Ontwikkeling van actuele kruidenformuleringen voor de behandeling van cutane leishmaniasis

LEERPROTOCOOL

1.1. Inleiding Leishmaniasis is een belangrijk verwaarloosd gezondheidsprobleem dat vaak voorkomt in tropische en subtropische gebieden met een wereldwijde prevalentie van 1,5 miljoen per jaar. De ziekte wordt veroorzaakt door een protozoaire parasiet van het geslacht Leishmania. Overdracht vond plaats door zandvliegen van het geslacht Phlebotomus in de (Oude Wereld) en Lutzomyia (Nieuwe Wereld). Cutane leishmaniasis is beperkt tot de huid en ongeveer 185 miljoen mensen lopen risico in 61 landen. Nu is het endemisch in Pakistan (verschillende regio's) en verspreidt het zich snel, vooral in de vluchtelingenkampen. De belangrijkste gevonden veroorzaker is L. major gevolgd door L. tropica. Nauwkeurig literatuuronderzoek onthulde dat naast de vier provincies van Pakistan verhoogde gevallen van CL werden gevonden in Balochistan, de grootste provincie (in oppervlakte), gevolgd door NWFP. In de provincie Sindh (Dadu, Jacobabad, Larkana en Karachi) worden vaak gevallen gemeld, terwijl in Punjab (Multan en Dera Ghazi Khan) voornamelijk gevallen worden gemeld. De diagnose van deze ziekte wordt gesteld op basis van het klinische beeld. Meestal worden droge laesies veroorzaakt door L. tropica, terwijl vochtige en vroege ulceratieve laesies worden veroorzaakt door L. major. infecties resulteren in een vertraagd en gecompliceerd genezingsproces, maar in niet-endemische gebieden is het moeilijk te diagnosticeren vanwege de onduidelijke vorm, samen met secundaire infecties, vertraagde behandeling en mishandeling kunnen soms ook veranderingen in het ziektebeeld veroorzaken. In dergelijke situaties is het onderzoek van een uitstrijkje van de laesie het diagnostisch hulpmiddel, samen met kweek- en histopathologische onderzoeken.

1.2. Klinische proeven tegen CL Methanolisch schorsextract van Casuarina equisetifolia L. vertoonden een goed antileishmania-potentieel tegen L.major met behulp van in-vitro-analyse die ons leidde naar een innovatief therapeutisch concept voor de ontwikkeling van nieuwe kruidenformuleringen tegen leishmaniasis door versnelde wondsluitingen in klinische proeven op menselijke deelnemers . Ulceratieve CL is het gevolg van gebrekkige wondgenezing, afhankelijk van deze hypothese. Het huidige onderzoek is gepland om de klinische werkzaamheid te onderzoeken van het nieuwe protocol Gyburene 5% crème als antiparasitair middel, gevolgd door Thuscare 5% zalf om de wondsluiting te versnellen. Het primaire doel van deze studie is het evalueren van de antileishmaniale uitkomst van Gyburene 5% crème bij wondsluiting en na zes maanden, terwijl het secundaire doel is om te evalueren dat onophoudelijke wondzorg samen met een antiparasitair middel kan resulteren in een waardevolle verbetering van de behandeling.

1.3. Steekproefpopulatie en onderzoeksopzet: Dit is een enkelblinde, gerandomiseerde studie. Zeventig patiënten met bevestigde cutane leishmaniasis werden gerekruteerd voor het onderzoek. Deelnemers werden willekeurig verdeeld in twee groepen. Pilotgroep (heeft nog niet eerder medicatie gekregen) en resistente groep (die al medicatie van ouders of topicaal kreeg). Tijdens proeven werden 20 deelnemers gedropt als gevolg van gebrek aan follow-up, met name de getroffen mensen uit plattelandsgebieden.

1.3.1. Ethische overweging: Het onderzoeksprotocol is goedgekeurd door de ethische commissie van de Board of Advanced Studies en Research University of Karachi Vide Resol No. 16. Van elke patiënt werden formulieren voor geïnformeerde toestemming genomen.

