Żylna choroba zakrzepowo-zatorowa w dystrofii miotonicznej typu 1 (DM1-VTE)

Badacze zidentyfikowali w kohorcie 1084 pacjentów z dystrofią miotoniczną typu 1 (DM1) 10% częstość występowania żylnej choroby zakrzepowo-zatorowej (ŻChZZ) i 7‰ roczną zapadalność, czyli 10-krotnie wyższą niż w populacji ogólnej i 3-krotnie w porównaniu u pacjentów z innymi miopatiami.

Obraz kliniczny pacjentów był bardzo podobny do obserwowanego u pacjentów z ciężkimi stanami nadkrzepliwości spowodowanymi mutacjami w genach kodujących czynniki biorące udział w krzepnięciu, fibrynolizie lub ich regulacji i stanowił częstą przyczynę zgonu.

Zgodnie z wiedzą Badacza, ten związek między VTE i DM1 nigdy nie został zgłoszony do tej pory i żaden inny zespół nie zainicjował konkurencyjnego projektu na ten temat.

Badacze wysuwają hipotezę, że ŻChZZ w DM1 może być związana ze stanem nadkrzepliwości wynikającym z braku równowagi między procesami krzepnięcia a właściwościami fibrynolizy. Ponieważ ekspresja patogennych powtórzeń CTG w DM1 prowadzi do mechanizmu wzmocnienia funkcji RNA, badacze sugerują, że te nieprawidłowości mogą być konsekwencją błędnej regulacji alternatywnego splicingu i/lub nieprawidłowej ekspresji genów krzepnięcia, czynników fibrynolizy lub innych czynników zaangażowanych w ich regulację .

Badacze zastosowali kandydującą strategię genetyczną do przeszukania profili składania 33 genów kodujących czynniki hemostazy w kontekście DM1. Korzystając z wielkoskalowych zbiorów danych dotyczących ekspresji próbek tkanki DM1 z mięśni szkieletowych i serca, badacze zidentyfikowali defekty splicingu w 4 genach zaangażowanych w hemostazę, w szczególności 3 zaangażowanych w układ fibrynolityczny: PLAT, PLAU i SERPINE1. Te wstępne analizy nie zostały jednak przeprowadzone na próbkach wątroby, podczas gdy geny kodujące czynniki hemostazy są syntetyzowane i ulegają głównie ekspresji w wątrobie. Analiza próbek RNA wątroby i monocytów/megakariontów wydaje się być niezbędnym krokiem.

Celem jest (i) zbadanie właściwości hemostatycznych kohorty pacjentów z DM1 z i bez ŻChZZ w wywiadzie, w celu ustalenia, czy stan nadkrzepliwości może być związany z DM1 i czy może być skorelowany z występowaniem ŻChZZ, oraz (ii) przeprowadzenie globalnego podejścia transkryptomicznego przy użyciu masowego sekwencjonowania równoległego (RNAseq) w wątrobie i monocytach/megakariontach. Próbki RNA uzyskane od pacjentów z DM1 pomogą zidentyfikować geny kandydujące ze zmienioną ekspresją lub błędną regulacją alternatywnego splicingu, które mogą leżeć u podstaw ŻChZZ w DM1.

Badanie obejmie dwie uzupełniające się części u pacjentów z DM1 z i bez ŻChZZ w wywiadzie oraz zdrowych ochotników: testy hemostazy i analiza transkryptomiczna próbek RNA wyizolowanych z biopsji wątroby i próbek monocytów/megakariocytów krwi. W badaniu wezmą udział trzy zespoły: Zespół 1 (badanie kliniczne), Zespół 2 (hematologia) i Zespół 3 (analiza transkryptomiczna).

Badania hemostazy będą wykonywane przez Zespół 1 i analizowane przez Zespół 2 u (i) 100 pacjentów włączonych prospektywnie do Ośrodka Badacza przez Zespół 1, w wieku >18 lat, z genetycznie potwierdzoną DM1, po wyrażeniu pisemnej świadomej zgody, bez aktualnie stosowanego leczenia przeciwzakrzepowego, w tym 80 bez i 20 z osobistą historią ŻChZZ oraz (ii) 30 zdrowych ochotników dobranych pod względem wieku i płci. RNAseq zostanie przeprowadzony na (i) tkance wątroby pobranej od 3 pacjentów z DM1 i 6 kontroli oraz (ii) monocytach/megakariocytach wyizolowanych z krwi 15 pacjentów z DM1 (7 z i 8 bez ŻChZZ) i 15 kontroli włączonych prospektywnie do badania badanie. Kryteria włączenia i wyłączenia będą podobne do kryteriów pacjentów włączonych do badania właściwości hemostazy.

Tkanki wątroby są już dostępne w banku tkanek. Krew będzie prospektywnie pobierana od pacjentów z DM1 i kontroli przez Zespół 1. Monocyty i megakariocyty będą izolowane i hodowane przez Zespół 2.

Zespół 3 pobierze całkowity RNA z próbek wątroby, monocytów i megakariocytów do Centre National de Génotypage w celu sekwencjonowania RNA i przeprowadzi analizę danych oraz walidację nowo zidentyfikowanych kandydatów.

Szacowany czas trwania badania wynosi 72 miesiące, w tym (i) 66 miesięcy na włączenie pacjentów, testy krzepnięcia i izolacje monocytów/megakariocytów oraz (ii) 6 miesięcy na testy fibrynolizy, ekstrakcję i sekwencjonowanie RNA, analizę danych, walidację.

Badacze są przekonani, że badanie będzie miało istotne implikacje dla postępowania klinicznego z pacjentami z DM1. Zaproponowane zostaną konkretne strategie zapobiegania ŻChZZ z potencjalnie większymi wskazaniami do profilaktycznego leczenia przeciwzakrzepowego i dłuższym czasem trwania po pierwszym epizodzie ŻChZZ.

Ze względu na dużą śmiertelność związaną z ŻChZZ oraz identyfikację w rejestrze zatorowości płucnej jako częstej przyczyny zgonu nagłego i nienagłego u chorych na DM1 modyfikacja tych strategii leczenia może wiązać się z istotną korzyścią kliniczną. nieprawidłowości hemostazy za pomocą testów krzepnięcia i fibrynolizy może być przydatna do stratyfikacji ryzyka u pacjentów z DM1 i może pozwolić na ukierunkowane leczenie.