Skuteczność żelu kurkuminy w połączeniu z niechirurgiczną terapią periodontologiczną na poziom prokalcytoniny w ślinie w leczeniu pacjentów z zapaleniem przyzębia

Populacja badana Randomizowane kontrolowane badanie kliniczne obejmowało pięćdziesięciu czterech uczestników wybranych z Kliniki Medycyny Jamy Ustnej i Przychodni Periodontologicznej Wydziału Stomatologii Uniwersytetu Mansoura w okresie od stycznia 2021 r. do maja 2021 r. W badaniu wzięło udział 36 pacjentów z zapaleniem przyzębia (stopień II stopnia A) oraz 18 zdrowych ochotników (grupa kontrolna ujemna).

A. Kryteria włączenia do selekcji pacjentów: Wybrani pacjenci to:

1. Uczestnicy obojga płci w wieku od trzydziestu do pięćdziesięciu pięciu lat
2. Uczestnicy z zapaleniem przyzębia (stopień II stopnia A z PD 3-5 mm i CAL 3-4 mm).

B. Kryteria wykluczenia obejmowały:

1. Uczestnicy ze znanymi chorobami ogólnoustrojowymi
2. Uczestnicy w ciąży i karmiących piersią.
3. Tytoń (palenie/żucie).
4. Historia antybiotykoterapii i leczenia periodontologicznego w ciągu ostatnich 3 miesięcy.
5. Uczestnicy, którzy nie przestrzegali procedur higieny jamy ustnej.

Badanie to przeprowadzono zgodnie z wytycznymi regulującymi prace badawcze na ludziach na Wydziale Stomatologii Uniwersytetu Mansoura, a protokół badania został zweryfikowany i zatwierdzony przez Komisję ds. Etyki Badań Wydziału Stomatologii Uniwersytetu Mansoura w Egipcie. (Numer: A01031120).

Obliczenie wielkości próby Obliczenie wielkości próby oparto na średniej dysmutazie ponadtlenkowej (SOD) po leczeniu między grupą badaną a grupą kontrolną, uzyskaną z poprzedniego badania (Elavarasu i in., 2016)(33). Wykorzystanie G*power w wersji 3.0.10 do obliczenia wielkości próby na podstawie wielkości efektu 0,828, test dwustronny, błąd α = 0,05, moc d = 90,0% całkowita obliczona wielkość próby wynosiła co najmniej 18 osób w każdej grupie.

Okres przed leczeniem Uczestnicy zostali poinformowani o celu badania i przebadani pod kątem kwalifikowalności. Zostali również poinformowani o otrzymanym leczeniu i podjętych krokach, w tym o leczeniu niechirurgicznym i aplikacji żelu z towarzyszącym ryzykiem, możliwymi skutkami i innymi dostępnymi opcjami leczenia. Uczestnicy rozumieli to wyjaśnienie szeroko, zgodnie z zasadami komisji etycznej Wydziału Stomatologii Uniwersytetu Mansoura. Ponadto potwierdzili, że będą musieli uczestniczyć w okresowych wizytach przypominających i że są prawnie kompetentni do wyrażenia pisemnej świadomej zgody przed podjęciem jakichkolwiek wymaganych kroków.

Randomizacja i grupy badawcze Pacjenci z grupami z zapaleniem przyzębia zostali losowo wybrani do grupy II lub III metodą rzutu monetą. W związku z tym grupy badawcze podzielono na trzy grupy w następujący sposób: grupa I (grupa kontroli negatywnej): osiemnaście osób z klinicznie zdrowymi dziąsłami została wybrana do udziału w badaniu jako grupa referencyjna, grupa II (grupa kontroli pozytywnej): osiemnastu pacjentów z zapaleniem przyzębia (stopień II stopnia A) wybrano i leczono wyłącznie niechirurgiczną terapią przyzębia (SRP) oraz grupę III (grupa badawcza): wybrano osiemnastu pacjentów z zapaleniem przyzębia (stopień II stopnia A) i leczono SRP, a następnie kurkuminą aplikacja żelu (rys.1).

Pobranie próbki śliny:

Pobieranie próbki śliny wykonano metodą wymazową. Polegało to na wprowadzeniu płatka kosmetycznego do jamy ustnej w miejscu ujścia głównych gruczołów ślinowych. Badanych poproszono o przeżucie wacika, aby nasiąknąć śliną. Nasączoną śliną wkładkę usunięto i umieszczono w sterylnej probówce (sterylna probówka Eppendorfa) i wirowano z prędkością 3000 obrotów na minutę (RPM) przez około 10 minut, a następnie trzymano w stanie zamrożenia w temperaturze -20°C do czasu analizy.

Procedury przygotowania żelu kurkuminy:

Żel został przygotowany w Katedrze Farmakologii Wydziału Farmaceutycznego Uniwersytetu Mansoura. 2% żel kurkuminy jest przygotowywany prostą metodą dyspersji (Tabela 1). Przygotowany żel kurkuminy został przetestowany i oceniony pod kątem wzrostu i aktywności drobnoustrojów. Wzrost drobnoustrojów sprawdzono przez inkubację żelu z kurkuminą przez 24 godziny na płytce agarowej, podczas gdy obserwowano związany z tym wzrost drobnoustrojów. W przypadku braku wzrostu i aktywności mikroorganizmów gotowy preparat w postaci żelu z kurkuminy przechowywano w pojemnikach z karuk do przechowywania w lodówce (wilgotność w zakresie 80-85% i temperatura 2-10°C) do czasu użycia, aby uniknąć późniejszego uszkodzenie (34).