1.3.2. Patiënt beoordeling:

De medische voorgeschiedenis van elke patiënt (leeftijd, geslacht, comorbiditeit, wondaandoening, plaats en grootte van de laesie met Giemsa-uitstrijkrapport) werd voorafgaand aan het behandelingsprotocol afgenomen op klinische Performa die speciaal voor dit onderzoek was ontworpen en bestond uit twee delen, eerst voor personeelsinformatie en tweede voor medische geschiedenis. De grootte van de laesie werd berekend met behulp van een schuifmaat in twee dimensies en elke deelnemer adviseerde voor wekelijkse follow-up tot het einde van de therapie, er werden portretfoto's gemaakt voor, tijdens en na de therapie met behulp van een digitale camera om het genezingspercentage te beoordelen. Genezen patiënten werden nog eens zes maanden opgevolgd om er zeker van te zijn dat er geen terugval plaatsvond. Aanwezigheid of afwezigheid van parasiet werd bevestigd door middel van een uitstrijkje, terwijl het genezen gebied werd berekend als percentage van genezing met de volgende formule (Baie en Sheikh, 2000):

1.3.2.1. Inclusiecriteria

1. Patiënten die voldeden aan de histologische criteria voor aanwezigheid van parasiet
2. Leeftijd ouder dan 4 jaar en beide geslachten.
3. Laesies zijn minder dan 5 in aantal bij elke patiënt
4. De grootte van de laesie is minder dan 5 cm2
5. Deelnemers die meer dan 4 weken eerder met de therapie waren gestopt en de laesies niet verbeterden.
6. De duur van de ziekte voor de proefpatiënten was zes maanden (acuut) en meer dan een jaar (chronisch).

1.3.2.2. Uitsluitingscriteria

1. Patiënten die in de afgelopen maand immunosuppressiva of antileishmaniamedicijnen hadden gebruikt.
2. Zwangere vrouwen en moeders die borstvoeding geven.
3. Deelnemers met complicaties van nier-, lever- en longziekte, immuun-o-gecompromitteerde patiënten zoals (HIV).
4. Patiënten die lijden aan aandoeningen zoals malaria, tuberculose en een behandelingsschema voor dergelijke infecties.

1.3.3. Onderzoeksbehandeling Voorafgaand aan het aanvangsbehandelingsprotocol werd ook een toxicologische evaluatie van kruidenextracten uitgevoerd om de veiligheid van lokale farmaceutische kruidenpreparaten te waarborgen. In het geval van meer dan één laesie was iedereen gericht op biopsieën, hoewel ze allemaal dezelfde behandeling kregen. Beide groepen patiënten werden 's morgens en' s avonds behandeld met plaatselijke kruidenformuleringen Gyburene 5% crème (voor genezing van CL) en Thuscare 5% zalf (voor snelle wondgenezing en genezing van superinfecties) alleen 's nachts in twee verschillende richtingen onder de hoek van 90º ten opzichte van elkaar door de laesie onbedekt te laten.

Voordat de tweede formulering werd aangebracht, werd alle deelnemers geadviseerd om de laesie te wassen met normale zoutoplossing. Wekelijkse follow-up vond plaats tot voltooiing van de therapie om de volledige genezing te verzekeren, zoals voor negatieve uitstrijkje huidtestamastigoten in Giemsa-stam en volledige genezing met re-epithelialisatie van de laesie. Elke formulering werd geleverd in een container van 10 g (afzonderlijk) genoeg voor één week.

1.4. T-test voor statistische analyse gebruikt voor vergelijkingssnelheid van genezing tussen twee groepen, terwijl Kaplan Meier-test tussen pilot- en resistente groep, terwijl Kaplan Meier-test werd gebruikt om het genezen gebied per week te berekenen voor zowel resistente als pilot-groep op P <0,05 met behulp van SPSS versie 21.

Klinische evaluatie Performa voor Cutane Leishmaniasis (CL) Persoonlijke informatie Patiëntcode: ------------------- Man/vrouw: ------------- --------- Leeftijd: ---------- Adres: --------------- Beroep: ---------- --------- Burgerlijke staat: -------------

Contactnummer: -------------------------- CNIC-nummer: ------------------ ------Familiegeschiedenis:

Klinische informatie Morfologie van laesie

• Zweren
• Korst
• plaquette
• Nodule Laesie aandoening
• Droog
• Natte Giemsa-uitstrijktest
• Positief
• Negatieve duur van laesies
• ≥ 6 maanden
• Tussen 6-12 maanden
• ≤ 6 maanden Aantal laesies
• 1
• 2
• 3
• 4
• 5

Gezondheid

• Artritis
• Allergie
• suikerziekte
• Immuun stoornis
• Bloeddruk Differentiële diagnose voor CL
• Bacteriële en schimmelinfectie van de huid
• Eczeem
• Syfilis
• Sarcoïdose
• Blastomycose
• Overige Laesiegebied/bezoek Bezoek I: Gebied=……………cm2 Bezoek II: Gebied= …………..cm2 Bezoek III: Gebied=…………. cm2 Bezoek IV: Gebied=………… cm2 Bezoek V: Gebied=…………. cm2

Opmerkingen dermatoloog:

Handtekening dermatoloog