Entwicklung von topischen Kräuterformulierungen zur Behandlung von kutaner Leishmaniose

STUDIENPROTOKOLL

1.1. Einführung Leishmaniose ist ein großes vernachlässigtes Gesundheitsproblem, das häufig in tropischen und subtropischen Regionen mit einer Prävalenzrate von 1,5 Millionen pro Jahr weltweit vorkommt. Die Krankheit wird durch einzellige Parasiten der Gattung Leishmania verursacht. Die Übertragung erfolgte durch Sandmücken der Gattung Phlebotomus in der (Alten Welt) und Lutzomyia (Neue Welt). Kutane Leishmaniose ist auf die Haut beschränkt und ungefähr 185 Millionen Menschen in 61 Ländern gefährdet. Jetzt ist es in Pakistan (verschiedene Regionen) endemisch und breitet sich schnell aus, besonders in den Flüchtlingslagern. Der hauptsächlich gefundene Erreger ist L. major, gefolgt von L. tropica. Eine aufmerksame Literaturrecherche ergab, dass neben den vier pakistanischen Provinzen auch in Belutschistan, der flächenmäßig größten Provinz, eine erhöhte Inzidenz von CL festgestellt wurde, gefolgt von NWFP. In der Provinz Sindh (Dadu, Jacobabad, Larkana und Karachi) werden häufig Fälle gemeldet, während in Punjab (Multan und Dera Ghazi Khan) hauptsächlich das Auftreten von Krankheiten gemeldet wird. Die Diagnose dieser Krankheiten erfolgt anhand des klinischen Bildes. Normalerweise werden trockene Läsionen durch L. tropica verursacht, während feuchte und frühe ulzerative Läsionen durch L. major verursacht werden. Solche Läsionen brauchen Monate bis Jahre, um zu heilen, und heilen schließlich durch eigene, aber Satellitenläsionen und Bakterien und Pilze Infektionen führen zu einem verzögerten und komplizierten Heilungsprozess, aber in nicht endemischen Gebieten ist es aufgrund der unklaren Form schwierig zu diagnostizieren, zusammen mit diesen Sekundärinfektionen können Verzögerungen bei der Behandlung sowie manchmal auch Fehlbehandlungen zu Veränderungen des klinischen Bildes führen. In solchen Situationen ist die Untersuchung des Abstrichs von der Läsion das diagnostische Werkzeug zusammen mit kulturellen und histopathologischen Untersuchungen.

1.2. Klinische Studien mit CL Methanolischer Rindenextrakt von Casuarina equisetifolia L. zeigten ein gutes antileishmaniales Potenzial gegen L.major unter Verwendung von In-vitro-Analysen, die uns zu einem innovativen therapeutischen Konzept für die Entwicklung neuer pflanzlicher Formulierungen gegen Leishmaniose durch beschleunigten Wundverschluss in klinischen Studien an menschlichen Teilnehmern führten . Ulzerative CL ist auf eine mangelhafte Wundheilung zurückzuführen. Abhängig von dieser Hypothese ist eine aktuelle Studie geplant, um die klinische Wirksamkeit des neuen Protokolls Gyburene 5 % Creme als antiparasitäres Mittel, gefolgt von Thuscare 5 % Salbe zur Beschleunigung des Wundverschlusses zu untersuchen. Das primäre Ziel dieser Studie ist die Bewertung der Anti-Leishmaniose-Wirkung von Gyburene 5 % Creme beim Wundverschluss und nach sechs Monaten, während das sekundäre Ziel darin besteht, zu bewerten, dass eine ununterbrochene Wundpflege zusammen mit einem Antiparasitikum zu einer wertvollen Verbesserung der Behandlung führen kann.

1.3. Stichprobenpopulation und Studiendesign: Dies ist eine einfach verblindete, randomisierte Studie. Siebzig Patienten mit bestätigter kutaner Leishmaniose wurden in die Studie aufgenommen. Die Teilnehmer wurden nach dem Zufallsprinzip in zwei Gruppen eingeteilt. Pilotgruppe (erhielt zuvor keine Medikamente) und resistente Gruppe (die bereits Medikamente entweder parenteral oder topisch erhalten hat). Während der Versuche wurden 20 Teilnehmer aufgrund mangelnder Nachsorge, insbesondere der betroffenen Menschen aus ländlichen Gebieten, abgesetzt.

1.3.1. Ethische Erwägung: Das Forschungsprotokoll wurde von der Ethikkommission des Board of Advanced Studies and Research University of Karachi Vide Resol No. 16 genehmigt. Einverständniserklärungen wurden von jedem Patienten genommen.