Leczenie periodontologiczne

Procedury SRP:

Na początku leczenia pacjentów z zapaleniem przyzębia leczono SRP zarówno specjalnymi skalerami ultradźwiękowymi z końcówką, jak i kiretami manualnymi Gracey, aż do uzyskania gładkiej powierzchni zęba/korzeni. Procedurę SRP powtórzono jeszcze raz (w razie potrzeby) i poinstruowano pacjentów, aby utrzymywali dobre środki higieny jamy ustnej w okresie leczenia. Technik szczotkowania i nitkowania zębów uczono wszystkich uczestników za pomocą filmów edukacyjnych dla pacjentów i demonstrowano je na modelach badawczych. Podczas leczenia nie przepisywano żadnych antybiotyków ani płynów do płukania jamy ustnej. Wszyscy pacjenci byli wzywani co tydzień w okresie badania (który trwał sześć tygodni) w celu wzmocnienia środków higieny jamy ustnej i aplikacji żelu kurkuminy w jedyne wybrane kieszonki przyzębne z grupy III, ponieważ był on nakładany co tydzień przez cztery tygodnie po zakończeniu SRP.

Aplikacja żelu kurkuminy:

Po zabiegach SRP tylko wybrane kieszonki przyzębne (kieszonki z rozpoznaniem II stopnia A, PD 3-5 mm i CAL 3-4 mm)(8) z grupy III zaopatrzono poddziąsłowo 2% żelem kurkuminy za pomocą jednorazowego Strzykawka 2 ml z tępą igłą (zagiętą pod kątem 130° na trzonku). Aplikację żelu rozpoczęto od podstawy kieszonki, aby żel dotarł na całą głębokość kieszonki. Osiągnięto to za pomocą plastikowej strzykawki z giętką metalową igłą o dużej średnicy (podobnej do stosowanej do aplikacji wytrawiacza).

Procedurę tę kontynuowano aż do wypełnienia kieszeni. Zwrócono uwagę, aby nałożyć żel bez urazu lub uszkodzenia tkanek przyzębia. Po wprowadzeniu żelu z kurkuminy okolicę zabezpieczano wacikiem, a pacjentom zalecono, aby nie jedli ani nie pili przez co najmniej dwie godziny po podaniu żelu. Doradzono im również, aby nie szczotkowali leczonych obszarów, nie używali nici dentystycznej/urządzeń do czyszczenia przestrzeni międzyzębowych przez co najmniej 12 godzin po zabiegu oraz unikali jedzenia twardych i szorstkich pokarmów, które mogłyby uszkodzić dziąsła. Po leczeniu następowały cotygodniowe wizyty kontrolne po zastosowaniu żelu w celu wzmocnienia pomiarów higieny jamy ustnej i późniejszej ponownej aplikacji żelu. Żel z kurkuminy stosowano co tydzień przez cztery tygodnie po zakończeniu SRP.

Ocena stanu przyzębia Pomiary przyzębia (wskaźnik płytki nazębnej (PI) (35), wskaźnik dziąseł (GI) (36), głębokość sondowania (PD) (37) i kliniczny poziom przyczepu (CAL) (38) rejestrowano na początku badania dla wszystkich grup i ponownie sześć tygodni po leczeniu periodontologicznym zarówno dla grupy II, jak i grupy III przy użyciu sondy periodontologicznej, ponieważ większość wyników badań oceniano na podstawie efektów krótkoterminowych (badania z 2-tygodniową obserwacją, zakres akceptowalności ±3 dni) lub długoterminowych efekty terminowe (badania z 4-tygodniową obserwacją, zakres akceptowalności ±3 dni)(39). Pomiarów dokonywał zaślepiony pojedynczy egzaminator (SE), który nie znał tożsamości grup, do których zostali włączeni pacjenci.

Wiarygodność wewnątrz-badacza Aby uzyskać kalibrację wewnątrz-egzaminacyjną, pomiary periodontologiczne 10 pacjentów przeprowadzono dwukrotnie w ciągu 2 dni przed przeprowadzeniem randomizowanego badania klinicznego (RCT). Kalibracja została zatwierdzona, gdy pomiary PD i CAL w obu przypadkach mieściły się w granicach 1 mm w ponad 90% wszystkich pomiarów.

Laboratoryjna ocena poziomu PCT Próbki śliny pobrano od wszystkich uczestników na początku badania i ponownie po sześciu tygodniach zarówno od grupy II, jak i grupy III. Próbki przechowywano w sterylnych probówkach Eppendorfa, wirowano z prędkością 3000 RPM przez około 10 minut i zamrażano w temperaturze -20°C do czasu analizy testem ELISA w celu oceny PCT w ślinie (zgodnie z zaleceniami producenta).