ICSI kontra konwencjonalne zapłodnienie in vitro w parach niemęskich

Wszyscy pacjenci poddawani IVF/ICSI będą leczeni protokołem antagonisty GnRH. Rekombinowany FSH (Puregon, MSD) będzie podawany w 2. lub 3. dniu cyklu miesiączkowego przez 5 dni. Dawkę początkową ustala się indywidualnie dla każdego pacjenta w oparciu o następujące kryteria: AMH <0,7 ng/ml, dawka 300 IU/dobę; AMH 0,7-2,1 ng/ml, dawka 200 j.m./dobę; AMH >2,1 ng/ml, dawka 150 IU/dobę. Następnie badacze mogą dostosować dawkę na podstawie własnej oceny klinicznej. Rozwój pęcherzyków będzie monitorowany za pomocą ultrasonografii i pomiaru poziomu estradiolu i progesteronu, począwszy od piątego dnia stymulacji. Skanowanie i pomiar hormonalny będą powtarzane co 2-3 dni, w zależności od wielkości pęcherzyków. Antagonista jest rutynowo stosowany od dnia 5 do dnia wyzwolenia. Kryteriami wyzwalania przez hCG (Ovitrelle 250 mg, Merck, Niemcy) będzie obecność co najmniej trzech wiodących pęcherzyków o średnicy 17 mm. U kobiet z nadmierną odpowiedzią folikularną (≥15 pęcherzyków ≥12 mm) zostanie zastosowana dawka 0,2 mg tryptoreliny (Diphereline, Ipsen Beaufour, Francja), gdy pojawią się co najmniej dwa wiodące pęcherzyki o średnicy 17 mm. Pobranie oocytów zostanie przeprowadzone 36 godzin po wyzwoleniu.

Randomizacja i przydział uczestniczek do grup badawczych nastąpi w dniu pobrania komórki jajowej, po pobraniu nasienia od męża. Kwalifikujący się uczestnicy, którzy wyrazili świadomą zgodę, zostaną losowo przydzieleni do ICSI lub konwencjonalnego zapłodnienia in vitro.

W grupie ICSI inseminacja zostanie przeprowadzona metodą ICSI, 3 - 4 godziny po pobraniu komórki jajowej. OCC zostaną usunięte przy użyciu hialuronidazy. Zapłodnione zostaną tylko dojrzałe oocyty.

W konwencjonalnej grupie IVF inseminacja zostanie przeprowadzona za pomocą konwencjonalnego IVF. Dwie godziny po pobraniu zebrane OCC będą inseminowane przez kolejne 2 godziny, w stężeniu 100 000 ruchliwych plemników/ml. Zapłodnione OCC będą hodowane przez noc w pożywce hodowlanej.

W obu grupach kontrola zapłodnienia zostanie przeprowadzona pod mikroskopem odwróconym w okresie 16-18 godzin po inseminacji. W dniu 3 ocena zarodków zostanie przeprowadzona w ustalonym punkcie czasowym 66 ± 2 godziny po zapłodnieniu, zgodnie z konsensusem stambulskim. Transfer zarodków zostanie przeprowadzony w 3. dobie pod kontrolą USG. Maksymalnie 2 zarodki zostaną przeniesione do macicy. Pozostałe zarodki stopnia 1 i 2 zostaną zamrożone. Wspomaganie fazy lutealnej będzie odbywać się za pomocą estradiolu (Valiera 2 mg) 8 mg/dobę i progesteronu dopochwowego 800 mg/dobę (Cyclogest 400 mg) do 7 tygodnia ciąży.

Jeśli istnieją przeciwwskazania do transferu świeżych zarodków, zostanie zastosowana strategia zamrożenia wszystkiego, z wykorzystaniem techniki Cryotech. Wskazania do zamrożenia wszystkich obejmują: ryzyko wystąpienia zespołu hiperstymulacji jajników (OHSS), przedwczesny wzrost progesteronu (≥1,5 ng/ml), cienkie endometrium (<7 mm), płyn w jamie w dniu transferu zarodka, polip endometrium, hydrosalpinx, które nie usunięto przed pobraniem oocytów.

W następnym cyklu endometrium zostanie przygotowane za pomocą estradiolu (Valiera 2 mg, 8 mg/dzień) doustnie, począwszy od 2-3 dnia cyklu miesiączkowego. Gdy grubość endometrium osiągnie 8 mm lub więcej, pacjentki zaczną stosować progesteron dopochwowo (Cyclogest 400 mg, 800 mg/dobę). Transfer zarodków zostanie przeprowadzony 3 dni po zastosowaniu progesteronu. W dniu transferu zarodków zostaną rozmrożone. W cyklu zamrażania/rozmrażania najlepsze zarodki będą wykorzystywane jako pierwsze, podobnie jak w przypadku świeżego transferu. Dwie godziny po rozmrożeniu maksymalnie 2 zarodki, które przeżyły, zostaną przeniesione do macicy pod kontrolą USG. Wspomaganie fazy lutealnej zapewni estradiol (Valiera 2 mg) 8 mg/dobę i progesteron dopochwowy 800 mg/dobę (Cyclogest 400 mg) do siódmego tygodnia ciąży.

W obu grupach klinicyści, którzy wykonują transfer zarodków, w cyklach świeżych lub mrożonych, nie będą wiedzieli o interwencji.

Poziom hCG w surowicy zostanie zmierzony 2 tygodnie po transferze zarodka, a jeśli wynik będzie dodatni, w 7. i 12. tygodniu ciąży zostanie wykonane badanie ultrasonograficzne macicy. W 11-12 tygodniu ciąży uczestniczki zostaną skierowane do przychodni, oddziału O&G, szpitala My Duc lub szpitala An Sinh w celu opieki prenatalnej aż do porodu.