Efficacia del gel di curcumina combinato con la terapia parodontale non chirurgica sul livello di procalcitonina salivare nel trattamento dei pazienti con parodontite

Popolazione dello studio Lo studio clinico controllato randomizzato ha incluso cinquantaquattro partecipanti selezionati dal Dipartimento di Medicina Orale e Clinica Ambulatoriale di Parodontologia, Facoltà di Odontoiatria, Università di Mansoura da gennaio 2021 a maggio 2021. Hanno partecipato allo studio trentasei pazienti con parodontite (stadio II grado A) e diciotto volontari sani (gruppo di controllo negativo).

A. Criteri di inclusione per la selezione dei pazienti: I pazienti selezionati includevano:

1. Partecipanti di entrambi i sessi di età compresa tra i trenta ei cinquantacinque anni
2. Partecipanti con parodontite (stadio II grado A con PD di 3-5 mm e CAL di 3-4 mm).

B. I criteri di esclusione includevano:

1. Partecipanti con malattie sistemiche note
2. Partecipanti in gravidanza e in allattamento.
3. Tabacco (fumare/masticare).
4. Storia di terapia antibiotica e parodontale negli ultimi 3 mesi.
5. Partecipanti che non erano conformi alle procedure di igiene orale.

Questo studio è stato condotto seguendo le linee guida che regolano il lavoro di ricerca su soggetti umani della Facoltà di Odontoiatria, Università di Mansoura, e il protocollo di studio è stato rivisto e approvato dal Comitato Etico della Ricerca della Facoltà di Odontoiatria, Università di Mansoura, Egitto. (Numero: A01031120).

Calcolo della dimensione del campione Il calcolo della dimensione del campione si è basato sulla superossido dismutasi (SOD) media dopo il trattamento tra lo studio e il gruppo di controllo recuperato da uno studio precedente (Elavarasu et al., 2016)(33). Utilizzo di G*power versione 3.0.10 per calcolare la dimensione del campione in base alla dimensione dell'effetto di 0,828, test a 2 code, errore α =0,05, potenza d = 90,0% la dimensione totale del campione calcolato era almeno di 18 in ciascun gruppo.

Periodo di pretrattamento I partecipanti sono stati informati sullo scopo dello studio e selezionati per l'ammissibilità. Sono stati inoltre informati del trattamento ricevuto e dei passaggi eseguiti, compreso il trattamento non chirurgico e l'applicazione del gel con i rischi associati, i possibili effetti e altre opzioni di trattamento disponibili. I partecipanti hanno inteso questa spiegazione in termini generali secondo le regole del comitato etico della Facoltà di Odontoiatria, Università di Mansoura. Inoltre, hanno riconosciuto che sarebbero tenuti a partecipare alle visite periodiche di richiamo e che sono legalmente competenti a fornire il consenso informato scritto prima di eseguire qualsiasi procedura richiesta.

Randomizzazione e gruppi di studio I pazienti con gruppi di parodontite sono stati selezionati casualmente nel gruppo II o III utilizzando il metodo del lancio della moneta. Quindi i gruppi di studio sono stati classificati in tre gruppi come segue, un gruppo I (gruppo di controllo negativo): diciotto soggetti con gengiva clinicamente sana sono stati selezionati per partecipare allo studio come gruppo di riferimento, e il gruppo II (gruppo di controllo positivo): diciotto pazienti con parodontite (stadio II grado A) sono stati selezionati e trattati solo con terapia parodontale non chirurgica (SRP) e gruppo III (gruppo di studio): diciotto pazienti con parodontite (stadio II grado A) sono stati selezionati e trattati con SRP seguita da curcumina applicazione del gel (fig.1).

Raccolta di campioni di saliva:

La raccolta del campione di saliva è stata eseguita utilizzando il metodo del tampone. È stato eseguito introducendo un batuffolo di cotone in bocca agli orifizi delle ghiandole salivari maggiori. Ai soggetti è stato chiesto di masticare il batuffolo di cotone per inzupparsi nella saliva. Il tampone imbevuto di saliva è stato rimosso e posto in una provetta sterile (provetta Eppendorf sterile) e centrifugato a 3000 giri al minuto (RPM) per circa 10 minuti e quindi mantenuto congelato a -20°C fino al momento dell'analisi.

Procedimento per la preparazione del gel di curcumina:

Il gel è stato preparato presso il Dipartimento di Farmacologia, Facoltà di Farmacia, Università di Mansoura. Il gel di curcumina al 2% viene preparato con un semplice metodo di dispersione (Tabella 1). Il gel di curcumina preparato è stato testato e valutato per la crescita e l'attività microbica. La crescita microbica è stata verificata incubando il gel di curcumina per 24 ore su una piastra di agar mentre è stata osservata la crescita microbica associata. Se non si rilevava crescita e attività microbica, la preparazione finale del gel di curcumina veniva poi conservata in contenitori di colla di pesce per la conservazione in frigorifero (umidità compresa tra 80-85% e temperatura 2-10°C) fino al momento dell'uso per evitarne la successiva danni (34).

