하악 제3대구치의 수술적 제거 후 고급 혈소판이 풍부한 섬유소와 법랑질 기질 유도체가 임상 및 분자 상처 치유 변수에 미치는 영향

매복된 하악 사랑니의 수술적 제거는 종종 수술 후 통증, 부기, 개구의 발생과 관련이 있으며 때로는 치조 골염, 지연된 감염 및 두 번째 대구치의 원위 표면에 치주낭 형성과 같은 합병증의 발생과 관련이 있습니다. 수술 후 불편함과 합병증을 줄이기 위해 비스테로이드성 항염증제와 항생제가 일상적으로 처방되고 있습니다.

수술 후 통증, 부종, 개구증 및 합병증을 최소화하기 위해 추출된 폐포에 자가 조직 물질과 시중에서 판매되는 제품을 배치하는 것은 문헌에서 논의되는 치료 옵션입니다.

PRF(혈소판 풍부 섬유소)는 혈소판, 백혈구, 성장 인자 및 사이토카인이 풍부한 환자의 정맥혈에서 추출된 자가 섬유소입니다. APRF(Advanced PRF)는 다른 유형의 PRF 혈전에 비해 더 낮은 원심분리 속도와 더 작은 상대 원심력에 의해 더 오랜 기간 동안 생성되는 PRF의 변형입니다. APRF에는 백혈구, 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인터루킨-1β(IL1β) 및 인터루킨-6(IL6)이 포함되어 있습니다.

매복된 하악 사랑니를 수술적으로 제거한 후 발치 치조에 APRF를 국소적으로 적용하면 수술 후 통증 감소, 연조직 치유 개선, 치조 골염 발생률 감소 및 감염 지연과 같은 긍정적인 효과가 나타났습니다.

시험관 내 연구에 따르면 PRF에는 상당한 양의 VEGF, TGF-β, IL1β, IL6이 포함되어 있는 것으로 나타났습니다. 시험관내 연구에서는 또한 PRF가 M1 염증성 대식세포의 M2 항염증성 대식세포의 중합을 유도한다는 사실을 보여주었습니다. M2 대식세포는 염증 과정과 상처 치유의 분해 단계에 중요한 특수 분해 촉진 지질 매개체를 생성합니다. 전문화된 분해 전 지질 매개체인 Maresin 1(MaR1)은 더 빠른 연조직과 뼈 치유를 유도하는 데 중요한 역할을 보여왔으므로 이 매개체의 존재는 수술 후 상처 치유 과정을 나타내는 것과 관련이 있을 수 있습니다. 임상 및 시험관 연구의 데이터를 고려하여, APRF를 추출에 배치한 후 영향을 받은 하악 사랑니 수준의 VEGF, TGF-β, IL1β, IL6 및 MaR1의 외과적 제거와 같은 임상 모델을 결정하는 것이 유익할 것입니다. 매복된 하악 사랑니의 표준 수술적 제거와 그 수준을 수술 후 경과의 임상적 매개변수와 비교합니다.

에나멜 기질 유도체(EMD)에는 6개월 된 새끼 돼지에서 추출한 에나멜 기질 단백질인 아멜로게닌이 포함되어 있습니다. Hertwig 상피 뿌리초의 세포는 백악질 형성 전에 주로 치근 표면에 아멜로게닌을 방출하며, 이러한 단백질은 치아 형성 중 시멘트 생성의 개시 인자입니다. 시험관 내 연구에서는 EMD에 노출된 치주 인대 세포가 TGF-β 및 IL6을 생성하는 것으로 나타났습니다. 유사한 연구에서는 치주 인대 세포를 EMD에 노출시킨 후 IL1β의 발현이 유의하게 낮아졌다는 것을 보여주었습니다. 임상 및 시험관 내 연구에 따르면 EMD는 인간 미세혈관 내피 세포가 VEGF를 생성하도록 유도하여 혈관 신생을 자극하는 것으로 나타났습니다. 치주 결함에 대한 EMD의 긍정적인 영향은 많은 임상 연구에서 나타났습니다.

임상 및 시험관 연구와 관련하여, EMD를 배치한 후 상당한 수준의 VEGF, TGF-β, IL1β, IL6은 매복 사랑니의 외과적 제거에 대한 임상 모델에서 더 나은 상처 치유, 제2대구치의 치주 매개변수 및 더 적은 수술 후 불편함 및 합병증을 나타낼 수 있습니다. . 문헌에는 Mar1 생산에 대한 EMD의 잠재적 영향에 대한 정보가 없습니다.

