Az általános érzéstelenítés által kiváltott neurotoxicitás enzimatikus értékelése aneurysmális szubarachnoidális vérzésben szenvedő betegeknél

Tizenhat beteget vonnak be a vizsgálatba az egyes beavatkozások során (műtét vagy endovaszkuláris tekercselés). Összesen harminckét olyan beteget vesznek fel a vizsgálatba, akik megfelelnek a felvételi kritériumoknak. A betegeket véletlenszerűen négy csoportba osztják, hogy Propofol (P csoport), Isoflurane (I. csoport), Sevofluran (S csoport) vagy Desflurane (D csoport) kapjanak az érzéstelenítés fenntartására szolgáló számítógép által generált algoritmus segítségével.

A műtétet vagy az endovaszkuláris tekercselést tapasztalt idegsebész vagy radiológus végzi, aki nem ismeri az érzéstelenítés fenntartásához használt érzéstelenítő szert. A beavatkozás előtt érzéstelenítés előtti kivizsgálásra kerül sor. A pácienst alaposan megvizsgálják, és minden vizsgálatot felülvizsgálnak. A beteg hozzátartozóitól írásos beleegyezést kell beszerezni.

ALKALMAZÁSI PROTOKOLL:

A betegekhez rutinszerű non-invazív monitorokat csatolnak. Tartalmazni fogja a noninvazív vérnyomást (NIBP), a pulzusszámot (HR), az elektrokardiográfiát (EKG), a pulzoximetriát (SpO2), az árapály végi szén-dioxidot (EtCO2), az állapot entrópiát (SE) és a vizeletkibocsátást. Minden betegnek 10-15 ml/ttkg normál sóoldatot kell előtölteni. A fentanilt intravénásan kell beadni 2 µg/kg dózisban az indukció előtt, majd 0,5-2 µg/kg/óra infúzióban. Mind a 4 csoportban a betegeket 1-2 mg/kg propofollal indukálják, a verbális válasz elvesztéséig titrálva. Vecuronium 0,1 mg/kg-ot adnak a légcső intubációjának megkönnyítésére. 1,5 mg/ttkg lignokaint adnak be 120 másodperccel a laringoszkópia előtt. Az érzéstelenítés beindítása után artériás katétert helyeznek el a vérnyomás ütéstől-verés monitorozásához és a vérgáz elemzéshez. A betegeket a csoportok elosztásának megfelelően, 50/50% oxigén/levegő arány mellett tartják fenn. A BIS-monitorozást az összes csoportban az érzéstelenítés összehasonlítható mélységének fenntartására használják, és úgy titrálják, hogy az SE 40-60 tartományban maradjon. A Vecuroniumot szakaszosan adják be, hogy a neurostimuláció során kettőnél kevesebb rángást tartsanak fenn. A testhőmérsékletet légmelegítő takaró segítségével tartják fenn.

Intraoperatív folyadékként normál sóoldatot kell használni. A PaCO2 32-36 Hgmm körül marad. A neuromuszkuláris blokád visszafordítható 50 µg/kg neosztigmin és 10 µg/kg glikopirrolát kombinációjával. Ezt követően a légcső extubálódik.

Azokat a betegeket, akiket nem lehet extubálni, idegsebészeti intenzív osztályra szállítják elektív lélegeztetőgépes támogatás céljából.

Az intraoperatív hemodinamikai monitorozás, az ideiglenes levágási idő és az aneurizmarepedés minden előfordulása feljegyzésre kerül. A durális reflexió idején az agy kidudorodását észleljük. A páciens állapotát a műtét végén értékelik az extubáció és a neurológiai állapot szempontjából, azaz. GCS.

VIZSGÁLATI VÁLTOZÓK -

MŰTÉTEL ELŐTT:

A beteg demográfiai adatait, az ictus napját, a kórházi felvétel napját, a műtét napját, a WFNS-t, a Fischer-osztályokat és az esetleges társbetegségeket rögzítjük. A neurológiai vizsgálatot, beleértve a GCS-t és a műtét előtti neurológiai hiány meglétét vagy hiányát is fel kell jegyezni.

