Il Ruolo del Lavaggio Follicolare al Prelievo degli Oociti (FOFLOR)

La fecondazione in vitro (FIV) è il metodo più comunemente applicato di riproduzione medicalmente assistita e riguarda la fecondazione dell'ovocita da parte dello spermatozoo in un ambiente di laboratorio. Il processo include le seguenti fasi: stimolazione ovarica, prelievo degli ovociti, fecondazione e coltura in laboratorio e, infine, trasferimento dell'embrione.

Il raggiungimento della gravidanza e della nascita di un bambino vivo dipende da diversi fattori. Il più importante è l'età della donna, poiché l'età riproduttiva femminile avanzata riduce la riserva ovarica e aumenta le anomalie cromosomiche degli ovociti rimanenti. L'altro fattore importante è il numero di ovociti recuperati.

Il lavaggio follicolare mira ad aumentare il numero di ovociti maturi recuperati durante il prelievo degli ovociti. La presente tesi indaga il ruolo del lavaggio follicolare durante il prelievo degli ovociti.

Lo studio randomizzato sarà condotto su donne sottoposte a stimolazione ovarica con ormone follicolo-stimolante ricombinante (recFSH) e soppressione dell'aumento prematuro dell'ormone luteinizzante (LH) utilizzando un antagonista dell'ormone di rilascio delle gonadotropine (GnRH) o la stimolazione ovarica con progestinici (PPOS). L'induzione della maturazione finale dell'ovocita sarà effettuata con gonadotropina corionica umana ricombinante (rec hCG) o un agonista del GnRH.

Le donne con almeno un follicolo di diametro medio di 11 millimetri o più in ciascun ovaio saranno idonee a partecipare agli studi.

Il giorno del prelievo degli ovociti, un ovaio sarà randomizzato a subire il lavaggio follicolare utilizzando un ago a lume singolo e l'altro a semplice aspirazione, utilizzando lo stesso ago. Tutti gli ovociti fecondati da entrambe le ovaie saranno coltivati, separatamente, fino allo stadio di blastocisti.

Gli outcome sono il numero di ovociti e di ovociti maturi recuperati durante il prelievo degli ovociti, il tasso di recupero degli ovociti, il tasso di recupero degli ovociti maturi, il tasso di maturazione, il numero di ovociti fecondati, il tasso di fecondazione, il numero di blastocisti e il tasso di blastulazione.

Questo studio richiede 75 pazienti (25 per categoria di risposta: scarsa, normale, alta rispondente) per valutare rigorosamente se il lavaggio follicolare con aghi a lume singolo produce miglioramenti clinicamente significativi nella resa di ovociti. Abbiamo impiegato più ipotesi conservative per garantire una potenza adeguata anche in scenari pessimistici.

La dimensione del campione è stata calcolata per un'ANOVA a disegno misto che testa l'interazione Risposta × Tecnica. Il nostro studio pilota pubblicato (Lainas et al., HR, 2023, N=105) utilizzando aghi a doppio lume ha dimostrato grandi effetti, ma assumiamo conservativamente che gli aghi a lume singolo mostreranno solo il 50-70% di questi effetti. Abbiamo inoltre assunto: (1) correlazioni intra-ovaio di ρ=0,35 (inferiore ai 0,44-0,59 del pilota), (2) deviazioni standard del 20% superiori ai dati pilota e (3) un requisito di potenza del 90% (rispetto al standard 80%).

Sotto queste ipotesi ultra-conservative (50% degli effetti pilota), n=25 per gruppo fornisce una potenza dell'82%. Per scenari più realistici (70-80% degli effetti pilota), la potenza supera il 90-98%. Questa dimensione del campione prevede un'attrito del 5% (iscrizione target N=79), che è appropriato per disegni intra-ovaio dove l'abbandono è minimo. L'approccio conservativo garantisce che lo studio possa rilevare differenze cliniche significative soddisfacendo al contempo rigorosi standard di revisione tra pari e proteggendo da ipotesi ottimistiche sulla transizione delle attrezzature.