Wert von 25 mcg Cortrosyn-Stimulationstest (25CST)

Die Studie bestand aus zwei Gruppen erwachsener Patienten im Alter von 18 bis 65 Jahren. Die erste Gruppe (G1, n = 10) umfasste Patienten mit Hypothalamus-/Hypophysenerkrankung mit mindestens einem Mangel an Hypophysenachse außer ACTH-Mangel. Die Patienten hatten die folgenden Diagnosen: Akromegalie (n=1), Prolaktinom (n=2), nicht sezernierende Hypophysenmakroadenome (n=3), Hypophysencholesteringranulom (1), uncharakterisierte Läsion des Hypophysenstiels (1), rezidivierende Nullzellen Adenom(1) und Kraniopharyngeom (n=1). Die zweite Gruppe (G2, n=12) umfasste gesunde Freiwillige. Die drei CSTs und ITT wurden in zufälliger Reihenfolge durchgeführt und durch einen Median von 22 Tagen (Bereich 2–64 Tage) voneinander getrennt. Cortisolspiegel wurden bei 30 und 60 Minuten (min) während CSTs gemessen. Als Kriterium zum Bestehen des ITT wurde ein Cortisol-Spitzenwert von 18 μg/dl verwendet. Das Ergebnis der Gesamtcortisolspiegel während der ITT wurde verwendet, um die Grenzwerte für freies Cortisol während CSTs und ITT zu bestimmen. Bei keiner der Patientinnen wurde innerhalb von sechs Wochen vor der Aufnahme eine Hypophysenoperation durchgeführt, und keine der Frauen nahm Östrogen ein.

Patienten in G1 mussten mindestens 3 Monate lang eine stabile Hormonersatztherapie wegen Hormonmangel erhalten. Alle Kontrollpersonen (G2) hatten normale Werte für TSH, freies T4 und Prolaktin. Alle prämenopausalen Frauen in der Kontrollgruppe hatten eine Vorgeschichte von regelmäßiger, altersgerechter Menstruation und keine nahm innerhalb von 3 Monaten nach Studienbeginn Antibabypillen ein. Postmenopausale Probanden hatten entsprechend erhöhte FSH-Konzentrationen. Alle Männer in der Kontrollgruppe hatten normale FSH- und Gesamttestosteronspiegel.

Zu den Ausschlusskriterien gehörten: Unfähigkeit des Probanden, eine Einverständniserklärung abzugeben, Schwangerschaft, Patienten mit Diabetes mellitus Typ 1 und Typ 2, jede Hypophyseninsuffizienz wie Hypophysenoperation in den letzten 6 Wochen, erhöhte Alanin-Aminotransferase (ALT) oder Aspartat-Aminotransferase (AST) mehr als das 3-fache der Obergrenze des Normalwerts, Nierenversagen (definiert als Serumkreatinin über 2 mg/dl), bösartige Erkrankungen in der Vorgeschichte in den letzten 5 Jahren, schwere akute Erkrankung und Patienten unter Opioidbehandlung (Fentanyl, Oxycodon, Hydrocodon, Paracetamol/ Hydrocodon)-Behandlung. Darüber hinaus wurden Patienten mit einer Vorgeschichte von koronarer Herzkrankheit, zerebrovaskulärer Erkrankung, dekompensierter Herzinsuffizienz, Arrhythmien oder Krampfanfällen aufgrund des potenziellen Risikos während der ITT ausgeschlossen.

Studienablauf: Patienten mit HPA-Achsenstörungen und Kontrollpersonen, die an der Studie interessiert waren, wurden vom Forschungsteam für ein Screening-Interview kontaktiert. Für jeden Studienteilnehmer wurde eine vollständige Krankengeschichte erhoben. Bei weiblichen Teilnehmern wurde eine reproduktive Anamnese erhoben. Alle Frauen in der reproduktiven Altersgruppe hatten einen negativen Urin-Schwangerschaftstest.

Alle Studienteilnehmer wurden angewiesen, vor dem Test 12 Stunden lang über Nacht zu fasten. Sechs Patienten erhielten eine Glucocorticoid-Ersatztherapie und wurden angewiesen, ihre Medikation 24 Stunden lang vor ihrem dynamischen Test auszusetzen. Alle Tests wurden in der Clinical Research Unit vor Ort in der Cleveland Clinic durchgeführt. Die Studie wurde vom Cleveland Clinic Institutional Review Board genehmigt. Alle Probanden unterzeichneten eine Einverständniserklärung.

