Venöse Thromboembolie bei Myotoner Dystrophie Typ 1 (DM1-VTE)

Forscher haben in der Kohorte von 1084 Patienten mit Myotoner Dystrophie Typ 1 (DM1) eine Prävalenz von 10 % für venöse Thromboembolien (VTE) und eine jährliche Inzidenz von 7 % festgestellt, was 10-mal höher ist als in der Allgemeinbevölkerung und 3-mal höher als in der Allgemeinbevölkerung für Patienten mit anderen Myopathien.

Die klinischen Präsentationen der Patienten waren denen sehr ähnlich, die bei Patienten mit schweren hyperkoagulierbaren Zuständen beobachtet wurden, die durch Mutationen in Genen verursacht wurden, die Faktoren codieren, die an der Gerinnung, Fibrinolyse oder deren Regulation beteiligt sind, und eine häufige Todesursache darstellten.

Nach Kenntnis des Ermittlers wurde diese Assoziation zwischen VTE und DM1 bisher nie gemeldet und es wurde kein konkurrierendes Projekt zu diesem Thema von einem anderen Team initiiert.

Forscher nehmen an, dass VTE bei DM1 mit einem hyperkoagulierbaren Zustand zusammenhängen könnte, der aus einem Ungleichgewicht zwischen Gerinnungsprozessen und Fibrinolyseeigenschaften resultiert. Da die Expression pathogener CTG-Wiederholungen in DM1 zu einem RNA-Gain-of-Function-Mechanismus führt, schlagen die Forscher vor, dass diese Anomalien die Folge einer Fehlregulation beim alternativen Spleißen und/oder einer abnormalen Genexpression von Gerinnungs-, Fibrinolysefaktoren oder anderen an ihrer Regulation beteiligten Faktoren sein könnten .

Die Forscher wendeten eine Kandidatengenstrategie an, um Splicing-Profile von 33 Genen zu screenen, die für Hämostasefaktoren in einem DM1-Kontext kodieren. Unter Verwendung von groß angelegten Expressionsdatensätzen von DM1-Gewebeproben aus Skelettmuskel und Herz identifizierten die Forscher Spleißdefekte in 4 Genen, die an der Hämostase beteiligt sind, insbesondere 3, die am fibrinolytischen System beteiligt sind: PLAT, PLAU und SERPINE1. Diese vorläufigen Analysen wurden jedoch nicht an Leberproben durchgeführt, da Gene, die für Hämostasefaktoren kodieren, synthetisiert und hauptsächlich in der Leber exprimiert werden. Die Analyse von Leber- und Monozyten/Megakaryoten-RNA-Proben scheint ein wesentlicher Schritt zu sein.

Die Ziele sind (i) die Untersuchung der hämostatischen Eigenschaften einer Kohorte von Patienten mit DM1 mit und ohne VTE in der persönlichen Vorgeschichte, um festzustellen, ob ein hyperkoagulabler Zustand mit DM1 assoziiert sein kann und ob er mit dem Auftreten von VTE korrelieren kann, und (ii) die Durchführung eines globalen Transkriptomik-Ansatzes unter Verwendung von Massive Parallel Sequencing (RNAseq) an Leber und Monozyten/Megakaryoten. Von DM1-Patienten erhaltene RNA-Proben helfen bei der Identifizierung von Kandidatengenen mit veränderter Expression oder alternativer Fehlregulation beim Spleißen, die VTE bei DM1 zugrunde liegen könnten.

Die Studie umfasst zwei komplementäre Teile bei DM1-Patienten mit und ohne VTE in der Vorgeschichte und bei gesunden Freiwilligen: Hämostasetests und Transkriptomanalyse an RNA-Proben, die aus Leberbiopsien und Blutmonozyten/Megakaryozytenproben isoliert wurden. Drei Teams werden an der Studie beteiligt sein: Team 1 (klinische Studie), Team 2 (Hämatologie) und Team 3 (transkriptomische Analyse).

Hämostasetests werden von Team 1 durchgeführt und von Team 2 analysiert bei (i) 100 Patienten, die prospektiv von Team 1 in die Institution des Prüfers aufgenommen werden, im Alter von > 18 Jahren, mit genetisch nachgewiesenem DM1, nach schriftlicher Einverständniserklärung, ohne aktuelle antithrombotische Behandlung, einschließlich 80 ohne und 20 mit persönlicher Vorgeschichte von VTE und (ii) 30 gesunde Freiwillige, die nach Alter und Geschlecht zusammenpassten. RNAseq wird an (i) Lebergewebe von 3 Patienten mit DM1 und 6 Kontrollen und (ii) Monozyten/Megakaryozyten, die aus dem Blut von 15 Patienten mit DM1 (7 mit und 8 ohne VTE) und 15 Kontrollen, die prospektiv in das aufgenommen werden, isoliert wurden, durchgeführt lernen. Die Einschluss- und Ausschlusskriterien werden denen der Patienten ähneln, die in die Studie der Hämostaseeigenschaften eingeschlossen wurden.

Lebergewebe sind bereits in einer Gewebebank verfügbar. Blut wird prospektiv von Team 1 bei DM1-Patienten und Kontrollen gesammelt. Monozyten und Megakaryozyten werden von Team 2 isoliert und kultiviert.

Team 3 wird Gesamt-RNA aus Leberproben, Monozyten und Megakaryozyten zum Centre National de Génotypage für die RNA-Sequenzierung extrahieren und die Analyse der Daten und die Validierung der neu identifizierten Kandidaten durchführen.

Die geschätzte Studiendauer beträgt 72 Monate, einschließlich (i) 66 Monate für Patienteneinschlüsse, Gerinnungstests und Isolierung von Monozyten/Megakaryozyten und (ii) 6 Monate für Fibrinolysetests, RNA-Extraktion und -Sequenzierung, Datenanalyse, Validierung.

Die Forscher glauben, dass die Studie wichtige Auswirkungen auf das klinische Management von Patienten mit DM1 haben wird. Es werden spezifische Strategien zur Vorbeugung von VTE mit potenziell größeren Indikationen für prophylaktische Antikoagulanzienbehandlungen und einer längeren Dauer nach einer ersten VTE-Episode vorgeschlagen.

In Anbetracht der hohen Mortalität im Zusammenhang mit VTE und der Identifizierung von Lungenembolien als häufige Todesursache, plötzlich und nicht plötzlich, bei DM1-Patienten im Register kann die Änderung dieser Behandlungsstrategien mit einem wichtigen klinischen Nutzen verbunden sein. Die Identifizierung von Anomalien der Hämostase durch Gerinnungs- und Fibrinolysetests könnte für die Risikostratifizierung bei Patienten mit DM1 nützlich sein und gezielte Behandlungen ermöglichen.