Ataxia-telangiectasia: tratando a disfunção mitocondrial com uma nova forma de anaplerose (A-TC7)

A ataxia telangiectasia (A-T) é uma condição neurodegenerativa rara, genética, progressiva, limitante da vida, que afeta uma variedade de sistemas corporais, resultando em ataxia, deficiência imunológica, complicações respiratórias e predisposição ao câncer. Atualmente não há cura para A-T. Ao longo dos anos, vários pequenos ensaios clínicos usando esteróides, antioxidantes e agentes anti-inflamatórios tiveram pouco sucesso. A história natural da doença é implacável levando à morte precoce. A-T gera uma carga de doença significativa para os indivíduos, suas famílias extensas e para os recursos de saúde. Com os cuidados paliativos sendo a única opção atual para as famílias, um teste de tratamento para A-T atende a uma necessidade não atendida. Os dados preliminares dos investigadores fornecem evidências convincentes de disfunção mitocondrial reversível e morte celular evitável em células de pacientes com A-T e os efeitos benéficos do heptanoato (C7), o principal metabólito da triheptanoína. C7 corrige um defeito no retículo endoplasmático (ER)-sinalização mitocondrial em células A-T e tem grande potencial para aplicação no tratamento de participantes. O C7 tem sido utilizado com eficácia e segurança nos últimos 15 anos para erros inatos do metabolismo (IEM), como defeitos de ácidos graxos de cadeia longa (LC-FAOD).

A-T é devido a um defeito genético que resulta em uma proteína quinase serina/treonina defeituosa, conhecida como ATM. Normalmente, o ATM desempenha um papel central na proteção do genoma contra danos. É cada vez mais evidente que o ATM protege as células contra o estresse oxidativo. Essa proteína também está presente fora do núcleo, onde é ativada pelo estresse oxidativo por meio de um mecanismo separado do dano ao DNA, fornecendo uma explicação de por que os antioxidantes têm um papel protetor nas células A-T em cultura e em modelos animais. A partir desses e de outros estudos, fica evidente que as anormalidades mitocondriais caracterizam a ATM e tem sido sugerido que a A-T deva ser considerada, pelo menos em parte, como uma doença mitocondrial. Os investigadores acrescentaram substância a essa alegação, mostrando que as células com deficiência de ATM (B3) são extremamente sensíveis à inibição da glicólise pela privação de glicose, em comparação com os controles (HBEC). Os pesquisadores também mostraram essa sensibilidade aumentada à privação de nutrientes para células epiteliais primárias de pacientes e em células de pacientes imortalizadas. Juntos, esses dados apontam para uma capacidade reduzida das mitocôndrias A-T para suportar o metabolismo energético e fornecem evidências adicionais para um defeito mitocondrial nas células A-T. Os pesquisadores demonstraram recentemente que essa hipersensibilidade à privação de glicose pode ser explicada por um novo mecanismo envolvendo sinalização defeituosa entre o RE e a mitocôndria. Os investigadores demonstraram que isso foi causado pela montagem defeituosa do canal de cálcio VDAC1-GRP75-IP3R1 e menos pontos de contato ER-mitocôndrias, conforme determinado pela microscopia eletrônica de transmissão. Isso, por sua vez, resultou em liberação reduzida de cálcio do RE e menos transferência para as mitocôndrias, fornecendo mais evidências de disfunção mitocondrial nas células A-T.

Os investigadores selecionaram a triheptanoína, um triglicerídeo sintético de cadeia ímpar altamente purificado que é catabolizado em heptanoato e pode atravessar a membrana mitocondrial sem o carreador de carnitina. O heptanoato livre é então metabolizado pelas enzimas de oxidação de ácidos graxos de cadeia média para produzir tanto acetil CoA quanto propionil CoA, que atuam como anapleróticos para reabastecer o ciclo do TCA e aumentar o metabolismo energético, fornecendo NADPH e gerando ATP. Os investigadores demonstraram que o heptanoato corrige parcialmente a extrema sensibilidade à inibição da glicólise tanto na linha celular deficiente em ATM quanto nas células epiteliais primárias de um paciente com A-T. Curiosamente, o heptanoato também corrigiu todos os defeitos na sinalização ER-mitocondrial, incluindo a absorção de cálcio nas mitocôndrias. Com base na importância da disfunção mitocondrial no fenótipo A-T e em nossos resultados revelando a correção da função mitocondrial pelo heptanoato, os pesquisadores consideram que a triheptanoína tem um excelente potencial na correção de muitos aspectos do fenótipo A-T, incluindo o fenótipo neurodegenerativo progressivo.