1.3.2. Patientenbewertung:

Die Krankengeschichte jedes Patienten (Alter, Geschlecht, Komorbiditäten, Wundzustand, Ort und Größe der Läsion mit Giemsa-Abstrichtestbericht) wurde vor dem Behandlungsprotokoll auf dem speziell für diese Studie entwickelten klinischen Performa erhoben und bestand aus zwei Teilen, dem ersten für Personalinformationen und zweitens für die Krankengeschichte. Die Läsionsgröße wurde mit einem Messschieber in zwei Dimensionen berechnet und jedem Teilnehmer wurde eine wöchentliche Nachsorge bis zum Ende der Therapie empfohlen. Vor, während und nach der Therapie wurden Porträtfotos mit einer Digitalkamera zur Beurteilung des Heilungsprozentsatzes gemacht. Geheilte Patienten wurden weitere sechs Monate lang nachbeobachtet, um sicherzustellen, dass kein Rückschlag aufgetreten ist. Das Vorhandensein oder Fehlen von Parasiten wurde durch einen Abstrichtest bestätigt, während die geheilte Fläche als Prozentsatz der Heilung nach der folgenden Formel berechnet wurde (Baie und Sheikh, 2000):

1.3.2.1. Einschlusskriterien

1. Patienten, die die histologischen Kriterien für das Vorhandensein von Parasiten erfüllten
2. Alter über 4 Jahre und beide Geschlechter.
3. Läsionen sind weniger als 5 in der Zahl bei jedem Patienten
4. Die Größe der Läsion beträgt weniger als 5 cm2
5. Teilnehmer, die die Therapie vor mehr als 4 Wochen beendet hatten und bei denen sich die Läsionen nicht verbesserten.
6. Die Krankheitsdauer der in der Studie befindlichen Patienten betrug sechs Monate (akut) und mehr als ein Jahr (chronisch).

1.3.2.2. Ausschlusskriterien

1. Patienten, die im letzten Monat Immunsuppressiva oder Anti-Leishmania-Medikamente eingenommen hatten.
2. Schwangere und stillende Mütter.
3. Teilnehmer mit Komplikationen von Nieren-, Leber- und Lungenerkrankungen, Patienten mit geschwächtem Immunsystem wie (HIV).
4. Patienten, die an Erkrankungen wie Malaria, Tuberkulose und Behandlungsschema leiden, gehen für solche Infektionen vor sich.

1.3.3. Studienbehandlung Vor dem Beginn des Behandlungsprotokolls wurde auch eine toxikologische Bewertung von Kräuterextrakten durchgeführt, um die Sicherheit topischer pflanzlicher pharmazeutischer Präparate zu gewährleisten. Im Falle von mehr als einer Läsion wurde eine für Biopsien bestimmt, obwohl alle die gleiche Behandlung erhielten. Beide Patientengruppen wurden mit topischen pflanzlichen Formulierungen Gyburene 5 % Creme (zur Heilung von CL) morgens und abends und Thuscare 5 % Salbe (zur schnellen Wundheilung und Heilung von Superinfektionen) nur nachts in zwei verschiedenen Richtungen im Winkel behandelt von 90º zueinander, indem die Läsion unbedeckt gelassen wird.

Vor dem Auftragen der zweiten Formulierung wurde allen Teilnehmern geraten, die Läsion mit normaler Kochsalzlösung zu waschen. Eine wöchentliche Nachsorge wurde bis zum Abschluss der Therapie durchgeführt, um die vollständige Heilung sicherzustellen, wie zum Beispiel bei negativen Abstrich-Hauttest-Amastigoten im Giemsa-Stamm, und eine vollständige Heilung mit Reepithelisierung der Läsion. Jede Formulierung wurde in 10-g-Behältern (getrennt) ausreichend für eine Woche abgegeben.

1.4. Statistische Analyse Der T-Test wurde zum Vergleich der Heilungsrate zwischen zwei Gruppen verwendet, während der Kaplan-Meier-Test zwischen der Pilot- und der resistenten Gruppe verwendet wurde, während der Kaplan-Meier-Test verwendet wurde, um die geheilte Fläche pro Woche für sowohl die resistente als auch die Pilotgruppe bei P<0,05 unter Verwendung von SPSS Version 21 zu berechnen.

Klinische Bewertung Performa für kutane Leishmaniose (CL) Persönliche Informationen Patientencode: ------------------- Männlich/Weiblich: ------------- --------- Alter: ---------- Adresse: --------------- Beruf: ---------- --------- Familienstand: -------------

Kontakt-Nr.: -------------------------- CNIC-Nr.: ------------------ ------Familiengeschichte:

Klinische Informationen Morphologie der Läsion

• Geschwürig
• Kruste
• Plakette
• Zustand der Knotenläsion
• Trocken
• Nasser Giemsa-Abstrichtest
• Positiv
• Negativ Dauer der Läsionen
• ≥ 6 Monate
• Zwischen 6-12 Monaten
• ≤ 6 Monate Anzahl Läsionen
• 1
• 2
• 3
• 4
• 5

Gesundheitszustand

• Arthritis
• Allergie
• Diabetes
• Immunstörung
• Blutdruck Differentialdiagnose für CL
• Bakterielle und Pilzinfektionen der Haut
• Ekzem
• Syphilis
• Sarkoidose
• Blastomykose
• Sonstige Bereich der Läsion/Besuch Besuch I: Bereich=……………cm2 Besuch II: Bereich= …………..cm2 Besuch III: Bereich=…………. cm2 Besuch IV: Fläche=………… cm2 Besuch V: Fläche=…………. cm2

Bemerkungen des Dermatologen:

Unterschrift des Dermatologen