Raccolta e caratterizzazione delle cellule di rivestimento olfattivo umano

La lesione del midollo spinale (SCI) è una condizione devastante. Ad oggi non esiste alcun trattamento per migliorare l'esito. Esiste una capacità rigenerativa limitata del sistema nervoso centrale (SNC), tale che i neuroni danneggiati e gli assoni recisi non vengono sostituiti.

Un corpo sostanziale di prove suggerisce che le cellule olfattive ensheathing (OEC) ottenute dai bulbi olfattivi (OB) facilitano la rigenerazione neuronale nei roditori e negli esseri umani con SCI. In effetti, il trapianto di OEC autologhi da un OB nel sito della lesione ha migliorato l'esito neurologico in un paziente con LM.

La raccolta di OB autologhi per la coltura di OEC presenta diversi svantaggi:

1. Se le OEC non crescono in vitro, il trapianto viene abbandonato;
2. La procedura di recupero espone un paziente paralizzato ai rischi di craniotomia;
3. L'escissione di un OB può compromettere il senso dell'olfatto; E
4. Il numero di OEC ottenuti è limitato a un OB.

Gli investigatori raccoglieranno OEC umani da donatori idonei che abbiamo definito come due gruppi. I pazienti del gruppo 1 saranno donatori cerebralmente morti identificati dal team di terapia neuro-intensiva come potenziali candidati per la donazione di organi solidi. Gli OB verranno recuperati il ​​più vicino possibile alla morte. I pazienti del gruppo 2 saranno donatori viventi sottoposti a neurochirurgia elettiva in cui il nervo olfattivo viene sacrificato come parte di tale procedura.

Ci sono due OB situati alla base cranica anteriore, responsabili della trasmissione della sensazione dell'olfatto dal naso al cervello. L'ottenimento di OEC richiede una craniotomia (apertura del cranio) per rimuovere gli OB.

LA FASE 1 sarà suddivisa in 2 fasi. Nella fase 1 coltiveremo gli OEC e li caratterizzeremo nel laboratorio centrale. Miriamo a determinare in che modo la resa degli OEC e le loro proprietà rigenerative sono influenzate dal congelamento-scongelamento, dal tempo lasciato a temperatura ambiente e dal tempo lasciato a 40°C prima della coltura, nonché dall'età del paziente. Ogni campione raccolto verrà trasferito al laboratorio per l'ulteriore elaborazione. L'elaborazione include ma non è limitata alla fissazione istologica, al sezionamento e alla colorazione, alla coltura cellulare e alla conservazione. Alcuni OEC saranno congelati in azoto liquido per determinare se possono effettivamente essere immagazzinati. Nella fase 2 trasferiremo gli OEC al di fuori di St. George's in una struttura GMP (da determinare). Nella struttura GMP, gli OEC verranno elaborati e immagazzinati secondo le condizioni ottimizzate che abbiamo determinato.

Nella FASE 2, gli OEC saranno trapiantati in pazienti con LM.