Desarrollo de formulaciones herbales tópicas para el tratamiento de la leishmaniasis cutánea

PROTOCOLO DE ESTUDIO

1.1. Introducción La leishmaniasis es un importante problema de salud descuidado que se encuentra con frecuencia en las regiones tropicales y subtropicales con una tasa de prevalencia de 1,5 millones por año en todo el mundo. La enfermedad es causada por un parásito protozoario del género Leishmania. La transmisión ocurrió por flebótomos del género Phlebotomus en el (Viejo Mundo) y Lutzomyia (Nuevo Mundo). La leishmaniasis cutánea está restringida a la piel y alrededor de 185 millones de personas en riesgo en 61 países. Ahora es endémico en Pakistán (diferentes regiones) y se difunde rápidamente, particularmente en los campos de refugiados. El principal agente causal encontrado es L. major seguido de L. tropica. Una cuidadosa revisión de la literatura reveló que, además de las cuatro provincias de Pakistán, se encontraron mayores incidencias de LC en Baluchistán, que es la provincia más grande (en área), seguida por NWFP. En la provincia de Sindh (Dadu, Jacobabad, Larkana y Karachi) se notifican comúnmente los casos, mientras que en Punjab (Multan y Dera Ghazi Khan) se notifican principalmente la aparición de la enfermedad. El diagnóstico de esta enfermedad se realiza por el cuadro clínico, por lo general, las lesiones secas son causadas por L. tropica, mientras que las lesiones húmedas y ulcerativas tempranas son causadas por L. major, tales lesiones tardan meses o años en sanar, eventualmente se curan por sí mismas, pero las lesiones satélite y bacterianas y fúngicas Las infecciones dan como resultado un proceso de curación tardío y complicado, pero en áreas no endémicas es difícil de diagnosticar debido a su forma poco clara, junto con estas infecciones secundarias, el retraso en el tratamiento y el maltrato a veces también pueden causar cambios en el cuadro clínico. En tales situaciones, el examen del frotis de la lesión es la herramienta de diagnóstico junto con el cultivo y los exámenes histopatológicos.

1.2. Los ensayos clínicos contra CL El extracto metanólico de corteza de Casuarina equisetifolia L. mostró un buen potencial antileishmanial contra L. major utilizando análisis in vitro que nos dirigieron hacia un concepto terapéutico innovador para el desarrollo de nuevas formulaciones a base de hierbas contra la leishmaniasis a través del cierre acelerado de heridas en ensayos clínicos en participantes humanos. . La LC ulcerosa se debe a una cicatrización defectuosa de la herida. Según esta hipótesis, se planea un estudio actual para explorar la eficacia clínica del nuevo protocolo Gyburene 5 % en crema como agente antiparasitario, seguido de la pomada dethuscare al 5 % para acelerar el cierre de las heridas. El objetivo principal de este estudio es evaluar el resultado antileishmanial de la crema Gyburene al 5 % en el cierre de la herida y después de seis meses, mientras que el objetivo secundario es evaluar que el cuidado incesante de la herida junto con el agente antiparasitario puede resultar en una valiosa mejora en el tratamiento.

1.3. Muestra de población y diseño del estudio: Este es un estudio aleatorizado simple ciego. Setenta pacientes con leishmaniasis cutánea confirmada fueron reclutados en el estudio. Los participantes fueron asignados al azar en dos grupos. Grupo piloto (que no recibió ningún medicamento antes) y grupo resistente (que ya recibió medicación ya sea parenteral o tópica). Durante los ensayos, 20 participantes se retiraron como resultado de la falta de seguimiento, especialmente las personas afectadas que provenían de áreas rurales.

1.3.1. Consideración ética: El protocolo de investigación fue aprobado por el comité de ética de la Junta de Estudios Avanzados e Investigación de la Universidad de Karachi Vide Resol No. 16. Se tomaron formularios de consentimiento informado de cada paciente.

