Przywrócenie mikrobiomu poprzez selekcję superdawcy (RESTORE-UC)

Wrzodziejące zapalenie jelita grubego (UC) jest przewlekłą, nawracającą chorobą zapalną jelit (IBD), charakteryzującą się rozlanym zapaleniem błony śluzowej, rozciągającym się proksymalnie od odbytnicy i wywołującym objawy krwawej biegunki. Złożona patogeneza IBD pozostaje w dużej mierze nieznana.

Manipulowanie mikroflorą jelitową w celu przywrócenia normobiozy ma potencjał terapeutyczny w IBD. Przeszczep mikroflory kałowej (FMT), polegający na przeszczepieniu pacjentowi mikroflory kałowej od zdrowego dawcy, jest badany jako terapia dla aktywnych pacjentów z UC. Obecnie opublikowano trzy randomizowane, kontrolowane badania FMT u pacjentów z aktywnym wrzodziejącym zapaleniem jelita grubego, z rosnącym powodzeniem9-11. Badacze uważają, że wskaźnik powodzenia FMT u pacjentów z aktywnym wrzodziejącym zapaleniem jelita grubego można poprawić, rozwiązując pozostałe palące kwestie, w tym wykorzystanie wybranych dawców, przygotowanie FMT, tryb i częstotliwość podawania. W związku z tym badacze zaprojektowali nowe wieloośrodkowe badanie interwencyjne z użyciem FMT, aby konkretnie odpowiedzieć na te pytania.

Ogólne główne cele tego projektu to:

Cel 1: Chcą zbadać, czy wskaźnik powodzenia FMT u pacjentów z aktywnym WZJG można zwiększyć poprzez ścisłą wstępną selekcję dawców, standaryzację i optymalizację przygotowania FMT oraz wielokrotne podawanie FMT.

Cel 2: Badacze chcą zbadać czasowe i funkcjonalne zmiany mikroflory jelitowej pacjentów z UC po FMT

Cel 3: Spróbują zdefiniować związane z gospodarzem predyktory (braku) odpowiedzi na FMT z uwzględnieniem genetycznej podatności pacjentów i ich wyjściowej ekspresji genów błony śluzowej

Projekt badania:

Będzie to ogólnokrajowe, wieloośrodkowe (6 ośrodków uniwersyteckich) randomizowane badanie kliniczne z podwójnie ślepą próbą, kontrolowane placebo, mające na celu ocenę skuteczności i bezpieczeństwa FMT u pacjentów z aktywnym wrzodziejącym zapaleniem jelita grubego (podpunktowy wynik endoskopii Mayo: 2 lub 3 i całkowity wynik Mayo: 4-10).

Pierwszorzędowym punktem końcowym będzie remisja kliniczna i endoskopowa bez sterydów w 8. tygodniu (zdefiniowana jako całkowity wynik w skali Mayo wynoszący 2 lub mniej, ze wszystkimi wynikami cząstkowymi Mayo równymi 1 lub mniej i zmniejszeniem wyniku cząstkowego endoskopii o co najmniej 1 punkt od wartości początkowej) .

Drugorzędowymi punktami końcowymi będą badania zmian we krwi i markerach stanu zapalnego w kale przed i po FMT (np. kalprotektyna i białko C-reaktywne (CRP)), remisja kliniczna bez steroidów, odpowiedź kliniczna bez steroidów, remisja endoskopowa bez steroidów i odpowiedź endoskopowa bez steroidów.

Zakładając 40% wskaźnik sukcesu w celu osiągnięcia wygojenia błony śluzowej w 8. tygodniu w grupie dawcy FMT, różnicę w leczeniu wynoszącą 25% w grupie autologicznej FMT, wymagana jest próba o wielkości 49 pacjentów na grupę, aby uzyskać moc 80% i istotność statystyczna na poziomie 5%. Ponadto, biorąc pod uwagę 10% przypadków rezygnacji, uwzględnionych zostanie łącznie 108 pacjentów. Po włączeniu odpowiednio 33% i 66% wielkości próby (N=108) w 8. tygodniu zostaną przeprowadzone dwie analizy pośrednie.

Rada monitorująca dane i bezpieczeństwo (DSMB) może udzielić porady w sprawie dostosowania wielkości próby lub wcześniejszego zakończenia.

Badacze będą zbierać próbki kału, krwi, śluzówki i kwestionariusze w różnych punktach czasowych.

Wyjściowe próbki kału od dawców i wyjściowe próbki błony śluzowej wraz z próbkami kału (na początku badania oraz w tygodniach 0, 1, 2, 3, 4, 8, 12, 24, 52) od pacjentów będą badane za pomocą sekwencjonowania 16S rDNA na podstawie analiza mikrobiomu.

Celem badaczy jest poprawa wskaźników powodzenia FMT poprzez wstępne badanie mikrobiologiczne dawcy i powtarzanie FMT (4 FMT/pacjenta).

Przed FMT kał i krew dawcy zostaną przebadane pod kątem patogenów zgodnie z międzynarodowymi wytycznymi konsensusu. Ponadto badacze dokonają wstępnej selekcji dawców na podstawie bogactwa gatunków i obfitości taksonów będących przedmiotem zainteresowania.

Zostanie wykorzystany jeden dawca na dziesięciu pacjentów, a materiał kałowy zostanie zamrożony w temperaturze -80° do czasu użycia. Dlatego badacze potrzebują co najmniej 15 dawców, którzy pobiorą próbki kału podczas całego badania, włączając fazę otwartą (łącznie +/- 600 próbek od dawców).

Aby zoptymalizować przygotowanie FMT, badacze przygotują próbki FMT w ściśle określonych warunkach beztlenowych.

W celu standaryzacji preparatu FMT po pierwszym rozcieńczeniu zostanie określona bezwzględna liczba komórek w zawiesinie kału.

Powtórzony FMT zostanie wykonany czterokrotnie w odstępie 1 tygodnia do tygodnia 4. Na początku pacjenci wypiją 2 litry Moviprep (preparat standardowy), następnie zostanie przeprowadzona sigmoidoskopia, podczas której roztwór kału dawcy zostanie podany przez sondę doodbytniczą.

W 1, 2 i 3 tygodniu roztwór kału dawcy zostanie podany poprzez wkroplenie doodbytnicze bez uprzedniej wlewu wodnego.

Otwarte badanie FMT będzie dostępne dla wszystkich pacjentów w grupie pozorowanej FMT od tygodnia 8.