Kardiovaskuläre Wirkungen von Apelin bei gesunden Freiwilligen

Studienprotokolle Gruppen von 5 Probanden werden zugeteilt, um eines von drei Protokollen zu erhalten.

Protokoll 1:

Fünf gesunde Freiwillige werden gebeten, die klinische Forschungseinrichtung insgesamt 4 Mal gemäß dem untenstehenden Protokoll zu besuchen.

Die Besuche 1 und 2 finden an zwei aufeinanderfolgenden Tagen statt. Die Teilnehmer kommen um 07.30 Uhr und erhalten ein leichtes Frühstück. Eine intravenöse Probenahmekanüle wird in die antekubitale Vene eines Arms eingeführt. Blutproben (5 ml) werden unmittelbar vor der subkutanen Injektion (t=0; 08.00) von 1 mg (Pyr1)apelin-13 und um 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 und 600 min nach der Injektion. Die Probanden werden dann aus der Einrichtung entlassen und am nächsten Tag um 08.00 Uhr für eine einzelne venöse Probe erneut behandelt. Insgesamt werden in dieser Zeit etwa 85 ml Blut entnommen.

Die Besuche 3 und 4 finden ebenfalls an zwei aufeinanderfolgenden Tagen statt, mindestens eine Woche nach Besuch 2. Die Probanden kommen um 07:30 Uhr und erhalten ein leichtes Frühstück. Eine intravenöse Probenahmekanüle wird in die antekubitale Vene eines Arms eingeführt. Blutproben (5 ml) werden unmittelbar vor einer intravenösen Bolusinfusion (t = 0; 08.00) von 1 mg (Pyr1)apelin-13 über 15 min und um 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 entnommen , 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 und 600 min nach der Injektion. Die Probanden werden dann aus der Einrichtung entlassen und am nächsten Tag um 08.00 Uhr für eine einzelne venöse Probe erneut behandelt.

Protokoll 2:

Fünf gesunde Freiwillige werden gebeten, die klinische Forschungseinrichtung insgesamt 4 Mal gemäß dem untenstehenden Protokoll zu besuchen.

Die Besuche 1 und 2 finden an zwei aufeinanderfolgenden Tagen statt. Die Teilnehmer kommen um 07.30 Uhr und erhalten ein leichtes Frühstück. Eine intravenöse Probenahmekanüle wird in die antekubitale Vene eines Arms eingeführt. Blutproben (5 ml) werden unmittelbar vor der subkutanen Injektion (t=0; 08.00) von 5 mg (Pyr1)apelin-13 und um 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 und 600 min nach der Injektion. Die Probanden werden dann aus der Einrichtung entlassen und am nächsten Tag um 08.00 Uhr für eine einzelne venöse Probe erneut behandelt. Insgesamt werden in dieser Zeit etwa 85 ml Blut entnommen.

Die Besuche 3 und 4 finden ebenfalls an zwei aufeinanderfolgenden Tagen statt, mindestens eine Woche nach Besuch 2. Die Probanden kommen um 07:30 Uhr und erhalten ein leichtes Frühstück. Eine intravenöse Probenahmekanüle wird in die antekubitale Vene eines Arms eingeführt. Blutproben (5 ml) werden unmittelbar vor einer intravenösen Bolusinfusion (t=0; 08.00) von 5 mg (Pyr1)apelin-13 über 15 min und um 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 entnommen , 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 und 600 min nach der Injektion. Die Probanden werden dann aus der Einrichtung entlassen und am nächsten Tag um 08.00 Uhr für eine einzelne venöse Probe erneut behandelt.

Protokoll 3:

Fünf gesunde Freiwillige werden gebeten, die klinische Forschungseinrichtung an zwei aufeinanderfolgenden Tagen zu besuchen. Die Probanden nehmen um 07.30 Uhr teil und erhalten ein leichtes Frühstück. Eine intravenöse Probenahmekanüle wird in die antekubitale Vene eines Arms eingeführt. Blutproben (5 ml) werden unmittelbar vor Beginn einer 24-stündigen subkutanen Infusion von (t = 0; 08.00) von 10 mg (Pyr1)apelin-13, gelöst in 10 ml Wasser für Injektionszwecke, entnommen. Weitere venöse Probenentnahmen erfolgen 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 und 600 min nach der Injektion. Die Probanden werden dann aus der Einrichtung entlassen und am nächsten Tag um 08.00 Uhr für eine einzelne venöse Probe erneut behandelt.

Messungen

Thorax-Bioimpedanz-Kardiographie Aufgrund der Änderungen der transthorakalen elektrischen Impedanz während des Herzauswurfs ermöglicht die thorakale Bioimpedanz-Kardiographie die nicht-invasive Beurteilung des Herzschlagvolumens und die Berechnung des Herzzeitvolumens und des Herzindex. Nach der Hautvorbereitung werden vier Paare von niederohmigen „Erfassungs“- und „Strominjektions“-Elektroden am Patienten angebracht und mit einem Impedanzkardiographen verbunden. Diese Technik wurde weithin angewendet und schneidet im Vergleich sowohl mit invasiven als auch mit anderen nicht-invasiven (echokardiographischen) Messungen des Herzzeitvolumens gut ab. Diese Variablen werden daher während der gesamten Studie in allen 3 Protokollen in regelmäßigen Abständen aufgezeichnet. Herzfrequenz und Blutdruck werden während jeder Studie auch in regelmäßigen Abständen mit einem halbautomatischen oszillometrischen Blutdruckmessgerät (Omron HEM-705CP, Omron, Matsusaka, Japan) überwacht. Der mittlere arterielle Druck (MAP) wird als diastolischer Blutdruck plus ein Drittel des Pulsdrucks berechnet.

Assays Blutproben (5 ml) werden vor und am Ende jeder Arzneimittelinfusion in Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA) entnommen, zentrifugiert und Plasma in drei 1-ml-Aliquots eingefroren, die bis zum Assay bei -80 °C gelagert werden. Die Plasmakonzentrationen von Apelin werden von Mitarbeitern bei Bristol Myers Squibb, Princeton, USA, gemessen.

Methoden der statistischen Analyse

Die Ergebnisdaten werden gegebenenfalls durch Varianzanalyse (ANOVA) mit wiederholten Messungen, Regressionsanalyse und gepaartem und ungepaartem Student's t-Test analysiert. Statistische Signifikanz wird auf dem 5%-Niveau genommen.