Effetti cardiovascolari di Apelin in volontari sani

Protocolli di studio Gruppi di 5 soggetti verranno assegnati a ricevere uno dei tre protocolli.

Protocollo 1:

A cinque volontari sani verrà chiesto di frequentare la struttura di ricerca clinica per un totale di 4 occasioni come da protocollo di seguito.

Le visite 1 e 2 si svolgeranno in due giorni consecutivi. I partecipanti parteciperanno alle 07:30 e riceveranno una colazione leggera. Una cannula per prelievo endovenoso verrà inserita nella vena antecubitale di un braccio. I campioni di sangue (5 mL) verranno prelevati immediatamente prima dell'iniezione sottocutanea (t=0; 08.00) di 1 mg (Pyr1)apelin-13 e alle 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 e 600 min dopo l'iniezione. I soggetti verranno quindi dimessi dalla struttura e torneranno il giorno successivo alle 08:00 per un singolo campione venoso. In questo periodo verranno prelevati in totale circa 85 ml di sangue.

Anche le visite 3 e 4 si svolgeranno in due giorni consecutivi, almeno una settimana dopo la visita 2. I soggetti parteciperanno alle 07.30 e riceveranno una colazione leggera. Una cannula per prelievo endovenoso verrà inserita nella vena antecubitale di un braccio. I campioni di sangue (5 mL) verranno prelevati immediatamente prima di un'infusione endovenosa in bolo (t=0; 08.00) di 1 mg (Pyr1)apelin-13 per 15 min e a 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 , 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 e 600 min dopo l'iniezione. I soggetti verranno quindi dimessi dalla struttura e torneranno il giorno successivo alle 08:00 per un singolo campione venoso.

Protocollo 2:

A cinque volontari sani verrà chiesto di frequentare la struttura di ricerca clinica per un totale di 4 occasioni come da protocollo di seguito.

Le visite 1 e 2 si svolgeranno in due giorni consecutivi. I partecipanti parteciperanno alle 07:30 e riceveranno una colazione leggera. Una cannula per prelievo endovenoso verrà inserita nella vena antecubitale di un braccio. I campioni di sangue (5 mL) verranno prelevati immediatamente prima dell'iniezione sottocutanea (t=0; 08.00) di 5 mg (Pyr1)apelin-13 e alle 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 e 600 min dopo l'iniezione. I soggetti verranno quindi dimessi dalla struttura e torneranno il giorno successivo alle 08:00 per un singolo campione venoso. In questo periodo verranno prelevati in totale circa 85 ml di sangue.

Anche le visite 3 e 4 si svolgeranno in due giorni consecutivi, almeno una settimana dopo la visita 2. I soggetti parteciperanno alle 07.30 e riceveranno una colazione leggera. Una cannula per prelievo endovenoso verrà inserita nella vena antecubitale di un braccio. I campioni di sangue (5 mL) verranno prelevati immediatamente prima di un'infusione endovenosa in bolo (t=0; 08.00) di 5 mg (Pyr1)apelin-13 nell'arco di 15 min e a 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 , 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 e 600 min dopo l'iniezione. I soggetti verranno quindi dimessi dalla struttura e torneranno il giorno successivo alle 08:00 per un singolo campione venoso.

Protocollo 3:

A cinque volontari sani verrà chiesto di frequentare la struttura di ricerca clinica per 2 giorni consecutivi. I soggetti parteciperanno alle 07.30 e riceveranno una colazione leggera. Una cannula per prelievo endovenoso verrà inserita nella vena antecubitale di un braccio. I campioni di sangue (5 mL) verranno prelevati immediatamente prima di iniziare un'infusione sottocutanea di 24 ore di (t=0; 08.00) di 10 mg (Pyr1)apelin-13 sciolti in 10 mL di acqua per preparazioni iniettabili. Ulteriori prelievi venosi avverranno a 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 e 600 minuti dopo l'iniezione. I soggetti verranno quindi dimessi dalla struttura e torneranno il giorno successivo alle 08:00 per un singolo campione venoso.

Misure

Cardiografia a bioimpedenza toracica In virtù delle variazioni dell'impedenza elettrica transtoracica durante l'eiezione cardiaca, la cardiografia a bioimpedenza toracica consente la valutazione non invasiva della gittata cardiaca e il calcolo della gittata cardiaca e dell'indice cardiaco. Dopo la preparazione della pelle, quattro paia di elettrodi di "rilevamento" e "iniezione di corrente" a bassa impedenza di contatto verranno attaccati al paziente e collegati a un cardiografo a impedenza. Questa tecnica è stata ampiamente applicata e si confronta favorevolmente sia con le misure invasive che con altre misure non invasive (ecocardiografiche) della gittata cardiaca. Queste variabili saranno quindi registrate a intervalli regolari durante lo studio in tutti e 3 i protocolli. Anche la frequenza cardiaca e la pressione sanguigna saranno monitorate a intervalli regolari durante ogni studio utilizzando uno sfigmomanometro oscillometrico semiautomatico (Omron HEM-705CP, Omron, Matsusaka, Giappone). La pressione arteriosa media (MAP) sarà calcolata come pressione arteriosa diastolica più un terzo della pressione del polso.

Saggi I campioni di sangue (5 mL) saranno raccolti prima e alla fine di ogni infusione di farmaco in acido etilendiamminotetraacetico (EDTA), centrifugati e plasma congelato in tre aliquote da 1 mL da conservare a -80 °C fino al dosaggio. Le concentrazioni plasmatiche di apelina saranno misurate dai collaboratori di Bristol Myers Squibb, Princeton, USA.

Metodi di analisi statistica

I dati dei risultati saranno analizzati, se del caso, mediante analisi della varianza (ANOVA) con misure ripetute, analisi di regressione e test t di Student appaiati e non appaiati. La significatività statistica sarà presa al livello del 5%.