Profilazione del genoma fetale tramite cellule del trofoblasto

Lo scopo principale dello studio è convalidare il recupero e l'isolamento del trofoblasto dalla cervice (TRIC) come mezzo di diagnosi genetica prenatale affidabile e non invasiva (sia per le anomalie cromosomiche che per i difetti di un singolo gene).

La popolazione dello studio sarà reclutata da donne, di età compresa tra 18 e 45 anni, che si presentano al Centro di medicina riproduttiva (CRM) per cure mediche con il desiderio di rimanere incinta. I pazienti che raggiungono la gravidanza saranno invitati da un medico a partecipare allo studio. Se i potenziali soggetti accettano di partecipare, incontreranno un co-ricercatore per passare attraverso il processo di consenso informato.

I soggetti saranno sottoposti a una raccolta una tantum non invasiva di cellule del trofoblasto (recupero del trofoblasto e isolamento dalla cervice, TRIC) a circa 5-6 settimane di gravidanza come procedura sperimentale per lo studio. Il TRIC viene eseguito con i kit ThinPrep utilizzando un cytobrush, lo stesso metodo di raccolta del Pap test che è una parte di routine delle cure prenatali. Le cellule del trofoblasto fetale saranno quindi isolate mediante isolamento immunomagnetico. Una volta isolato, verranno utilizzati metodi di frammentazione del DNA, ibridazione fluorescente in situ (FISH) e PCR a cellula singola per analizzare il genoma fetale a risoluzione di singolo nucleotide. Eventuali risultati anomali identificati dal TRIC saranno comunicati ai soggetti dal loro medico in ufficio che li consiglierà sul potenziale significato dei risultati e raccomanderà test di follow-up da ordinare al loro ostetrico per confermare i risultati.

L'analisi cellulare del TRIC sarà quindi confrontata con i risultati ottenuti da villocentesi, amniocentesi, screening genetico preimpianto (PGS) e/o diagnosi genetica preimpianto (PGD) dell'embrione o degli embrioni trasferiti o test citogenetici del tessuto fetale in caso di aborto spontaneo o interruzione della gravidanza per la convalida. Nel caso in cui un paziente non si sottoponga a nessuno dei suddetti test, i risultati del TRIC verranno confrontati con gli esiti della nascita.

I soggetti saranno seguiti tramite cartelle cliniche attraverso l'esito finale della gravidanza, sia che si tratti di interruzione della gravidanza, aborto spontaneo o parto vivo. Se la gravidanza risulta in interruzione della gravidanza o aborto spontaneo, il test citogenetico del feto sarà completato come cura standard con i risultati confrontati con quelli ottenuti attraverso il test TRIC. Se la gravidanza si traduce in un parto vivo, le informazioni neonatali di base saranno ottenute tramite cartelle cliniche, in particolare se al neonato viene diagnosticata una malattia che può essere identificata attraverso il test del singolo gene (vedi tabella allegata).