Développement de formulations topiques à base de plantes pour le traitement de la leishmaniose cutanée

PROTOCOLE D'ÉTUDE

1.1. Introduction La leishmaniose est un problème de santé majeur négligé fréquemment rencontré dans les régions tropicales et subtropicales avec un taux de prévalence de 1,5 million par an dans le monde. La maladie est causée par un parasite protozoaire du genre Leishmania. La transmission s'est produite par les phlébotomes du genre Phlebotomus dans (l'Ancien Monde) et Lutzomyia (Nouveau Monde). La leishmaniose cutanée est limitée à la peau et à environ 185 millions de personnes à risque dans 61 pays. Maintenant, il est endémique au Pakistan (différentes régions) et se diffuse rapidement, en particulier dans les camps de réfugiés. Le principal agent causal trouvé est L. major suivi de L. tropica. Une revue de la littérature vigilante a révélé qu'en plus des quatre provinces du Pakistan, des incidences accrues de CL ont été trouvées au Balouchistan, qui est la plus grande province (en superficie) suivie par la NWFP. Dans la province du Sindh (Dadu, Jacobabad, Larkana et Karachi) sont couramment signalés des cas tandis qu'au Pendjab (Multan et Dera Ghazi Khan) sont principalement signalés pour la survenue de la maladie. Le diagnostic de ces maladies est fait par le tableau clinique, généralement les lésions sèches sont causées par L. tropica tandis que les lésions ulcéreuses humides et précoces sont causées par L. major, ces lésions prennent des mois à des années pour guérir et finissent par guérir par leurs propres lésions mais satellites et bactériennes et fongiques. les infections entraînent un processus de guérison retardé et compliqué, mais dans les zones non endémiques, il est difficile de diagnostiquer en raison d'une forme peu claire, ainsi que de ces infections secondaires, retarder le traitement ainsi que les mauvais traitements peuvent parfois également entraîner des changements dans le tableau clinique. Dans de telles situations, l'examen du frottis de la lésion est l'outil de diagnostic avec la culture et les examens histopathologiques.

1.2. Des essais cliniques contre CL L'extrait méthanolique d'écorce de Casuarina equisetifolia L. a montré un bon potentiel antileishmanial contre L.major en utilisant une analyse in vitro qui nous a orientés vers un concept thérapeutique innovant pour le développement de nouvelles formulations à base de plantes contre la leishmaniose grâce à des fermetures accélérées de plaies dans des essais cliniques sur des concurrents humains . La CL ulcéreuse est due à une cicatrisation défectueuse de la plaie selon cette hypothèse, une étude actuelle est prévue pour explorer l'efficacité clinique du nouveau protocole Gyburene 5% crème comme agent antiparasitaire suivi de la pommade Thuscare 5% pour accélérer la fermeture des plaies. L'objectif principal de cette étude est d'évaluer le résultat anti-leishmaniale de la crème Gyburene 5 % à la fermeture de la plaie et après six mois, tandis que l'objectif secondaire est d'évaluer que le soin incessant des plaies associé à un agent antiparasitaire peut entraîner une amélioration précieuse du traitement.

1.3. Population de l'échantillon et conception de l'étude : Il s'agit d'une étude randomisée en simple aveugle. Soixante-dix patients atteints de leishmaniose cutanée confirmée ont été recrutés dans l'étude. Les participants ont été répartis au hasard en deux groupes. Groupe pilote (n'ayant reçu aucun médicament auparavant) et groupe résistant (ayant déjà reçu des médicaments parentaux ou topiques). Au cours des essais, 20 participants ont été abandonnés en raison du manque de suivi, en particulier les personnes touchées venant des zones rurales.

1.3.1. Considération éthique : Le protocole de recherche a été approuvé par le comité d'éthique du Conseil des études avancées et de la recherche de l'Université de Karachi Vide Resol n° 16. Des formulaires de consentement éclairé ont été prélevés auprès de chaque patient.

