo e/o di un'espressione genica anomala della coagulazione, fattori di fibrinolisi o altri fattori coinvolti nella loro regolazione .

I ricercatori hanno applicato una strategia genica candidata per vagliare i profili di splicing di 33 geni che codificano per fattori di emostasi in un contesto DM1. Utilizzando set di dati di espressione su larga scala di campioni di tessuto DM1 da muscolo scheletrico e cuore, i ricercatori hanno identificato difetti di splicing in 4 geni coinvolti nell'emostasi, in particolare 3 coinvolti nel sistema fibrinolitico: PLAT, PLAU e SERPINE1. Queste analisi preliminari non sono state tuttavia eseguite su campioni di fegato mentre i geni che codificano per i fattori dell'emostasi sono sintetizzati ed espressi principalmente nel fegato. L'analisi dei campioni di RNA di fegato e monociti/megacarioti sembra essere un passaggio essenziale.

Gli obiettivi sono (i) studiare le proprietà emostatiche di una coorte di pazienti con DM1 con e senza anamnesi personale di TEV, al fine di determinare se uno stato di ipercoagulabilità possa essere associato a DM1 e se possa essere correlato all'insorgenza di TEV, e (ii) eseguire un approccio trascrittomico globale utilizzando il sequenziamento massivo parallelo (RNAseq) su fegato e monociti/megacarioti. I campioni di RNA ottenuti dai pazienti DM1 aiuteranno a identificare i geni candidati con espressione alterata o errata regolazione di splicing alternativo che potrebbero essere alla base del TEV nel DM1.

Lo studio comprenderà due parti complementari in pazienti DM1 con e senza storia personale di TEV e volontari sani: test di emostasi e analisi trascrittomica su campioni di RNA isolati da biopsie epatiche e campioni di monociti/megacariociti del sangue. Saranno coinvolte tre squadre nello studio: Team 1 (studio clinico), Team 2 (ematologia) e Team 3 (analisi trascrittomica).

I test di emostasi saranno eseguiti dal Team 1 e analizzati dal Team 2 in (i) 100 pazienti arruolati prospetticamente presso l'Istituzione dello sperimentatore dal Team 1, di età >18 anni, con DM1 geneticamente provato, dopo aver fornito il consenso informato scritto, senza alcun trattamento antitrombotico in corso, inclusi 80 senza e 20 con storia personale di TEV e (ii) 30 volontari sani appaiati per età e sesso. RNAseq sarà eseguito su (i) tessuto epatico emesso da 3 pazienti con DM1 e 6 controlli e (ii) monociti/megacariociti isolati dal sangue di 15 pazienti con DM1 (7 con e 8 senza TEV) e 15 controlli arruolati prospetticamente nel studio. I criteri di inclusione ed esclusione saranno simili a quelli dei pazienti inclusi nello studio delle proprietà dell'emostasi.

I tessuti del fegato sono già disponibili in una banca dei tessuti. Il sangue sarà raccolto prospetticamente nei pazienti DM1 e nei controlli dal Team 1. Monociti e megacariociti saranno isolati e coltivati ​​dal Team 2.

Il Team 3 estrarrà l'RNA totale da campioni di fegato, monociti e megacariociti al Centre National de Génotypage per il sequenziamento dell'RNA ed eseguirà l'analisi dei dati e la validazione dei nuovi candidati identificati.

La durata stimata dello studio è di 72 mesi, inclusi (i) 66 mesi per l'inclusione dei pazienti, i test di coagulazione e l'isolamento dei monociti/megacariociti e (ii) 6 mesi per i test di fibrinolisi, l'estrazione e il sequenziamento dell'RNA, l'analisi dei dati e la convalida.

I ricercatori ritengono che lo studio avrà importanti implicazioni per la gestione clinica dei pazienti con DM1. Saranno proposte strategie specifiche per la prevenzione del TEV con indicazioni potenzialmente più ampie per trattamenti anticoagulanti profilattici e durata maggiore dopo un primo episodio di TEV.

Per quanto riguarda l'elevata mortalità associata a TEV e l'identificazione nel registro dell'embolia polmonare come frequente causa di morte, improvvisa e non, nei pazienti con DM1, la modifica di queste strategie terapeutiche può essere associata a un importante beneficio clinico. L'identificazione delle anomalie dell'emostasi mediante test di coagulazione e fibrinolisi potrebbe essere utile per la stratificazione del rischio nei pazienti con DM1 e potrebbe consentire trattamenti mirati.