Wartość testu stymulacyjnego Cortrosyn 25 mcg (25CST)

Badanie obejmowało dwie grupy dorosłych pacjentów w wieku od 18 do 65 lat. Pierwsza grupa (G1, n=10) obejmowała pacjentów z chorobą podwzgórza/przysadki z co najmniej jednym niedoborem osi przysadki innym niż niedobór ACTH. U pacjentów rozpoznano: akromegalię (n=1), prolactinoma (n=2), niewydzielające makrogruczolaki przysadki (n=3), ziarniniak cholesterolowy przysadki (1), niescharakteryzowane uszkodzenie szypułki przysadki (1), nawracające komórki zerowe gruczolak(1) i czaszkogardlak (n=1). Druga grupa (G2, n=12) składała się ze zdrowych ochotników. Trzy CST i ITT przeprowadzono w losowej kolejności i oddzielono od siebie medianą 22 dni (zakres 2–64 dni). Poziomy kortyzolu mierzono po 30 i 60 minutach (min) podczas CST. Szczytowy punkt odcięcia kortyzolu wynoszący 18 μg/dl został użyty jako kryterium zaliczenia podczas ITT. Wynik całkowitych poziomów kortyzolu podczas ITT wykorzystano do określenia wartości odcięcia wolnego kortyzolu podczas CST i ITT. Żaden z pacjentów nie miał operacji przysadki mózgowej w ciągu sześciu tygodni przed włączeniem do badania i żadna z kobiet nie była na estrogenie.

Pacjenci w G1 musieli być na co najmniej 3-miesięcznej stabilnej hormonalnej terapii zastępczej z powodu niedoborów hormonalnych. Wszystkie osoby kontrolne (G2) miały prawidłowy poziom TSH, wolnej T4 i prolaktyny. Wszystkie kobiety przed menopauzą w grupie kontrolnej miały w przeszłości regularne, odpowiednie do wieku miesiączki i żadna nie przyjmowała tabletek antykoncepcyjnych w ciągu 3 miesięcy od rozpoczęcia badania. Osoby po menopauzie miały odpowiednio podwyższone stężenie FSH. Wszyscy mężczyźni w grupie kontrolnej mieli normalne poziomy FSH i całkowitego testosteronu.

Kryteria wykluczenia obejmowały: niezdolność pacjenta do wyrażenia świadomej zgody, ciążę, pacjentów z cukrzycą typu 1 i typu 2, jakikolwiek uraz przysadki, taki jak operacja przysadki w ciągu ostatnich 6 tygodni, podwyższona aktywność aminotransferazy alaninowej (ALT) lub aminotransferazy asparaginianowej (AST) powyżej 3-krotności górnej granicy normy, niewydolność nerek (zdefiniowana jako stężenie kreatyniny w surowicy powyżej 2 mg/dl), nowotwór złośliwy w wywiadzie w ciągu ostatnich 5 lat, ciężka ostra choroba i pacjenci przyjmujący opioidy (fentanyl, oksykodon, hydrokodon, acetaminofen/ leczenie hydrokodonem). Ponadto z badania wykluczono pacjentów z chorobą wieńcową, chorobą naczyniowo-mózgową, zastoinową niewydolnością serca, zaburzeniami rytmu serca lub napadami drgawkowymi w wywiadzie ze względu na potencjalne ryzyko podczas ITT.

Procedury badawcze: Pacjenci z zaburzeniami osi HPA oraz osoby kontrolne zainteresowane badaniem kontaktowały się z zespołem badawczym w celu przeprowadzenia wywiadu przesiewowego. Dla każdego uczestnika badania uzyskano pełną historię medyczną. W przypadku kobiet biorących udział w badaniu pobrano historię reprodukcji. Wszystkie kobiety w wieku rozrodczym miały ujemny wynik testu ciążowego z moczu.

Wszyscy uczestnicy badania zostali poinstruowani, aby pościli przez noc przez 12 godzin przed badaniem. Sześciu pacjentów było na zastępczej glikokortykoidzie i poinstruowano ich, aby wstrzymali przyjmowanie leku przez 24 godziny przed testem dynamicznym. Wszystkie testy przeprowadzono w Clinical Research Unit na miejscu w Cleveland Clinic. Badanie zostało zatwierdzone przez Cleveland Clinic Institutional Review Board. Wszyscy badani podpisali świadomą zgodę.

