PORTADOR ASSINTOMÁTICO DE LEISHMANIA INFANTUM, AGENTE DE LEISHMANIOSE VISCERAL MEDISERRÂNEA: ESTUDO DA RESPOSTA IMUNE - (Asymptoleish)

A leishmaniose é considerada pela OMS como uma doença emergente e não controlada. Eles são a segunda principal causa de morte e a quarta principal causa de morbidade em doenças tropicais. A leishmaniose é a retículo-endoteliose parasitária, cujo agente patogênico é um protozoário flagelado pertencente ao gênero Leishmania. Estima-se que haja cerca de 2 milhões de novos casos por ano. Os tratamentos eficazes contra a leishmaniose visceral são poucos e surgem problemas de resistência. Até o momento, apenas uma vacina canina está disponível protegendo os cães do desenvolvimento da leishmaniose canina para L. infantum. No homem, em casos clínicos paralelos, a leishmaniose é caracterizada por um grande número de portadores assintomáticos. É o caso dos Alpes Marítimos, onde 50% dos habitantes do interior de Nice são portadores do parasita.

os investigadores desejam estudar a resposta imune protetora ao parasita e mais particularmente aos portadores assintomáticos. De fato, esses pacientes foram infectados pelo parasita e não desenvolveram a doença. Compreender a resposta imune protetora nesses pacientes contra o parasita é, portanto, fundamental no desenvolvimento de uma vacina contra a leishmaniose humana.

Para o efeito, o investigador pretende fazer um estudo ex vivo da resposta imunitária de linfócitos provenientes de portadores assintomáticos após estimulação por péptidos vacinais de Leishmania. Pretende também descrever a resposta imunitária, após estimulação por estes péptidos, nos linfócitos de indivíduos portadores assintomáticos e nos linfócitos de indivíduos não infectados pelo parasita e compará-los. Este estudo é unicêntrico e não randomizado. Deseja recrutar 20 portadores assintomáticos de L. infantum e 10 indivíduos não infectados. Eles serão selecionados em nosso banco de dados. Uma simples amostra de sangue será coletada. Após a verificação por PCR quantitativo e western blotting de seu status para leishmaniose, a equipe os dividirá em dois grupos (assintomáticos ou saudáveis). Em seguida, as amostras de sangue serão enviadas à equipe de Jean Loup Lemesre do Laboratório INTERTRYP - UMR177 do IRD em Montpellier. Análise ELISPOT e ensaio de citocinas e proteases para descrever a resposta imune dos dois grupos e compará-los. Além disso, a tipagem celular será realizada por citometria de fluxo para determinar o tipo de linfócitos envolvidos na resposta imune contra peptídeos de Leishmania. A tipagem HLA também será realizada para validar a cobertura HLA dos peptídeos testados. Por fim, será realizada uma análise do transcriptoma, que permitirá identificar a expressão diferencial de genes e vias metabólicas envolvidas na resposta imune e, assim, entender como pessoas assintomáticas podem controlar a infecção.