1.3.2. La evaluación del paciente:

El historial médico de cada paciente (edad, sexo, comorbilidades, condición de la herida, sitio y tamaño de la lesión con informe de prueba de frotis de Giemsa) se tomó antes del protocolo de tratamiento en clínica Performa especialmente diseñada para este estudio y constó de dos partes, primero para información del personal y segundo para el historial médico. El tamaño de la lesión se calculó con un calibrador Vernier en dos dimensiones y se recomendó a cada participante un seguimiento semanal hasta el final de la terapia. Se tomaron fotografías de retrato antes, durante y después de la terapia con una cámara digital para evaluar el porcentaje de curación. Se realizó un seguimiento de los pacientes curados durante seis meses más para garantizar que no se haya producido ningún retroceso. La presencia o ausencia de parásitos se confirmó mediante una prueba de frotis, mientras que el área cicatrizada se calculó por porcentaje de cicatrización mediante la siguiente fórmula (Baie y Sheikh, 2000):

1.3.2.1. Criterios de inclusión

1. Pacientes que cumplieron con los criterios histológicos de presencia del parásito
2. Edad mayor de 4 años y ambos sexos.
3. Las lesiones son menos de 5 en número en cada paciente
4. El tamaño de la lesión es inferior a 5 cm2
5. Participantes que habían interrumpido el tratamiento más de 4 semanas antes y las lesiones no mejoraban.
6. La duración de la enfermedad para los pacientes bajo prueba fue de seis meses (aguda) y más de un año (crónica).

1.3.2.2. Criterio de exclusión

1. Pacientes que hayan tomado algún medicamento inmunosupresor o antileishmanial en el último mes.
2. Mujeres embarazadas y madres lactantes.
3. Concursantes con complicaciones de enfermedades renales, hepáticas y pulmonares, pacientes inmunocomprometidos como (VIH).
4. Los pacientes que sufren de enfermedades como la malaria, la tuberculosis y el régimen de tratamiento se está llevando a cabo para este tipo de infecciones.

1.3.3. Tratamiento del estudio Antes de iniciar el protocolo de tratamiento, también se realizó una evaluación toxicológica de los extractos de hierbas para garantizar la seguridad de las preparaciones farmacéuticas de hierbas tópicas. En caso de más de una lesión, cualquiera de ellas fue objeto de biopsias, aunque todas recibieron el mismo tratamiento. Ambos grupos de pacientes fueron tratados con formulaciones tópicas a base de hierbas Gyburene 5 % en crema (para curar la LC) por la mañana y por la noche ythuscare 5 % en pomada (para curar heridas rápidamente y curar súper infecciones) solo por la noche en dos direcciones diferentes en el ángulo de 90º entre sí dejando la lesión descubierta.

Antes de la aplicación de la segunda formulación, se aconsejó a todos los concursantes que lavaran la lesión con solución salina normal. Se realizó seguimiento semanal hasta finalizar la terapia para asegurar la curación total como por ejemplo para baciloscopia negativa amastigotes en cepa Giemsa y curación completa con reepitelización de la lesión. Cada formulación se dispensó en un recipiente de 10 g (por separado) suficiente para una semana.

1.4. Análisis estadístico La prueba T se usó para comparar la tasa de curación entre dos grupos, mientras que la prueba de Kaplan Meier entre el grupo piloto y el resistente, mientras que la prueba de Kaplan Meier se usó para calcular el área curada por semana tanto para el grupo resistente como para el piloto en P<0.05 usando SPSS versión 21.

Evaluación clínica Performa para Leishmaniasis Cutánea (LC) Datos personales Código del paciente: ------------------- Hombre/Mujer: ------------------- --------- Edad: ---------- Dirección: --------------- Ocupación: ---------- --------- Estado civil: -------------

Nº de contacto: -------------------------- Nº CNIC: ------------------ ------Historia familiar:

Información clínica Morfología de la lesión

• ulcerado
• Corteza
• Placa
• Condición de lesión de nódulo
• Seco
• Prueba de frotis húmedo de Giemsa
• Positivo
• Negativo Duración de las lesiones
• ≥ 6 meses
• Entre 6-12 meses
• ≤ 6 meses Nº de lesiones
• 1
• 2
• 3
• 4
• 5

Estado de salud

• Artritis
• Alergia
• Diabetes
• Trastorno inmunológico
• Presión arterial Diagnóstico diferencial para CL
• Infecciones bacterianas y fúngicas de la piel
• Eczema
• Sífilis
• sarcoidosis
• Blastomicosis
• Otros Área de lesión/visita Visita I: Área=……………cm2 Visita II: Área= …………..cm2 Visita III: Área=…………. cm2 Visita IV: Área=………… cm2 Visita V: Área=…………. cm2

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