Convalida multicentrica della sensibilità del rilevamento del riarrangiamento teranostico di ALK mediante analisi FISH e prevalenza delle mutazioni sfuggenti nelle cellule tumorali circolanti per la gestione non invasiva dei pazienti con carcinoma polmonare (STALKLUNG01)

L'idoneità dei pazienti alle terapie mirate si basa su un test molecolare eseguito su un campione di tumore prelevato mediante biopsia. Questa procedura invasiva è associata a un rischio relativamente elevato di morbilità e richiede l'intervento di una piattaforma tecnica costosa e importante. Pertanto, i pazienti inoperabili possono essere privati ​​di terapie potenzialmente più efficaci. Una "biopsia liquida" delle cellule tumorali circolanti (CTC) presenti nel sangue e la loro caratterizzazione molecolare è un'interessante alternativa per soddisfare un bisogno urgente di questi pazienti. Inoltre nessun test molecolare basato su CTC è attualmente disponibile di routine.

Il tasso di sopravvivenza a 5 anni dei pazienti con carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) è basso. Rapporti recenti hanno dimostrato che il rilevamento di un riarrangiamento di ALK nel tessuto tumorale consente ai pazienti con NSCLC in stadio avanzato di beneficiare del trattamento con crizotinib.

Tuttavia, 1) il rilevamento di un riarrangiamento ALK viene attualmente eseguito su piccole biopsie o aspirati con ago sottile e può essere ostacolato dalle limitate quantità di tessuto disponibili. Il tessuto tumorale è difficile da ottenere nei pazienti con carcinoma polmonare avanzato/metastatico per i quali la chirurgia è raramente una componente del trattamento. Trovare mezzi alternativi e più efficaci per diagnosticare un riarrangiamento ALK è un problema critico per identificare i pazienti che possono trarre beneficio dal trattamento con crizotinib; 2) alcuni pazienti sviluppano resistenza a crizotinib a causa di mutazioni de novo di ALK.

In questo contesto, le cellule tumorali circolanti (CTC), che si sono dimostrate rilevabili con il metodo ISET (Isolation by Size of Epithelial Tumor Cells) nell'80%-100% dei pazienti con carcinoma polmonare in stadio avanzato, rappresentano un metodo non invasivo e facilmente accessibile fonte di materiale tumorale per valutare il riarrangiamento di ALK e sfuggire alle mutazioni in modo cinetico. Il metodo ISET è stato pubblicato per la prima volta nel 2000 e diversi team indipendenti hanno ora stabilito la sua elevata sensibilità e specificità di ISET per NSCLC. Con ISET, la specificità può essere raggiunta utilizzando gli stessi metodi e criteri utilizzati dai citopatologi per diagnosticare i tumori solidi.

L'elevata sensibilità e specificità di ISET sono due punti di partenza essenziali per la fattibilità del presente progetto. È stata inoltre ottenuta la caratterizzazione molecolare a basso rendimento delle CTC isolate mediante ISET. La sfida rimanente consiste nello sviluppo di test molecolari basati su ISET ad alto rendimento per la medicina personalizzata che siano trasferibili alle cliniche.

Il Team 1 presso il CHU de Nice e il Team 2 presso l'Istituto Gustave Roussy hanno dimostrato che il rilevamento di un riarrangiamento ALK in CTC isolato da ISET è fattibile e coerente con i risultati ottenuti nei corrispondenti tessuti tumorali. In questo contesto, lo scopo di questo progetto è quello di ottenere 1) una validazione clinica prospettica definitiva dell'uso di CTC come alternativa al tessuto tumorale per la stratificazione dei pazienti basata sull'analisi ALK; 2) una prova che le mutazioni in fuga possono essere rilevate precocemente dall'analisi cinetica delle CTC nei pazienti trattati con crizotinib. Il riarrangiamento di ALK sarà studiato prospetticamente in CTC isolate mediante ISET alla diagnosi e durante il follow-up di pazienti con carcinoma polmonare in stadio IIIb/IV e le mutazioni de novo saranno ricercate in pazienti con resistenza a crizotinib. Questo studio fornirà benefici sia clinici che economici al trattamento mirato di pazienti con carcinoma polmonare avanzato.

Questo progetto è fortemente originale in quanto nessun test di riarrangiamento ALK basato su CTC è stato finora validato in modo indipendente con campioni clinici. Lo sviluppo di test teranostici non invasivi attraverso l'analisi genetica delle CTC è un obiettivo clinicamente rilevante per la stratificazione non invasiva dei pazienti oncologici, evitando la morbilità correlata alla biopsia polmonare e alla chirurgia. Consentirebbe di determinare l'idoneità del paziente a terapie mirate su un'analisi del campione di sangue. Il test ALK basato su CTC potrebbe essere utile per guidare la scelta della terapia mirata per ALK nei pazienti con carcinoma polmonare. Inoltre, lo sviluppo di biomarcatori basati sull'analisi delle CTC aprirebbe la strada al follow-up non invasivo di tumori aggressivi, alla diagnosi precoce di mutazioni associate alla resistenza a terapie mirate e all'adattamento del trattamento a un'analisi in tempo reale delle popolazioni di cellule tumorali in evoluzione. Si prevede che questo test migliorerà notevolmente la qualità della vita dei pazienti evitando procedure diagnostiche invasive.