Opracowanie preparatów ziołowych do stosowania miejscowego w leczeniu leiszmaniozy skórnej

PROTOKÓŁ BADANIA

1.1. Wstęp Leiszmanioza jest poważnym, lekceważonym problemem zdrowotnym, często występującym w regionach tropikalnych i subtropikalnych, a wskaźnik chorobowości na całym świecie wynosi 1,5 miliona rocznie. Chorobę wywołuje pierwotniak pasożytniczy z rodzaju Leishmania. Przenoszenie nastąpiło przez muchę piaskową z rodzaju Phlebotomus w (Starym Świecie) i Lutzomyia (Nowy Świat). Leiszmanioza skórna jest ograniczona do skóry i około 185 milionów ludzi zagrożonych w 61 krajach. Obecnie występuje endemicznie w Pakistanie (różne regiony) i szybko się rozprzestrzenia, szczególnie w obozach dla uchodźców, głównym znalezionym czynnikiem sprawczym jest L. major, a następnie L. tropica. Czujny przegląd literatury ujawnił, że poza czterema prowincjami Pakistanu, wzrost częstości występowania CL stwierdzono w Beludżystanie, która jest największą prowincją (pod względem obszaru), a następnie NWFP. W prowincji Sindh (Dadu, Jacobabad, Larkana i Karaczi) często zgłasza się przypadki, podczas gdy w Pendżabie (Multan i Dera Ghazi Khan) zgłasza się głównie występowanie choroby. Rozpoznanie tej choroby przeprowadza się na podstawie obrazu klinicznego, zwykle suche zmiany są spowodowane przez L. tropica, podczas gdy wilgotne i wczesne zmiany wrzodziejące są spowodowane przez L. major, takie zmiany goją się miesiącami lub latami, ostatecznie goją się własnymi, ale satelitarnymi zmianami oraz bakteryjnymi i grzybiczymi Infekcja skutkuje opóźnionym i skomplikowanym procesem gojenia, ale na terenach nieendemicznych jest trudna do zdiagnozowania ze względu na niejasną postać, a wraz z wtórnymi infekcjami, opóźnieniem leczenia, a także czasem złym traktowaniem może powodować zmiany w obrazie klinicznym. W takich sytuacjach narzędziem diagnostycznym jest badanie wymazu ze zmiany wraz z posiewem i badaniem histopatologicznym.

1.2. Badania kliniczne przeciwko CL Metanolowy ekstrakt z kory Casuarina equisetifolia L. wykazał dobry potencjał przeciw leiszmanii przeciwko L. major przy użyciu analizy in vitro, która skierowała nas w kierunku innowacyjnej koncepcji terapeutycznej w celu opracowania nowych preparatów ziołowych przeciwko leiszmaniozie poprzez przyspieszone zamykanie ran w badaniach klinicznych na ludziach . Wrzodziejące CL jest spowodowane wadliwym gojeniem się ran, w zależności od tej hipotezy. Obecne badanie ma na celu zbadanie skuteczności klinicznej nowego protokołu Gyburene 5% kremu jako środka przeciwpasożytniczego, a następnie 5% maści Thucare w celu przyspieszenia gojenia ran. Głównym celem tego badania jest ocena działania przeciw leiszmaniologicznego kremu Gyburene 5% przy zamykaniu rany i po sześciu miesiącach, podczas gdy celem drugorzędnym jest ocena, czy nieustanna pielęgnacja rany wraz ze środkiem przeciwpasożytniczym może skutkować cenną poprawą leczenia.

1.3. Populacja próby i projekt badania: Jest to randomizowane badanie z pojedynczą ślepą próbą. Do badania włączono 70 pacjentów z potwierdzoną skórną leiszmaniozą. Uczestnicy zostali losowo przydzieleni do dwóch grup. Grupa pilotażowa (nie otrzymywała wcześniej żadnych leków) i grupa oporna (która już otrzymywała leki pozajelitowe lub miejscowe). Podczas prób 20 uczestników zostało wycofanych z powodu braku działań następczych, w szczególności dotkniętych nimi osób pochodzących z obszarów wiejskich.

1.3.1. Względy etyczne: Protokół badania został zatwierdzony przez komisję etyczną Rady Zaawansowanych Studiów i Badań Uniwersytetu Karaczi Vide Resol nr 16. Od każdego pacjenta pobrano formularze świadomej zgody.

