PORTADOR ASINTOMÁTICO DE LEISHMANIA INFANTUM, AGENTE DE LA LEISHMANIOSIS VISCERAL MEDISERRÁNEA: ESTUDIO DE LA RESPUESTA INMUNOLÓGICA - (Asymptoleish)

Las leishmaniasis son consideradas por la OMS como enfermedades emergentes y no controladas. Son la segunda causa de muerte y la cuarta causa de morbilidad en enfermedades tropicales. La leishmaniasis es una reticuloendoteliosis parasitaria cuyo agente patógeno es un protozoo flagelado perteneciente al género Leishmania. Se estima que hay alrededor de 2 millones de casos nuevos por año. Los tratamientos efectivos contra la leishmaniasis visceral son escasos y aparecen problemas de resistencia. Hasta la fecha, solo se dispone de una vacuna canina que protege a los perros del desarrollo de leishmaniasis canina a L. infantum. En el hombre, en casos clínicos paralelos, la leishmaniasis se caracteriza por un gran número de portadores asintomáticos. Este es el caso de los Alpes Marítimos, donde el 50% de los habitantes del interior de Niza son portadores del parásito.

los investigadores desean estudiar la respuesta inmune protectora al parásito y más particularmente a los portadores asintomáticos. De hecho, estos pacientes estaban infectados con el parásito y no desarrollaron la enfermedad. Comprender la respuesta inmunitaria protectora de estos pacientes contra el parásito es, por lo tanto, primordial en el desarrollo de una vacuna contra la leishmaniasis humana.

Para ello, el investigador quiere realizar un estudio ex vivo de la respuesta inmune de los linfocitos procedentes de portadores asintomáticos tras la estimulación con los péptidos de la vacuna de Leishmania. También se quiere describir la respuesta inmune, tras la estimulación por estos péptidos, en linfocitos de sujetos portadores asintomáticos y linfocitos de sujetos no infectados por el parásito y compararlos. Este estudio es unicéntrico y no aleatorizado. Quiere reclutar 20 portadores asintomáticos de L. infantum y 10 sujetos no infectados. Serán seleccionados de nuestra base de datos. Se tomará una muestra de sangre simple. Tras la verificación mediante PCR cuantitativa y western blotting de su estado frente a la leishmaniasis, el equipo los dividirá en dos grupos (asintomáticos o sanos). Luego, las muestras de sangre serán enviadas al equipo de Jean Loup Lemesre del Laboratorio INTERTRYP - UMR177 del IRD en Montpellier. Análisis y ensayo ELISPOT de citoquinas y proteasas para describir la respuesta inmune de los dos grupos y compararlas. Además, se realizará la tipificación celular mediante citometría de flujo para determinar el tipo de linfocitos implicados en la respuesta inmune frente a los péptidos de Leishmania. También se realizará la tipificación de HLA para validar la cobertura de HLA de los péptidos probados. Finalmente, se realizará un análisis del transcriptoma, que permitirá identificar la expresión diferencial de genes y vías metabólicas involucradas en la respuesta inmune y así comprender cómo las personas asintomáticas pueden controlar la infección.