Testy stymulacji kosyntropiną: fiolkę zawierającą 250 µg kosyntropiny rozpuszczono w 1 ml 0,9% soli fizjologicznej i użyto tego samego dnia. 25 µg kosyntropiny przygotowano przez rekonstytucję fiolki 250 µg 1 ml 0,9% soli fizjologicznej i pobranie 0,1 ml do każdego wstrzyknięcia. Niewykorzystane fiolki po rekonstytucji kosyntropiny wyrzucano pod koniec dnia. 1 ug kosyntropiny przygotowano przez rozcieńczenie 250 ug w 250 ml 0,9% soli fizjologicznej i pobranie 1 ml do wstrzyknięcia dożylnego. Odtworzony roztwór dla dawki 1 µg przechowywano w lodówce i używano przez okres do miesiąca. Podczas CST oznaczano poziomy sFC i TC na linii podstawowej (t=0 min), a następnie w 30 i 60 minucie po podaniu 1 µg (IV), 25 µg (IM) i 250 µg (IM) dawek kosyntropiny.

ITT: Test rozpoczęto między 08:00 a 09:00, po całonocnym poście. Zwykłą ludzką insulinę 0,10 - 0,15 jednostek/kg podawano dożylnie, przy docelowym stężeniu glukozy we krwi poniżej 40 mg/dl. W razie potrzeby podawano dodatkowy bolus insuliny, aby osiągnąć docelową wartość glukozy. Podawanie doustne lub dożylne dekstrozy było dozwolone, jeśli u pacjenta wystąpiły objawy objawowej hipoglikemii. Poziomy glukozy we krwi sprawdzono w 0, 15, 30, 45, 60, 90 i 120 minucie, a sFc i TC pobrano w 0, 30, 45, 60, 90 i 120 minucie.

Testy: Laboratoria przesiewowe dla osób kontrolnych TSH, wolnej T4, prolaktyny i pełnego profilu metabolicznego oraz przyłóżkowe testy glukozy we krwi przeprowadzono w laboratorium Cleveland Clinic. Laboratoria przesiewowe pod kątem FSH, testosteronu oraz próbek TC i sFC zostały przeanalizowane w Quest Diagnostics Nichols Institute, San Juan Capistrano, CA 92675, USA.

TC mierzono za pomocą chromatografii cieczowej ze spektrometrią mas (LCMS). Współczynnik zmienności wewnątrz testu (CV) wynosił 3,0-4,6% odpowiednio 15,9 i 202,7 µg/dl. CV między testami wynosiło odpowiednio 4,8 i 7,6% przy 15,2 i 189,9 µg/dl. sFC mierzono za pomocą LCMS po oddzieleniu związanego i niezwiązanego kortyzolu za pomocą dializy równowagowej. CV wewnątrz testu wynosiły odpowiednio 7,4 i 9,3% przy 0,36 i 2,17 ug/dl. Wartości CV między testami wynosiły odpowiednio 9,4 i 9,8% przy 0,36 i 2,17 µg/dl.

Analiza statystyczna: Grupy pacjentów porównano na podstawie czynników kategorycznych, stosując testy chi-kwadrat Pearsona i dokładne testy Fishera. Pomiary ciągłe oceniano za pomocą testów sumy rang Wilcoxona. Czułość (SE) i specyficzność (SP) dla każdego z CST oszacowano przy użyciu optymalnych punktów odcięcia z krzywych ROC, w odniesieniu do ITT jako złotego standardu. Wskaźnik Youdena, który identyfikuje największą kombinację SE i SP dla każdego testu, został wykorzystany do określenia optymalnego punktu odcięcia dla każdego testu. Testy porównano na SE i SP za pomocą testu McNemara. Współczynnik korelacji Pearsona wykorzystano do pomiaru siły związku szczytowych poziomów kortyzolu między parami metod badawczych. Utworzono dziewięćdziesiąt pięć procent przedziałów ufności dla wszystkich oszacowań korelacji, SE i SP. Porównania korelacji wykonano metodami Menga, Rosenthala i Rubina (1992) w celu porównania korelacji i obliczenia 95% przedziałów ufności dla różnicy między testami [17]. Dolne granice tych przedziałów powyżej wartości zerowej uznano za statystycznie istotny dowód na to, że test 25-µg jest lepszym testem, podczas gdy dolne granice co najmniej tak wysokie jak -0,15 zastosowano do określenia równoważności na tych odpowiednich marginesach. Analizy przeprowadzono przy użyciu oprogramowania R (wersja 3.1; Wiedeń, Austria) oraz oprogramowania SAS (wersja .3; Cary, Karolina Północna).