1.3.2. Ocena stanu pacjenta:

Wywiad medyczny każdego pacjenta (wiek, płeć, choroby współistniejące, stan rany, miejsce i rozmiar zmiany wraz z raportem z wymazu Giemsy) został zebrany przed protokołem leczenia na specjalnie zaprojektowanej do tego badania klinice Performa i składał się z dwóch części, pierwszej dla informacje dotyczące personelu, a drugie dotyczące historii medycznej. Wielkość zmiany została obliczona za pomocą suwmiarki noniuszowej w dwóch wymiarach, a każdemu uczestnikowi zalecono cotygodniową kontrolę do końca terapii, wykonano zdjęcie portretowe przed, w trakcie i po terapii za pomocą aparatu cyfrowego w celu oceny procentowego wyleczenia. Obserwacja wyleczonych pacjentów była prowadzona przez kolejne sześć miesięcy, aby upewnić się, że nie nastąpiło żadne niepowodzenie. Obecność lub nieobecność pasożyta potwierdzono testem wymazowym, podczas gdy zagojony obszar obliczono jako procent zagojenia według następującego wzoru (Baie i Sheikh, 2000):

1.3.2.1. Kryteria przyjęcia

1. Pacjenci, którzy spełnili kryteria histologiczne obecności pasożyta
2. Wiek powyżej 4 lat i obojga płci.
3. Liczba zmian u każdego pacjenta jest mniejsza niż 5
4. Wielkość zmiany jest mniejsza niż 5 cm2
5. Uczestnicy, którzy przerwali terapię ponad 4 tygodnie wcześniej i zmiany nie ulegały poprawie.
6. Czas trwania choroby u pacjentów objętych badaniem wynosił sześć miesięcy (ostra) i ponad rok (przewlekła).

1.3.2.2. Kryteria wyłączenia

1. Pacjenci, którzy w ciągu ostatniego miesiąca przyjmowali leki immunosupresyjne lub przeciw leiszmanialne.
2. Kobiety w ciąży i matki karmiące.
3. Zawodnicy z powikłaniami chorób nerek, wątroby i płuc, Pacjenci z obniżoną odpornością, np. (HIV).
4. Pacjenci cierpiący na choroby takie jak malaria, gruźlica i schemat leczenia takich infekcji.

1.3.3. Badane leczenie Przed rozpoczęciem protokołu leczenia przeprowadzono również ocenę toksykologiczną ekstraktów ziołowych w celu zapewnienia bezpieczeństwa ziołowych preparatów farmaceutycznych do stosowania miejscowego. W przypadku więcej niż jednej zmiany, do biopsji wybrano dowolną, chociaż wszystkie otrzymywały to samo leczenie. Obie grupy pacjentów leczono miejscowymi preparatami ziołowymi Gyburene 5% kremem (do leczenia CL) rano i wieczorem oraz 5% maścią Thiscare (do szybkiego gojenia się ran i leczenia nadkażeń) tylko na noc w dwóch różnych kierunkach pod kątem 90º względem siebie, pozostawiając odkrytą zmianę.

Przed nałożeniem drugiego preparatu wszystkim uczestnikom zalecono przemycie zmiany normalną solą fizjologiczną. Cotygodniową kontrolę prowadzono aż do zakończenia terapii w celu zapewnienia całkowitego wyleczenia, np. negatywnego rozmazu amastigotów w próbie skórnej szczepu Giemsa oraz całkowitego wygojenia z ponownym nabłonkiem zmiany. Każdy preparat był dozowany w 10 g pojemniku (osobno) wystarczającym na jeden tydzień.

1.4. Analiza statystyczna Test T wykorzystany do porównania wskaźnika gojenia między dwiema grupami, podczas gdy test Kaplana Meiera między grupą pilotażową a grupą oporną, podczas gdy test Kaplana Meiera wykorzystany do obliczenia wygojonej powierzchni tygodniowo dla grupy opornej i pilotażowej przy P<0,05 przy użyciu SPSS w wersji 21.

Ocena kliniczna Performa dla leiszmaniozy skórnej (CL) Dane osobowe Kod pacjenta: ------------------- Mężczyzna/Kobieta: ------------- --------- Wiek: ---------- Adres: --------------- Zawód: ---------- --------- Stan cywilny: -------------

Nr kontaktowy: -------------------------- Nr CNIC: ------------------ ------Historia rodzinna:

Informacje kliniczne Morfologia zmiany

• Wrzodziejące
• Skorupa
• Plakieta
• Guzek Stan uszkodzenia
• Suchy
• Test mokrego rozmazu Giemsy
• Pozytywny
• Negatywny Czas trwania zmian
• ≥ 6 miesięcy
• Od 6 do 12 miesięcy
• ≤ 6 miesięcy Liczba zmian
• 1
• 2
• 3
• 4
• 5

Stan zdrowia

• Artretyzm
• Alergia
• Cukrzyca
• Zaburzenia odporności
• Diagnostyka różnicowa ciśnienia krwi dla CL
• Zakażenia bakteryjne i grzybicze skóry
• Wyprysk
• Syfilis
• Sarkoidoza
• blastomykoza
• Inne Powierzchnia zmiany/wizyta Wizyta I: Powierzchnia=……………cm2 Wizyta II: Powierzchnia= …………..cm2 Wizyta III: Powierzchnia=…………. cm2 Wizyta IV: Powierzchnia=………… cm2 Wizyta V: Powierzchnia=…………. cm2

Uwagi dermatologa:

Podpis dermatologa