MŰKÖDÉSBEN:

A pulzusszámot (HR), a szisztolés vérnyomást (SBP), az átlagos artériás nyomást (MAP), a pulzoximetriát (SpO2), a hőmérsékletet és az árapály végi szén-dioxidot (EtCO2) fel kell jegyezni az indukció, az intubálás, a metszés és a fejtűk, csontlebeny reflexió, Duralis reflexió, nyírás, Duralis lezárás, bőrzárás és az érzéstelenítés megszüntetése előtt. A betegek pulzusszámát és vérnyomását a lehető legközelebb kell tartani az alapvonalhoz. A vérnyomás bármely, az alapérték 30%-át meghaladó tartós növekedése intraoperatív magas vérnyomásnak minősül. A hipotenziót figyelembe kell venni, ha a MAP < 70 Hgmm vagy az SBP < 90 Hgmm. A magas vérnyomás vagy hipotenzió kezelése a kezelő aneszteziológus belátása szerint történik.

Az agy relaxációs pontozása a csontlebeny visszaverődését követően történik, négypontos skálán. Fel kell jegyezni az átmeneti nyírási időt, az intraoperatív aneurizmarepedést, az intraoperatív intravénás folyadékbevitelt, a vérveszteséget, a vizeletürítést.

JEGYZŐKÖNYV AZ ENZIM VIZSGÁLATHOZ ÉS BECSÜLÉSÉHEZ:

A páciens kiindulási agy-gerincvelői folyadékát (CSF) és szérumvérmintát gyűjtenek. A kiindulási CSF-et a beavatkozás előtt elhelyezett, ágyéki szubarachnoidális katéteren keresztül gyűjtik össze, hogy megelőzzék az SAH-hoz kapcsolódó szövődményeket, mint például a vasospasmus, és megkönnyítsék az SAH elvezetését. Vénapunkciót végeznek, és 2-3 ml vérmintát gyűjtenek egy sima fiolába szérum/EDTA plazmához. A második CSF és szérum vérmintát 1 óra érzéstelenítés után veszik. A harmadik mintát a beavatkozás befejezése után vagy az érzéstelenítő szer abbahagyása után veszik, attól függően, hogy melyik következik be korábban.

A kaszpáz 3 enzimszintet kvantitatív ELISA készlettel, előre bevont antigénüregekkel és ismert standardokkal becsüljük meg kettős antitest szendvics technikával.

Mintavétel és tárolás – A vérmintákat sima fiolákban/üresedényekben gyűjtik. A CSF-mintákat mélyhűtőben gyűjtik. A vérmintákat szobahőmérsékleten 1 órán át hagyjuk alvadni. Az alvadt vért a sima vacutainersben 2000 fordulat/perc sebességgel centrifugálják 15 percig, hogy elválasszák a szérumot. A szérumot pipettával a kriovialokba juttatják. Minden mintát azonnal -80 °C-on tárolnak a további elemzésig.

A kaszpáz 3 enzim becslése Az enzimatikus értékeléshez a következő lépéseket kell követni:

1. A 40 C-on tárolt ELISA készletet 20 perccel a teszt elvégzése előtt ki kell venni a hűtőszekrényből, hogy egyensúlyba kerüljön a szobahőmérsékletre.
2. Különböző koncentrációjú, ismert értékekkel rendelkező Human-caspase 3 standardokat és ismeretlen értékű tesztmintákat kell hozzáadni az előre bevont mikrolemez bevont üregeihez.
3. A biotinilált humán kaszpáz 3 antitest folyadékot, az enzim konjugátum folyadékot és a színező reagenst 30 perccel a felhasználás előtt készítik el
4. Az Elisa lemezeket háromszor mossuk úgy, hogy 350 µl mosópuffert adunk az üregekhez, és adszorbens papírtörlőn szárítjuk a mosások között.
5. A biotinilált humán kaszpáz 3 folyadékot most minden egyes lyukba adják
6. A lyukakat háromszor mossuk ki a fent, a 4. lépésben leírtak szerint.
7. Az enzimkonjugátum folyadékot most a mikrolemez egyes üregeibe adják
8. A lyukakat háromszor mossuk a fenti 4. és 6. lépésben leírtak szerint.
9. Színes reagenst (szubsztrát oldatot) kell hozzáadni, majd a leállító oldatot
10. Az optikai sűrűséget 450 nm-en mérjük mikrolemezes ELISA olvasóval
11. Az ismeretlen minták értékeit le kell olvasni a standard görbéről, amelyet az ismert standardok optikai sűrűségének az ismert koncentrációik függvényében ábrázolva generálnak.