A triheptanoína tem sido usada há mais de 15 anos para tratar LC-FAOD, com melhoras demonstradas na função cardíaca e reduções nos episódios de rabdomiólise. Sabe-se que a triheptanoína e o heptanoato protegem contra a morte celular em condições experimentais amplamente caracterizadas por estresse oxidativo, como acidente vascular cerebral e doença do neurônio motor, doença do corpo adulto de poliglucosano, hemiplegia alternada da infância, deficiência do transportador de glicose-1 e modelos de camundongos e humanos com epilepsia . O heptanoato protege os neurônios cultivados contra a morte celular induzida por H2O2. Coletivamente, esses estudos demonstram que a triheptanoína é bem tolerada e é eficaz no tratamento de uma variedade de condições neurológicas associadas à deficiência de energia neuronal.

Critérios contínuos de Fase II a Fase III para passar/não passar O monitoramento provisório para o programa de intervenção no estudo A-T2020/01 ocorrerá nos momentos das duas análises interinas (primeiro, quando a coorte do estudo tiver concluído o tratamento inicial de 2 meses , e segundo, após 6 meses de tratamento quando o Grupo Um completou 2 meses da dose de 35%). Um relatório cego será apresentado ao iDSMB contendo estatísticas descritivas pertinentes dos grupos, uma comparação padrão entre grupos para os resultados primários e secundários e uma estimativa bayesiana da probabilidade (posterior) de que cada um dos três grupos de intervenção seja superior para os resultados primários. As informações a serem apresentadas ao iDSMB serão acordadas com o iDSMB antes da primeira reunião do iDSMB e serão atualizadas por ocasião das reuniões do iDSMB. Os dados serão apresentados ao iDSMB de forma cega, mas o iDSMB pode solicitar dados não cegos para confirmar ou ratificar quaisquer resultados provisórios relatados. O iDSMB pode, no entanto, fazer uma recomendação sobre a interrupção das intervenções atuais se elas mostrarem pouca promessa ou futilidade.

Os endpoints primários para relatórios provisórios de iDSMB são a porcentagem de morte celular induzida pela privação de glicose na cultura celular e a reversão/correção de seu perfil mitocondrial anormal em células epiteliais primárias, resultando em morte celular durante o período de tratamento.

As avaliações neurológicas clínicas de escalas secundárias auxiliam na formulação dos critérios passa/não passa e incluirão: SARA e ICARS. O SARA é uma ferramenta validada para ataxia cerebelar, que mede marcha, postura, sentar, fala, teste de perseguição com os dedos, teste do nariz com o dedo, movimentos alternados rápidos e teste calcanhar-canela. Possui oito categorias com pontuação cumulativa variando de 0 (sem ataxia) a 40 (ataxia mais grave); Marcha (0-8 pontos), Postura (0-6 pontos), Sentar (0-4 pontos), Distúrbio da fala (0-6 pontos), Perseguição dos dedos (0-4 pontos), Teste nariz-dedos (0-4 pontos pontos), Movimento alternado rápido das mãos (0-4 pontos), Deslizamento calcanhar-canela (0-4 pontos). ICARS é uma escala registrada de 100 com 19 itens e 4 subescalas e tem sido usada no A-T. Os distúrbios classificados como subescalas dentro da ICARS são: Distúrbios posturais e da marcha (7 itens, 0-34 pontos), Ataxia dos membros (7 itens, 0-52 pontos), Disartria (2 itens, 0-8 pontos) e Distúrbios oculomotores ( 3 itens, 0-6 pontos). Pontuação mínima: 0 Pontuação máxima: 100.

gatilhos ir/não-ir

go triggers O progresso contínuo da Fase II para a Fase III será acionado sob os seguintes parâmetros predefinidos;

• Se for observada melhora clinicamente ou estatisticamente significativa no resultado do estudo primário em combinação com uma melhora medida de pelo menos ½ desvio padrão nas principais escalas clínicas que incluem:
• melhora significativa nas pontuações totais combinadas das escalas SARA e ICARS.
• E/ou melhorias significativas em quaisquer aspectos das escalas SARA e ICARS individualmente, especialmente referentes a; Melhorias na postura e na marcha, distúrbios da fala, habilidades motoras finas aprimoradas, distúrbios motores finos, funções cinéticas

Gatilhos proibidos O progresso contínuo da Fase II para a Fase III não ocorrerá sob os seguintes parâmetros predefinidos;

• Eventos adversos
• Se nenhuma melhora clinicamente significativa no resultado primário do estudo for observada
• Se ocorrer uma melhoria clinicamente significativa no resultado do estudo primário sem quaisquer melhorias nas principais escalas secundárias, especificamente SARA e ICARS.