Wpływ Apelin na układ sercowo-naczyniowy u zdrowych ochotników

Protokoły badania Grupy po 5 osób zostaną przydzielone do otrzymania jednego z trzech protokołów.

Protokół 1:

Pięciu zdrowych ochotników zostanie zaproszonych do ośrodka badań klinicznych łącznie 4 razy, zgodnie z poniższym protokołem.

Wizyty 1 i 2 będą odbywać się przez dwa kolejne dni. Uczestnicy wezmą udział o godzinie 07:30 i otrzymają lekkie śniadanie. Do żyły przedłokciowej jednego ramienia zostanie wprowadzona dożylna kaniula do pobierania próbek. Próbki krwi (5 ml) zostaną pobrane bezpośrednio przed podskórnym wstrzyknięciem (t=0; 08,00) 1 mg (Pyr1)apeliny-13 oraz w 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 i 600 min po iniekcji. Następnie pacjenci zostaną wypisani z placówki i ponownie zgłoszą się następnego dnia o godzinie 08:00 w celu pobrania pojedynczej próbki żylnej. W tym czasie zostanie pobranych łącznie około 85 ml krwi.

Wizyty 3 i 4 będą również miały miejsce w ciągu dwóch kolejnych dni, co najmniej tydzień po wizycie 2. Badani będą uczestniczyć w 07.30 i otrzymają lekkie śniadanie. Do żyły przedłokciowej jednego ramienia zostanie wprowadzona dożylna kaniula do pobierania próbek. Próbki krwi (5 ml) zostaną pobrane bezpośrednio przed dożylnym wlewem bolusowym (t=0; 08,00) 1 mg (Pyr1)apeliny-13 w ciągu 15 minut oraz w 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 , 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 i 600 min po wstrzyknięciu. Następnie pacjenci zostaną wypisani z placówki i ponownie zgłoszą się następnego dnia o godzinie 08:00 w celu pobrania pojedynczej próbki żylnej.

Protokół 2:

Pięciu zdrowych ochotników zostanie zaproszonych do ośrodka badań klinicznych łącznie 4 razy, zgodnie z poniższym protokołem.

Wizyty 1 i 2 będą odbywać się przez dwa kolejne dni. Uczestnicy wezmą udział o godzinie 07:30 i otrzymają lekkie śniadanie. Do żyły przedłokciowej jednego ramienia zostanie wprowadzona dożylna kaniula do pobierania próbek. Próbki krwi (5 ml) zostaną pobrane bezpośrednio przed podskórnym wstrzyknięciem (t=0; 08,00) 5 mg (Pyr1)apeliny-13 oraz w 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 i 600 min po iniekcji. Następnie pacjenci zostaną wypisani z placówki i ponownie zgłoszą się następnego dnia o godzinie 08:00 w celu pobrania pojedynczej próbki żylnej. W tym czasie zostanie pobranych łącznie około 85 ml krwi.

Wizyty 3 i 4 będą również miały miejsce w ciągu dwóch kolejnych dni, co najmniej tydzień po wizycie 2. Badani będą uczestniczyć w 07.30 i otrzymają lekkie śniadanie. Do żyły przedłokciowej jednego ramienia zostanie wprowadzona dożylna kaniula do pobierania próbek. Próbki krwi (5 ml) zostaną pobrane bezpośrednio przed dożylnym wlewem bolusowym (t=0; 08,00) 5 mg (Pyr1)apeliny-13 w ciągu 15 minut oraz w 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 , 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 i 600 min po wstrzyknięciu. Następnie pacjenci zostaną wypisani z placówki i ponownie zgłoszą się następnego dnia o godzinie 08:00 w celu pobrania pojedynczej próbki żylnej.

Protokół 3:

Pięciu zdrowych ochotników zostanie zaproszonych do ośrodka badań klinicznych przez 2 kolejne dni. Uczestnicy wezmą udział w zajęciach o godzinie 07:30 i otrzymają lekkie śniadanie. Do żyły przedłokciowej jednego ramienia zostanie wprowadzona dożylna kaniula do pobierania próbek. Próbki krwi (5 ml) zostaną pobrane bezpośrednio przed rozpoczęciem 24-godzinnego wlewu podskórnego (t=0; 08.00) 10 mg (Pyr1)apeliny-13 rozpuszczonej w 10 ml wody do wstrzyknięć. Dalsze pobieranie próbek żylnych będzie miało miejsce po 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 i 600 min po wstrzyknięciu. Następnie pacjenci zostaną wypisani z placówki i ponownie zgłoszą się następnego dnia o godzinie 08:00 w celu pobrania pojedynczej próbki żylnej.

Pomiary

Kardiografia bioimpedancji klatki piersiowej Dzięki zmianom impedancji elektrycznej klatki piersiowej podczas wyrzutu serca, kardiografia bioimpedancji klatki piersiowej umożliwia nieinwazyjną ocenę objętości wyrzutowej serca oraz obliczenie pojemności minutowej serca i wskaźnika sercowego. Po przygotowaniu skóry do pacjenta zostaną przymocowane cztery pary elektrod „wykrywających” i „wstrzykujących prąd” o niskiej impedancji kontaktowej i podłączonych do kardiografu impedancyjnego. Ta technika jest szeroko stosowana i wypada korzystnie w porównaniu zarówno z inwazyjnymi, jak i innymi nieinwazyjnymi (echokardiograficznymi) pomiarami pojemności minutowej serca. Zmienne te będą zatem rejestrowane w regularnych odstępach czasu w trakcie badania we wszystkich 3 protokołach. Tętno i ciśnienie krwi będą również monitorowane w regularnych odstępach czasu podczas każdego badania przy użyciu półautomatycznego sfigmomanometru oscylometrycznego (Omron HEM-705CP, Omron, Matsusaka, Japonia). Średnie ciśnienie tętnicze (MAP) zostanie obliczone jako rozkurczowe ciśnienie krwi plus jedna trzecia ciśnienia tętna.

Testy Próbki krwi (5 ml) będą pobierane przed i na końcu każdej infuzji leku do kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA), odwirowywane i zamrażane osocze w trzech porcjach po 1 ml do przechowywania w temperaturze -80°C do czasu wykonania testu. Stężenia apeliny w osoczu będą mierzone przez współpracowników z Bristol Myers Squibb, Princeton, USA.

Metody analizy statystycznej

Dane wynikowe zostaną przeanalizowane w stosownych przypadkach za pomocą analizy wariancji (ANOVA) z powtarzanymi pomiarami, analizą regresji oraz sparowanym i niesparowanym testem t-Studenta. Istotność statystyczna zostanie przyjęta na poziomie 5%.