1.3.2. Évaluation des patients:

Les antécédents médicaux de chaque patient (âge, sexe, comorbidités, état de la plaie, site et taille de la lésion avec rapport de test de frottis Giemsa) ont été pris avant le protocole de traitement sur Performa clinique spécialement conçu pour cette étude et se composait de deux parties, d'abord pour informations personnelles et deuxième pour les antécédents médicaux. La taille de la lésion a été calculée à l'aide d'un pied à coulisse en deux dimensions et chaque participant a conseillé un suivi hebdomadaire jusqu'à la fin de la thérapie, des portraits photographiques ont été pris avant, pendant et après la thérapie à l'aide d'un appareil photo numérique pour évaluer le pourcentage de guérison. Le suivi des patients guéris a été effectué pendant six mois supplémentaires pour s'assurer qu'aucun revers ne s'est produit. La présence ou l'absence de parasite a été confirmée par un test de frottis tandis que la zone cicatrisée a été calculée en pourcentage de cicatrisation selon la formule suivante (Baie et Sheikh, 2000) :

1.3.2.1. Critère d'intégration

1. Patients répondant aux critères histologiques de présence de parasite
2. Âge de plus de 4 ans et les deux sexes.
3. Les lésions sont au nombre de moins de 5 chez chaque patient
4. La taille de la lésion est inférieure à 5 cm2
5. Les participants qui avaient arrêté le traitement plus de 4 semaines auparavant et dont les lésions ne s'amélioraient pas.
6. La durée de la maladie pour les patients sous essai était de six mois (aiguë) et de plus d'un an (chronique).

1.3.2.2. Critère d'exclusion

1. Patients ayant pris des médicaments immunosuppresseurs ou des médicaments anti-leishmaniens au cours du mois dernier.
2. Femmes enceintes et mères allaitantes.
3. Concurrents souffrant de complications de maladies rénales, hépatiques et pulmonaires, patients immunodéprimés tels que (VIH).
4. Les patients souffrant de maladies telles que le paludisme, la tuberculose et le traitement sont en cours pour de telles infections.

1.3.3. Traitement de l'étude Avant le début du protocole de traitement, une évaluation toxicologique des extraits de plantes a également été effectuée pour garantir la sécurité des préparations pharmaceutiques topiques à base de plantes. En cas de plus d'une lésion, l'une des cibles pour les biopsies bien que toutes aient reçu le même traitement. Les deux groupes de patients ont été traités avec des formulations topiques à base de plantes Gyburene 5 % de crème (pour le traitement de CL) le matin et le soir et la pommade Thuscare 5 % (pour une cicatrisation rapide des plaies et le traitement des surinfections) uniquement la nuit dans deux directions différentes à l'angle de 90º entre eux en laissant la lésion découverte.

Avant l'application de la deuxième formulation, il a été conseillé à tous les concurrents de laver la lésion avec une solution saline normale. Un suivi hebdomadaire a été effectué jusqu'à la fin de la thérapie afin d'assurer la guérison complète, comme pour les amastigotes au test cutané à frottis négatif dans la souche Giemsa et la guérison complète avec réépithélialisation de la lésion. Chaque formulation a été distribuée dans un récipient de 10 g (séparément) suffisamment pour une semaine.

1.4. Analyse statistique Test T utilisé pour comparer le taux de guérison entre deux groupes tandis que le test de Kaplan Meier entre le groupe pilote et le groupe résistant tandis que le test de Kaplan Meier est utilisé pour calculer la surface guérie par semaine pour le groupe résistant et le groupe pilote à P <0,05 en utilisant SPSS version 21.

Évaluation clinique Performa pour la leishmaniose cutanée (CL) Informations personnelles Code patient : ------------------- Masculin/féminin : ------------- --------- Âge : ---------- Adresse : --------------- Profession : ---------- --------- État civil: -------------

N° de contact : -------------------------- N° CNIC : ------------------ ------Histoire de famille:

Informations cliniques Morphologie de la lésion

• Ulcéré
• Croûte
• Plaque
• État de la lésion nodulaire
• Sec
• Test de frottis de Giemsa humide
• Positif
• Négatif Durée des lésions
• ≥ 6 mois
• Entre 6 et 12 mois
• ≤ 6 mois Nombre de lésions
• 1
• 2
• 3
• 4
• 5

État de santé

• Arthrite
• Allergie
• Diabète
• Trouble immunitaire
• Diagnostic différentiel de la LC
• Infection cutanée bactérienne et fongique
• Eczéma
• Syphilis
• Sarcoïdose
• Blastomycose
• Autres Zone de la lésion/visite Visite I : Superficie=……………cm2 Visite II : Superficie=…………..cm2 Visite III : Superficie=…………. cm2 Visite IV : Superficie=………… cm2 Visite V : Superficie=…………. cm2

Remarques du dermatologue :

Signature du dermatologue