Ripristino del microbioma attraverso la selezione di superdonatori (RESTORE-UC)

La colite ulcerosa (CU) è una malattia infiammatoria intestinale cronica recidivante (IBD) caratterizzata da un'infiammazione diffusa della mucosa, che si estende prossimalmente dal retto e causa sintomi di diarrea sanguinolenta. La complessa patogenesi dell'IBD rimane in gran parte sconosciuta.

La manipolazione del microbiota enterico per ripristinare la normobiosi ha un potenziale terapeutico nell'IBD. Il trapianto di microbiota fecale (FMT), in cui il microbiota fecale di un donatore sano viene trapiantato in un paziente, è in fase di studio come terapia per i pazienti con CU attiva. Attualmente tre studi FMT controllati randomizzati sono stati pubblicati in pazienti con colite ulcerosa attiva con crescente successo9-11. I ricercatori ritengono che il tasso di successo dell'FMT nei pazienti con UC attiva possa essere migliorato risolvendo le restanti questioni urgenti, tra cui l'uso di donatori selezionati, la preparazione dell'FMT, la modalità e la frequenza della somministrazione. I ricercatori hanno quindi progettato un nuovo studio interventistico multicentrico con FMT per rispondere in modo specifico a queste domande.

Gli obiettivi principali generali di questo progetto sono:

Obiettivo 1: vogliono esaminare se il tasso di successo dell'FMT nei pazienti con CU attiva può essere aumentato preselezionando rigorosamente i donatori, standardizzando e ottimizzando la preparazione dell'FMT e mediante ripetute somministrazioni dell'FMT.

Obiettivo 2: i ricercatori vogliono indagare sui cambiamenti temporali e funzionali del microbiota intestinale dei pazienti con UC dopo FMT

Obiettivo 3: Proveranno a definire i predittori correlati all'ospite per la (non) risposta all'FMT con l'integrazione della suscettibilità genetica dei pazienti e la loro espressione genica della mucosa di base

Disegno dello studio:

Questo sarà uno studio clinico randomizzato multicentrico nazionale (6 centri universitari) in doppio cieco controllato con placebo per valutare l'efficacia e la sicurezza dell'FMT nei pazienti con CU attiva (sottopunteggio endoscopico Mayo: 2 o 3 e punteggio Mayo totale: 4-10).

L'endpoint primario sarà la remissione clinica ed endoscopica senza steroidi alla settimana 8 (definita come un punteggio Mayo totale pari o inferiore a 2, con tutti i sottopunteggi Mayo pari o inferiori a 1 e una riduzione di almeno 1 punto rispetto al basale nel punteggio parziale dell'endoscopia) .

Gli endpoint secondari saranno l'indagine sui cambiamenti nei marcatori infiammatori nel sangue e nelle feci prima e dopo l'FMT (ad es. calprotectina e proteina C-reattiva (PCR)), remissione clinica senza steroidi, risposta clinica senza steroidi, remissione endoscopica senza steroidi e risposta endoscopica senza steroidi.

Supponendo una percentuale di successo del 40% per ottenere la guarigione della mucosa alla settimana 8 nel braccio FMT donatore, una differenza di trattamento del 25% nel braccio FMT autologo, è necessaria una dimensione del campione di 49 pazienti per gruppo per ottenere una potenza dell'80% e una significatività statistica al livello del 5%. Inoltre, considerando il 10% di abbandoni, verranno inclusi un totale di 108 pazienti. Verranno eseguite due analisi ad interim dopo l'inclusione rispettivamente del 33% e del 66% della dimensione del campione (N=108) alla settimana 8.

Un comitato di monitoraggio dei dati e della sicurezza (DSMB) può quindi fornire consigli sull'adeguamento della dimensione del campione o sulla risoluzione anticipata.

Campioni di feci, sangue, mucose e questionari saranno raccolti dagli investigatori in diversi momenti.

Saranno studiati campioni fecali di base da donatori e campioni di mucosa di base insieme a campioni fecali (all'inizio dello studio e alle settimane 0, 1, 2, 3, 4, 8, 12, 24, 52) di pazienti mediante sequenziamento del 16S rDNA basato analisi del microbiota.

L'obiettivo degli investigatori è migliorare le percentuali di successo dell'FMT mediante il prescreening microbico del donatore e l'FMT ripetuto (4 FMT/paziente).

Prima dell'FMT, le feci e il sangue del donatore saranno sottoposti a screening per agenti patogeni secondo le linee guida di consenso internazionale. Inoltre, gli investigatori preselezioneranno i loro donatori in base alla ricchezza delle specie e all'abbondanza dei taxa di interesse.

Verrà utilizzato un donatore ogni dieci pazienti e il materiale fecale verrà congelato a -80° fino al momento dell'uso. Pertanto, gli investigatori hanno bisogno di almeno 15 donatori per fornire campioni fecali durante l'intero studio, inclusa la fase in aperto (+/- 600 campioni di donatori in totale).

Per ottimizzare la preparazione FMT, gli investigatori prepareranno i campioni FMT in rigorose circostanze anaerobiche.

Per standardizzare la preparazione dell'FMT, dopo una prima diluizione verrà determinata una conta cellulare assoluta della sospensione fecale.

L'FMT ripetuto verrà eseguito per quattro volte con un intervallo di 1 settimana fino alla settimana 4. Al basale, i pazienti berranno 2L di Moviprep (preparazione standard), successivamente verrà eseguita una sigmoidoscopia in cui la soluzione di feci del donatore verrà somministrata attraverso un tubo rettale.

Alla settimana 1, 2 e 3, la soluzione di feci del donatore verrà somministrata tramite instillazione rettale senza precedente clistere di acqua.

L'FMT in aperto sarà disponibile per tutti i pazienti nel braccio sham-FMT dalla settimana 8.