Kardiovaskulární účinky Apelinu u zdravých dobrovolníků

Studijní protokoly Skupinám 5 subjektů bude přidělen jeden ze tří protokolů.

Protokol 1:

Pět zdravých dobrovolníků bude požádáno, aby se zúčastnili klinického výzkumného zařízení celkem 4krát podle níže uvedeného protokolu.

Návštěvy 1 a 2 budou probíhat ve dvou po sobě jdoucích dnech. Účastníci se zúčastní v 7:30 a dostanou lehkou snídani. Intravenózní odběrová kanyla bude zavedena do antekubitální žíly na jedné paži. Vzorky krve (5 ml) budou odebrány bezprostředně před subkutánní injekcí (t=0; 08:00) 1 mg (Pyr1)apelinu-13 a v 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 a 600 minut po injekci. Subjekty budou poté propuštěny ze zařízení a znovu se dostaví následující den v 08:00 pro jeden venózní vzorek. Během této doby bude celkem odebráno přibližně 85 ml krve.

Návštěvy 3 a 4 budou také probíhat ve dvou po sobě jdoucích dnech, alespoň jeden týden po návštěvě 2. Subjekty se zúčastní v 07:30 a dostanou lehkou snídani. Intravenózní odběrová kanyla bude zavedena do antekubitální žíly na jedné paži. Vzorky krve (5 ml) budou odebrány bezprostředně před intravenózní bolusovou infuzí (t=0; 08:00) 1 mg (Pyr1)apelinu-13 během 15 minut a v 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 a 600 minut po injekci. Subjekty budou poté propuštěny ze zařízení a znovu se dostaví následující den v 08:00 pro jeden venózní vzorek.

Protokol 2:

Pět zdravých dobrovolníků bude požádáno, aby se zúčastnili klinického výzkumného zařízení celkem 4krát podle níže uvedeného protokolu.

Návštěvy 1 a 2 budou probíhat ve dvou po sobě jdoucích dnech. Účastníci se zúčastní v 7:30 a dostanou lehkou snídani. Intravenózní odběrová kanyla bude zavedena do antekubitální žíly na jedné paži. Vzorky krve (5 ml) budou odebrány bezprostředně před subkutánní injekcí (t=0; 08:00) 5 mg (Pyr1)apelinu-13 a v 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 a 600 minut po injekci. Subjekty budou poté propuštěny ze zařízení a znovu se dostaví následující den v 08:00 pro jeden venózní vzorek. Během této doby bude celkem odebráno přibližně 85 ml krve.

Návštěvy 3 a 4 budou také probíhat ve dvou po sobě jdoucích dnech, alespoň jeden týden po návštěvě 2. Subjekty se zúčastní v 07:30 a dostanou lehkou snídani. Intravenózní odběrová kanyla bude zavedena do antekubitální žíly na jedné paži. Vzorky krve (5 ml) budou odebrány bezprostředně před intravenózní bolusovou infuzí (t=0; 08:00) 5 mg (Pyr1)apelinu-13 během 15 minut a v 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 a 600 minut po injekci. Subjekty budou poté propuštěny ze zařízení a znovu se dostaví následující den v 08:00 pro jeden venózní vzorek.

Protokol 3:

Pět zdravých dobrovolníků bude požádáno, aby se zúčastnili klinického výzkumného zařízení po dobu 2 po sobě jdoucích dnů. Účastníci se zúčastní v 7:30 a dostanou lehkou snídani. Intravenózní odběrová kanyla bude zavedena do antekubitální žíly na jedné paži. Vzorky krve (5 ml) budou odebrány bezprostředně před zahájením 24hodinové subkutánní infuze (t=0; 08,00) 10 mg (Pyr1)apelinu-13 rozpuštěného v 10 ml vody na injekci. Další žilní odběr bude probíhat 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 a 600 minut po injekci. Subjekty budou poté propuštěny ze zařízení a znovu se dostaví následující den v 08:00 pro jeden venózní vzorek.

Měření

Hrudní bioimpedanční kardiografie Na základě změn transtorakální elektrické impedance během srdeční ejekce umožňuje hrudní bioimpedanční kardiografie neinvazivní hodnocení srdečního tepového objemu a výpočet srdečního výdeje a srdečního indexu. Po přípravě kůže budou k pacientovi připojeny čtyři páry nízkokontaktních elektrod pro „snímání“ a „vstřikování proudu“ a připojené k impedančnímu kardiografu. Tato technika byla široce používána a je dobře srovnatelná s invazivními i jinými neinvazivními (echokardiografickými) měřeními srdečního výdeje. Tyto proměnné budou proto zaznamenávány v pravidelných intervalech během studie ve všech 3 protokolech. Srdeční frekvence a krevní tlak budou také monitorovány v pravidelných intervalech během každé studie pomocí poloautomatického oscilometrického sfygmomanometru (Omron HEM-705CP, Omron, Matsusaka, Japonsko). Střední arteriální tlak (MAP) bude vypočítán jako diastolický krevní tlak plus třetina pulzního tlaku.

Testy Vzorky krve (5 ml) se odeberou před a na konci každé infuze léčiva do kyseliny ethylendiamintetraoctové (EDTA), odstředí se a plazma se zmrazí ve třech 1 ml alikvotech, aby se uchovaly při -80 °C až do testu. Plazmatické koncentrace apelinu budou měřeny spolupracovníky v Bristol Myers Squibb, Princeton, USA.

Metody statistické analýzy

Výsledná data budou případně analyzována analýzou rozptylu (ANOVA) s opakovanými měřeními, regresní analýzou a párovým a nepárovým Studentovým t-testem. Statistická významnost bude brána na 5% hladině.