Effetto del tocilizumab sull'espressione di microRNA e sui livelli di adipochine nei pazienti con artrite reumatoide

Lo scopo dello studio è quello di indagare gli effetti del tocilizumab sull'espressione di biomarcatori come adipocitochine e miRNA nei leucociti del sangue periferico e nei campioni di siero ottenuti da pazienti affetti da artrite reumatoide. I miRNA candidati che possono essere quantificati sono ad esempio miR-9, 16, 125, 132, 146a, 150, 155, 181 e 223. I risultati ottenuti aiuteranno i ricercatori a determinare se l'espressione di citochine e miRNA può essere utilizzata come nuovo biomarcatore per la determinazione dell'efficacia del trattamento con tocilizumab.

Lo studio è concepito come uno studio prospettico che indaga l'effetto di tocilizumab sull'espressione di citochine e miRNA nei pazienti con artrite reumatoide. Sessanta pazienti con artrite reumatoide designati per essere trattati con tocilizumab e seguiti nelle cliniche reumatologiche.

Dopo aver ricevuto il consenso informato, verranno prelevati tre campioni di sangue di 5 cc di sangue ciascuno: il primo - prima del trattamento con tocilizumab per impostare il livello basale di espressione nei pazienti non trattati, il secondo e il terzo campione verranno prelevati un mese e quattro mesi dopo l'inizio del tocilizumab trattamento. Gli investigatori utilizzeranno campioni selezionati (da 5 pazienti) per eseguire analisi di microarray per l'espressione di miRNA e, in base ai risultati, confermeremo l'espressione di miRNA specifici mediante PCR quantitativa in tempo reale (qPCR). Sulla base delle conoscenze attuali, i ricercatori si aspettano che miR-9, 16, 125, 132, 146a, 150, 155, 181 e 223 mostreranno cambiamenti significativi nell'espressione dopo il trattamento con tocilizumab. I livelli di citochine vengono misurati mediante test ELISA per ogni singolo biomarcatore. I cambiamenti nell'espressione di citochine e miRNA, up-regulation o down-regulation, saranno correlati alla gravità della malattia e all'effetto clinico del tocilizumab. Verranno raccolte informazioni riguardanti la durata della malattia, l'attività misurata dal punteggio di attività della malattia, il trattamento concomitante e lo stato sierologico. Verranno registrate anche le caratteristiche demografiche - età, sesso e abitudine al fumo. I risultati saranno confrontati con 60 controlli sani abbinati per sesso ed età, senza disturbi reumatici, infiammatori o maligni