Complementaire diagnose van acute appendicitis (CDAA)

De voorgestelde studie is een pilootstudie op een cohort van deelnemers gerekruteerd bij een spoedopname met acute pijn in de rechter iliacale fossa (pijn in de onderbuik rechts) op de afdeling Accident & Emergency van het Royal Devon & Exeter Hospital. De pilootproef zal één urinemonster verzamelen bij opname en bloed gedurende een tijdsverloop voor elke patiënt om bloedplasmaspiegels van complement-eiwitten te registreren tijdens ziekenhuisopnames met verdenking op appendicitis. Het assayschema wordt gedetailleerd weergegeven in tabel 1 hieronder. De proef zal aanvullende complementcascade-activeringstests uitvoeren op routinematige bloedmonsters die worden genomen tijdens het verblijf van de patiënt in het ziekenhuis. Daarnaast zullen er 3 proefmonsters worden genomen met tijdsintervallen die de vroege complementcascaderespons zullen vastleggen. Bij patiënten die geopereerd worden, worden in totaal 5 extra proefmonsters genomen, waarvan 2 intra-operatief terwijl ze onder narcose zijn. Op basis van onze eerdere ervaring in een soortgelijke pilotstudie CPOP (Complement cascade Predictors of Procedural Outcome), hebben de onderzoekers een 'avondklokvenster' voor bloedafname geïntroduceerd waarin proefmonsters nr. 2 en 3 niet mogen plaatsvinden tussen middernacht en 06.00 uur. uur Dit om rekening te houden met de wensen van patiënten en om de naleving van het onderzoek te verbeteren. Monsteranalyse zal parallel worden uitgevoerd in het klinisch chemisch laboratorium voor assays van CRP en de complementeiwitten C3 en C4. De aanvullende proeftesten zullen worden uitgevoerd door de postdoctorale assistent van prof. Shaw in het laboratorium voor klinische chemie en in de medische faculteit. Een vers ingevroren urinemonster zal worden verkregen uit het routinematige urinemonster dat wordt gegeven bij alle opnames voor RIF-pijn. Dit urinemonster wordt geanalyseerd op complementactiveringsproducten zoals C3a en C5a. Diagnostische eindpunten zullen worden verkregen via het routinematige beheer van deze patiënten en zijn toegankelijk via het rapportagesysteem voor ziekenhuisbeeldvorming (PACS) en pathologie (IHCS). Deze omvatten histologie en microbiologie van de appendix, urineonderzoek, bloedkweken, beeldvorming en uitstrijkjes van de baarmoederhals.

Tabel 1Assayschema bloedmonster Tijdstip Testtijd Routinetest Aanvullende proeftest Proefassays Dagtijden (voorbeeld) PM-tijden (voorbeeld)

1. t = 0 Opname op de SEH

   TOESTEMMINGSROUTINE:

   WCC, CRP, LFT's, Amylase, Stolling. Urineonderzoek.

   Over de discretie van de behandelende arts:

   urinekweek, bloedkweken, uitstrijkjes, beeldvorming: US, CT, mri. Serum: C3, C4, C3dg, compliment-activeringsmarkers

   Urine: complementeer activeringsmarkers, bijvoorbeeld: C3a, C5a. 09:00 uur 18:00 uur

2. t = 1-4 uur TOESTEMMING(indien niet eerder verkregen) 09:00 tot 13:00 uur 1800 tot 22:00 uur
3. t = 4 uur Proefmonster NR.1 C3, C4, C3dg,compliment activeringsmarkers 13:00 uur 22:00 uur

4. t =8u Proefmonster NR.2 C3, C4, C3dg, aanvulling activeringsmarkers 17:00 uur 02:00 uur

   Geen actie: 'bloedafname avondklok'

5. t = 12 uur Proefmonster NR. 3 C3, C4, C3dg, compliment activeringsmarkers 21:00 uur 06:00 uur

   Geen actie: 'bloedafname avondklok'

6. t = 23 u ROUTINE C3, C4, C3dg, complimentactiveringsmarkeringen 08:00 uur t = 14 u 08:00 uur
7. t = 47 uur ROUTINE C3, C4, C3dg, compliment activatie markeringen 08:00 uur t = 38 uur 08:00 uur

8. t = 71 uur

   Sommige patiënten ontslagen

   Sommige patiënten voor laparoscopie ROUTINE C3, C4, C3dg, complimenteren activeringsmarkers 08:00 uur t = 62 uur 08:00 uur

9. Indien voor een operatie:

   t = surg0

   Op inductie Proefmonster NR. 4 C3, C4, C3dg, compliment activeringsmarkers, CRP 09:00 uur t = surg 0 21:00 uur

10. t = piek 45 min

    Einde operatie Pathologie: appendixspecimen Microbiologie: appendix-uitstrijkjes Proefmonster NR. 5 C3, C4, C3dg, compliment activeringsmarkers, CRP 09:45 uur t = surg 60 min 22: 00 uur

11. t = x d, y h (dagen, uren vanaf t0) Routinetesten zodra ze plaatsvinden C3, C4, C3dg, complimentactiveringsmarkers, CRP
12. Afvoer

Indien binnen 14 dagen opnieuw opgenomen

tR=x d, y h(dagen, uren vanaf t0) ROUTINE C3, C4, C3dg, compliment activeringsmarkers, CRP

De assays die worden ingezet voor de CDAA-pilootstudie omvatten de huidige biomarkers van Complement-consumptie, C3 en C4, beschikbaar in het laboratorium voor klinische chemie; daarnaast zullen de onderzoekers een panel van activeringsmarkers gebruiken, waaronder C3dg, C4d, Bb en TCC die zijn ontwikkeld tijdens de CPOP klinische studie. De groep van prof. Shaw heeft inmiddels uitgebreide ervaring met de ontwikkeling, optimalisatie en interne auditing van de activeringstesten. De assay voor de proef zal worden uitgevoerd in het laboratorium van prof. Shaw, parallel aan het laboratorium voor klinische chemie, dat verantwoordelijk zal zijn voor het produceren van aliquots uit het plasma.