Cosyntropin-Stimulationstests: Die 250-µg-Cosyntropin-Durchstechflasche wurde mit 1 ml 0,9 %iger Kochsalzlösung rekonstituiert und am selben Tag verwendet. 25 ug Cosyntropin wurden hergestellt, indem das 250-ug-Fläschchen mit 1 ml 0,9%iger Kochsalzlösung rekonstituiert und 0,1 ml für jede Injektion entnommen wurden. Die unbenutzten Durchstechflaschen mit rekonstituiertem Cosyntropin wurden am Ende des Tages entsorgt. 1 ug Cosyntropin wurde durch Verdünnen der 250 ug in 250 ml 0,9%iger Kochsalzlösung und Entnahme von 1 ml zur intravenösen Injektion hergestellt. Die rekonstituierte Lösung für eine Dosis von 1 µg wurde gekühlt aufbewahrt und bis zu einem Monat verwendet. Während der CSTs wurden die sFC- und TC-Spiegel zu Beginn (t = 0 min) und dann bei 30 und 60 min nach 1 µg (IV), 25 µg (IM) und 250 µg (IM) Cosyntropin-Dosen gezogen.

ITT: Der Test wurde zwischen 08:00 und 09:00 Uhr begonnen, nachdem er über Nacht fasten musste. Reguläres Humaninsulin 0,10–0,15 Einheiten/kg wurde intravenös verabreicht, mit einem Ziel-Blutzucker von weniger als 40 mg/dL. Bei Bedarf wurde ein zusätzlicher Insulinbolus verabreicht, um den Zielglukosewert zu erreichen. Die Verabreichung von oraler oder intravenöser Dextrose war erlaubt, wenn das Subjekt Anzeichen einer symptomatischen Hypoglykämie entwickelte. Die Blutzuckerspiegel wurden bei 0, 15, 30, 45, 60, 90 und 120 min überprüft und sFc und TC wurden bei 0, 30, 45, 60, 90 und 120 min gezogen.

Assays: Die Screening-Labore für die Kontrollpersonen TSH, freies T4, Prolaktin und das vollständige Stoffwechselprofil sowie Blutzuckertests am Krankenbett wurden im Labor der Cleveland Clinic durchgeführt. Die Screening-Labors für FSH, Testosteron und Proben von TC und sFC wurden am Quest Diagnostics Nichols Institute, San Juan Capistrano, CA 92675, USA, analysiert.

TC wurde unter Verwendung von Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie (LCMS) gemessen. Der Intra-Assay-Variationskoeffizient (CV) betrug 3,0–4,6 %. bei 15,9 bzw. 202,7 ug/dl. Der Inter-Assay-VK betrug 4,8 bzw. 7,6 % bei 15,2 bzw. 189,9 µg/dl. sFC wurde mittels LCMS gemessen, nachdem gebundenes und ungebundenes Cortisol durch Gleichgewichtsdialyse getrennt wurden. Die Intra-Assay-VK betrugen 7,4 bzw. 9,3 % bei 0,36 bzw. 2,17 µg/dl. Die Inter-Assay-VK betrugen 9,4 und 9,8 % bei 0,36 bzw. 2,17 µg/dl.

Statistische Analyse: Patientengruppen wurden anhand von kategorialen Faktoren mit Pearson-Chi-Quadrat-Tests und exakten Fisher-Tests verglichen. Kontinuierliche Messungen wurden mit Wilcoxon-Rangsummentests bewertet. Sensitivität (SE) und Spezifität (SP) für jeden der CSTs wurden unter Verwendung optimaler Grenzwerte aus ROC-Kurven in Bezug auf ITT als Goldstandard geschätzt. Der Youden's Index, der die größte Kombination von SE und SP für jeden Test identifiziert, wurde verwendet, um den optimalen Grenzwert für jeden Test zu identifizieren. Tests wurden auf SE und SP unter Verwendung des McNemar-Tests verglichen. Der Korrelationskoeffizient von Pearson wurde verwendet, um die Stärke der Assoziation von Cortisol-Spitzenwerten zwischen Paaren von Testmethoden zu messen. Für alle Korrelations-, SE- und SP-Schätzungen wurden 95-Prozent-Konfidenzintervalle erstellt. Vergleiche der Korrelationen wurden unter Verwendung der Methoden von Meng, Rosenthal und Rubin (1992) durchgeführt, um die Korrelationen zu vergleichen und 95-%-Konfidenzintervalle für den Unterschied zwischen den Tests zu berechnen [17]. Untergrenzen dieser Intervalle über einem Nullwert wurden als statistisch signifikanter Beweis dafür angesehen, dass der 25-µg-Test ein besserer Test ist, während Untergrenzen von mindestens -0,15 verwendet wurden, um die Nichtunterlegenheit an diesen jeweiligen Rändern zu bestimmen. Analysen wurden mit R-Software (Version 3.1; Wien, Österreich) und SAS-Software (Version .3; Cary, NC).