PORTATORE ASINTOMATICO DI LEISHMANIA INFANTUM, AGENTE DELLA LEISHMANIOSI VISCERALE DEL MEDISERRANEO: STUDIO DELLA RISPOSTA IMMUNITARIA - (Asymptoleish)

La leishmaniosi è considerata dall'OMS una malattia emergente e incontrollata. Sono la seconda causa di morte e la quarta causa di morbilità nelle malattie tropicali. La leishmaniosi è una reticolo-endoteliosi parassitaria, il cui agente patogeno è un protozoo flagellato appartenente al genere Leishmania. Si stima che ci siano circa 2 milioni di nuovi casi all'anno. I trattamenti efficaci contro la leishmaniosi viscerale sono pochi e compaiono problemi di resistenza. Ad oggi, è disponibile solo un vaccino canino che protegga i cani dallo sviluppo della leishmaniosi canina a L. infantum. Nell'uomo, in casi clinici paralleli, la leishmaniosi è caratterizzata da un gran numero di portatori asintomatici. È il caso delle Alpi Marittime dove il 50% degli abitanti dell'entroterra di Nizza sono portatori del parassita.

i ricercatori desiderano studiare la risposta immunitaria protettiva al parassita e più in particolare ai portatori asintomatici. Infatti, questi pazienti sono stati infettati dal parassita e non hanno sviluppato la malattia. Comprendere la risposta immunitaria protettiva in questi pazienti contro il parassita è quindi fondamentale nello sviluppo di un vaccino contro la leishmaniosi umana.

A tale scopo, il ricercatore intende effettuare uno studio ex vivo della risposta immunitaria dei linfociti provenienti da portatori asintomatici dopo stimolazione con i peptidi del vaccino contro la Leishmania. Vuole inoltre descrivere la risposta immunitaria, dopo stimolazione da parte di questi peptidi, nei linfociti di soggetti portatori asintomatici e linfociti di soggetti non infetti dal parassita e confrontarli. Questo studio è unicentrico e non randomizzato. Desidera reclutare 20 portatori asintomatici di L. Infantum e 10 soggetti non infetti. Saranno selezionati dal nostro database. Verrà prelevato un semplice campione di sangue. Dopo la verifica mediante PCR quantitativa e western blotting del loro stato nei confronti della leishmaniosi, il team li dividerà in due gruppi (asintomatici o sani). Quindi i campioni di sangue saranno inviati al team di Jean Loup Lemesre del Laboratorio INTERTRYP - UMR177 dell'IRD di Montpellier. Analisi ELISPOT e dosaggio di citochine e proteasi per descrivere la risposta immunitaria dei due gruppi e confrontarle. Inoltre, la tipizzazione cellulare sarà eseguita mediante citometria a flusso per determinare il tipo di linfociti coinvolti nella risposta immunitaria contro i peptidi di Leishmania. Verrà inoltre eseguita la tipizzazione HLA per convalidare la copertura HLA dei peptidi testati. Infine, verrà effettuata un'analisi del transcrittoma, che consentirà di identificare l'espressione differenziale di geni e vie metaboliche coinvolte nella risposta immunitaria e quindi di capire come le persone asintomatiche possono controllare l'infezione.