Trattamento parodontale

Procedure SRP:

All'inizio del trattamento, i pazienti con parodontite sono stati trattati con SRP utilizzando sia scaler ultrasonici con punta speciale che curette manuali di Gracey fino a ottenere una superficie liscia del dente/radice. La procedura SRP è stata ripetuta ancora una volta (se necessario) e sono state date istruzioni ai pazienti per mantenere buone misure di igiene orale durante il periodo di trattamento. Le tecniche di spazzolamento e filo interdentale sono state insegnate a tutti i partecipanti utilizzando video educativi per i pazienti e dimostrate su modelli di studio. Durante il trattamento non sono stati prescritti antibiotici o collutori. Tutti i pazienti sono stati richiamati settimanalmente durante il periodo di studio (che è stato condotto per sei settimane) per il rafforzamento delle misure di igiene orale e l'applicazione di gel di curcumina all'interno delle uniche tasche parodontali selezionate del gruppo III, poiché è stato applicato settimanalmente per quattro settimane dopo aver completato l'SRP.

Applicazione del gel di curcumina:

Seguendo le procedure SRP, solo le tasche parodontali selezionate (tasche con diagnosi di grado A di stadio II, PD di 3-5 mm e CAL di 3-4 mm)(8) all'interno del gruppo III sono state consegnate con gel di curcumina al 2% sottogengivale utilizzando un monouso Siringa da 2 ml con ago smusso (piegato di 130° sul gambo). L'applicazione del gel è stata avviata dalla base della tasca per garantire che il gel raggiungesse l'intera profondità della tasca. Ciò è stato ottenuto mediante una siringa di plastica con un ago di metallo flessibile di grosso calibro (simile a quelli utilizzati per l'applicazione del mordenzante acido).

Questa procedura è continuata fino a riempire la tasca. Si è prestata attenzione ad applicare il gel senza traumatizzare o danneggiare i tessuti parodontali. Dopo l'inserimento del gel di curcumina, la regione è stata protetta con un batuffolo di cotone e ai pazienti è stato consigliato di non mangiare o bere per almeno due ore dopo la somministrazione del gel. È stato inoltre consigliato loro di non spazzolare le aree trattate o utilizzare il filo interdentale/strumenti per la pulizia interprossimale per almeno dodici ore dopo l'intervento e di evitare di mangiare cibi duri e abrasivi che potrebbero traumatizzare la gengiva. Il trattamento è stato seguito da richiami settimanali dopo l'applicazione del gel per rafforzare le misurazioni dell'igiene orale e la successiva riapplicazione del gel. Il gel di curcumina è stato applicato settimanalmente per quattro settimane dopo aver completato l'SRP.

Valutazione parodontale Le misurazioni parodontali (indice di placca (PI) (35), indice gengivale (GI) (36), profondità di sondaggio (PD) (37) e livello di attacco clinico (CAL) (38) sono state registrate al basale per tutti i gruppi e nuovamente sei settimane dopo il trattamento parodontale sia per il gruppo II che per il gruppo III utilizzando una sonda parodontale poiché la maggior parte degli esiti degli studi sono stati valutati sulla base di effetti a breve termine (studi con un follow-up di 2 settimane, intervallo di accettabilità ±3 giorni) o a lungo termine effetti a termine (studi con un follow-up di 4 settimane, range di accettabilità ±3 giorni)(39). Le misurazioni sono state effettuate da un singolo esaminatore cieco (SE) che non conosceva l'identità dei gruppi in cui erano inclusi i pazienti.

Affidabilità intra-esaminatore Per ottenere la calibrazione intra-esaminatore, le misurazioni parodontali di 10 pazienti sono state eseguite due volte entro 2 giorni prima della conduzione della sperimentazione clinica randomizzata (RCT). La calibrazione è stata approvata quando le misurazioni di PD e CAL nei due casi erano entro una varianza di 1 mm in oltre il 90% di tutte le misurazioni.

Valutazione di laboratorio del livello di PCT I campioni salivari sono stati raccolti da tutti i partecipanti al basale e ancora una volta dal gruppo II e dal gruppo III dopo sei settimane. I campioni sono stati conservati in provette Eppendorf sterili, centrifugati a 3000 RPM per circa 10 minuti e congelati a -20°C fino al momento dell'analisi mediante test ELISA per valutare la PCT salivare (secondo le istruzioni del produttore).