Obnova mikrobiomu prostřednictvím výběru superdonorů (RESTORE-UC)

Ulcerózní kolitida (UC) je chronické recidivující zánětlivé onemocnění střev (IBD) charakterizované difúzním slizničním zánětem, který se šíří proximálně od konečníku a způsobuje příznaky krvavého průjmu. Komplexní patogeneze IBD zůstává do značné míry neznámá.

Manipulace s enterickou mikroflórou k obnovení normobiózy má u IBD terapeutický potenciál. Transplantace fekální mikroflóry (FMT), kdy je fekální mikroflóra od zdravého dárce transplantována pacientovi, je studována jako terapie pro aktivní pacienty s UC. V současné době byly s rostoucí úspěšností publikovány tři randomizované kontrolované studie FMT u pacientů s aktivní ulcerózní kolitidou9-11. Vyšetřovatelé se domnívají, že úspěšnost FMT u pacientů s aktivní UC lze zlepšit vyřešením zbývajících naléhavých otázek, včetně použití vybraných dárců, přípravy FMT, způsobu a frekvence podávání. Vyšetřovatelé proto navrhli novou multicentrickou intervenční studii s FMT, aby konkrétně na tyto otázky odpověděla.

Celkové hlavní cíle tohoto projektu jsou:

Cíl 1: Chtějí prověřit, zda lze úspěšnost FMT u pacientů s aktivní UC zvýšit přísným předvýběrem dárců, standardizací a optimalizací preparátu FMT a opakovaným podáváním FMT.

Cíl 2: Výzkumníci chtějí prozkoumat časové a funkční změny střevní mikroflóry pacientů s UC po FMT

Cíl 3: Pokusí se definovat hostitele související prediktory pro (ne)odpověď na FMT s integrací genetické vnímavosti pacientů a jejich výchozí slizniční genové exprese

Studovat design:

Půjde o národní multicentrickou (6 univerzitních center) dvojitě zaslepenou placebem kontrolovanou randomizovanou klinickou studii k vyhodnocení účinnosti a bezpečnosti FMT u pacientů s aktivní UC (Mayo endoskopické dílčí skóre: 2 nebo 3 a celkové Mayo skóre: 4-10).

Primárním cílovým parametrem bude klinická a endoskopická remise bez steroidů v týdnu 8 (definovaná jako celkové Mayo skóre 2 nebo méně, se všemi Mayo dílčími skóre 1 nebo méně a alespoň 1 bod snížení od výchozí hodnoty v endoskopickém dílčím skóre) .

Sekundárními cílovými body bude vyšetření změn krevních a fekálních zánětlivých markerů před a po FMT (např. kalprotektin a C-reaktivní protein (CRP)), klinická remise bez steroidů, klinická odpověď bez steroidů, endoskopická remise bez steroidů a endoskopická odpověď bez steroidů.

Za předpokladu 40% úspěšnosti dosažení slizničního hojení v 8. týdnu v dárcovském rameni FMT, rozdíl v léčbě 25 % v rameni s autologním FMT, je k získání síly 80 % a statistická významnost na 5% hladině. Navíc s ohledem na 10% výpadky bude zařazeno celkem 108 pacientů. Po zahrnutí 33 % a 66 % velikosti vzorku (N=108) v týdnu 8 budou provedeny dvě předběžné analýzy.

Rada pro monitorování dat a bezpečnosti (DSMB) pak může poskytnout rady ohledně úpravy velikosti vzorku nebo předčasného ukončení.

Vzorky stolice, krve, sliznic a dotazníky budou vyšetřovateli odebírány v různých časových bodech.

Výchozí vzorky stolice od dárců a výchozí vzorky slizniční spolu se vzorky stolice (na začátku studie a v týdnech 0, 1, 2, 3, 4, 8, 12, 24, 52) od pacientů budou studovány pomocí sekvenování 16S rDNA na základě analýza mikroflóry.

Cílem výzkumníků je zlepšit úspěšnost FMT mikrobiálním prescreeningem dárce a opakovaným FMT (4 FMT/pacient).

Před FMT bude dárcovská stolice a krev vyšetřeny na patogeny podle mezinárodních konsenzuálních pokynů. Kromě toho vyšetřovatelé předem vyberou své dárce na základě druhové bohatosti a množství taxonů, které nás zajímají.

Použije se jeden dárce na deset pacientů a fekální materiál bude až do použití zmrazen na -80 °C. Zkoušející proto potřebují alespoň 15 dárců, kteří by poskytli vzorky stolice během celé studie, včetně otevřené fáze (celkem +/- 600 vzorků dárců).

Pro optimalizaci přípravy FMT budou vyšetřovatelé připravovat vzorky FMT za přísných anaerobních podmínek.

Pro standardizaci přípravku FMT bude po prvním ředění stanoven absolutní počet buněk ve fekální suspenzi.

Opakovaná FMT bude provedena čtyřikrát s intervalem 1 týdne až 4. týdne. Na začátku pacienti vypijí 2 l Moviprepu (standardní přípravek), poté bude provedena sigmoidoskopie, při níž bude roztok dárcovských stolic podán rektální sondou.

V 1., 2. a 3. týdnu bude dárcovský roztok stolice podáván rektální instilací bez předchozího vodního klystýru.

Otevřená FMT bude dostupná pro všechny pacienty v rameni se simulovanou FMT od 8. týdne.