연구의 주요 목표는 IL6, IL1β, Mar1, VEGF 수준을 결정하고 비교하여 APRF 또는 EMD가 배치된 그룹과 영향을 받은 하악 사랑니의 표준 수술 제거 간의 국소 염증 반응 및 연조직 치유를 평가하고 비교하는 것입니다. 및 TGF-β. 또한 일차 목표는 수술 후 통증, 부종, 개구 및 연조직 치유 수준을 평가하고 비교하는 것입니다. 이차 목표는 치조골염의 발생률, 감염 지연, 하부 제2대구치 원위 표면의 치주낭 발달을 평가하고 그룹 간 분석을 통해 임상적 변수와 분자적 변수 사이의 상관관계가 존재하는지 알아내는 것입니다.

세르비아 베오그라드 대학교 치과의과대학 구강외과 및 기초 과학 실험실에서 전향적, 무작위, 대조, 이중 입 분할 연구가 수행될 예정입니다. 연구는 헬싱키 선언에 따라 CONSORT 지침에 따라 수행됩니다. 포함 기준을 충족한 후 참가자는 연구 목표, 프로토콜은 물론 연구의 가능한 위험과 이점에 대한 구두 및 서면 정보를 받게 됩니다. 제공된 정보에 동의하고 사전 동의서에 서명한 적격 대상자만 연구에 등록됩니다. 양측에 매복된 하악 사랑니를 가진 총 60명의 환자(120회 수술)가 포함됩니다. 1:1 할당 비율(블록 크기 4)을 사용한 컴퓨터 생성 차단 무작위화는 연구에 포함되지 않은 연구원이 수행합니다(Microsoft Excel, 버전 2016). 할당을 숨기기 위해 할당된 그룹(1-APRF 그룹, 2-EMD 그룹)의 코드가 포함된 서류는 불투명 봉투에 넣어 밀봉됩니다. 개입 1시간 전에 동일한 독립 연구원이 다음 봉투를 개봉합니다. 실험군(APRF 또는 EMD)을 찾은 후 독립 연구자는 동전을 던져 턱의 측면을 대조군 또는 실험군에 할당합니다.

APRF 그룹에서는 수술 15분 전 독립적인 연구자가 환자에게 정맥절개를 시행할 것임을 알리고 정맥절개 전문의에게 정맥절개를 시행하도록 지시합니다. 수석 조사관은 데이터 분석을 마칠 때까지 할당을 알지 못합니다. 외과의사는 개입의 성격에 따른 할당을 알고 있을 것입니다.

연구 등록 기준은 하악 제2대구치의 원위 표면과 접촉하고 있는 하악 사랑니가 양측으로 매복된 전신적으로 건강한 환자입니다.

등록 기준을 충족한 환자로부터 연령(세), 성별 및 흡연 상태(비흡연, 일일 10회 이하 또는 일일 10회 초과)를 확보합니다. 동일한 예약(첫 번째 연구 예약)에서 두 수술 중재는 최소 3주 간격을 두고 예약됩니다. Pell, Gregory 및 Winter 분류에 따라 파노라마 방사선 사진을 통해 세 번째 대구치 위치를 추정합니다. 초기 검사, 수술 전후, 수술 중 및 후속 측정은 한 명의 맹검 임상의가 수행합니다.

하악 제2대구치 원위 표면의 치은 열구액 샘플링, 최대 절치의 기준선 측정 및 이주-구강 교합 거리, 발치 측 하악의 외안구-각 및 하악 제2대구치의 치주 측정 수술 직전, 두 번째 연구 예약 시 수행됩니다. 치주 차트 작성은 협측 3개 지점과 내측 원위, 언어 원위, 내측 설측 3개 지점에서 수행됩니다.

1:100000 에피네프린(Septanest ®, Septodont, Saint-Maur-des-Fosses, France)과 4% 염산 염산 4%로 구성된 국소 마취액을 사용하여 국소 하치조, 설측 및 협측 신경을 차단한 후, 영향을 받은 부위를 외과적으로 제거합니다. 하악 제3대구치는 이전에 문헌에 설명된 기술에 따라 수행됩니다. 전체 두께 플랩 거상 후 멸균 식염수 세척 하에서 회전 기구를 사용하여 뼈 제거를 수행합니다. 치아 추출에는 엘리베이터와 펜치가 사용되며 필요한 경우 치아 분리가 수행됩니다. 치아 추출 및 뼈 가장자리 다듬기 후 APRF 그룹에서는 2개의 APRF 혈전이 치조에 배치되고 EMD 그룹에서는 두 번째 대구치의 원위 치근 표면이 24% EDTA(( PrefGel®, Straumann)로 2회 치료됩니다. 몇 분 후 세척하고 EMD(Emdogain®, Straumann)를 콜라겐 스폰지(Collacone®, Botiss)와 함께 배치합니다. 상처는 4-0 폴리프로필렌 봉합사 재료로 봉합되며, 후속 조치 시 상처에 종이 점을 배치하여 상처 삼출물 샘플링을 허용하기 위해 5mm 거리의 ​​후구치 영역에 처음 두 개의 연속 봉합사를 배치하도록 특별히 주의됩니다.

치아 추출 및 뼈 가장자리 다듬기 후 대조군에서는 앞서 언급한 것과 동일한 메모를 사용하여 1차 봉합사를 즉시 배치합니다.

모든 수술은 숙련된 구강외과 전문의에 의해 집도됩니다. 수술 중 시술 기간(분), 국소마취제 사용량(ml), 치아 분리 여부, 수술 중 합병증 등을 기록합니다.

환자에게 파라세타몰 500mg 정제((파라세타몰®, 갈레니카, 베오그라드, 세르비아)를 집에 가져갈 수 있도록 제공하고 진통제 등록 필드(매 섭취 시간, 복용한 알약 수 및 복용량)가 포함된 사전 설계된 테이크 홈 쿼리를 제공합니다. . 또한 환자에게는 시각적 아날로그 척도(VAS) 및 언어 평가 통증 척도(VRS)에 통증 강도를 기록하도록 지시합니다.

세 번째 연구 약속(수술 후 24시간)에서 최대 절치 및 이주-구강 교합 거리, 발치 측면에서 하악의 외부 눈구치 각도를 측정합니다. 환자는 또한 예약 시 VAS 및 VRS에 대한 통증 강도를 평가하도록 요청받게 됩니다.

네 번째 연구 방문(수술 후 48시간)에서 최대 절치 간 측정 및 거리 이주-구강 교합, 추출 측면에서 하악의 외부 눈구치 각도가 측정됩니다. 이번 방문에서는 상처 삼출물 샘플링도 수행되며 환자에게 VAS 및 VRS에 대한 통증 수준을 다시 한 번 평가하도록 요청됩니다.

다섯 번째 연구 방문(수술 후 7일)에서 최대 절치 간 측정 및 이주-구강 교합 거리, 하악 외안각-각도를 측정합니다. 또한 봉합사 제거 전에 상처 삼출물 샘플링을 수행합니다. 이번 방문에서 환자는 일주일 동안 충족했던 이전 질문을 다시 가져올 것입니다.

여섯 번째 연구 방문은 수술 후 3개월에 이루어지며 치주 차트 작성이 수행됩니다.

샘플은 30초 동안 상처에 놓인 종이 포인트(크기 #30, 28mm 길이의 ISO 표준화 포인트, 2% 테이퍼)로 채취됩니다. 샘플링 중에 종이 포인트의 타액 오염을 방지하기 위한 조치가 취해질 것입니다. 그런 다음 종이 포인트를 RNA를 방지하는 액체로 미리 채워진 멸균 플라스틱 튜브에 넣습니다.

다양한 관심 시점에서 테스트 그룹의 염증성(IL6, IL1β, MAR1) 및 초기 상처 치유 매개체(VEGF, TGF-β) 매개체의 단백질 발현뿐만 아니라 관련 유전자의 수준을 평가하기 위한 목적으로 실험실 절차가 수행됩니다. RNA를 분리하고 상보적 DNA를 얻은 후(제조업체의 지침에 따라) IL6, IL1β,VEGF 및 TGF-β의 상대적 유전자 발현을 실시간 중합효소 연쇄 반응 분석을 통해 평가합니다. MAR1의 단백질 발현은 효소 결합 면역흡착 분석(ELISA)에 의해 수행됩니다.

통계 분석은 통계 패키지 SPSS 버전 22.0(SPSS, Inc.)에서 수행됩니다. 시카고). 데이터는 평균, 표준편차, 중앙값, 최대값 및 최소값, 백분율을 통해 표시됩니다. 데이터 분포에 따라 적절한 매개변수 또는 비모수적 테스트가 수행됩니다. 회귀 모델은 감지된 그룹 간 차이의 예측 변수를 결정하기 위해 수행됩니다. 유의수준은 0.05로 설정하겠습니다.