Atassia-teleangectasia: trattamento della disfunzione mitocondriale con una nuova forma di anaplerosi (A-TC7)

L'atassia telangiectasia (A-T) è una condizione rara, genetica, progressiva, limitante la vita e neurodegenerativa che colpisce una varietà di sistemi corporei con conseguente atassia, deficienza immunitaria, complicanze respiratorie e predisposizione al cancro. Attualmente non esiste una cura per A-T. Nel corso degli anni, una serie di piccoli studi clinici che utilizzavano steroidi, antiossidanti e agenti antinfiammatori hanno avuto scarso successo. La storia naturale della malattia è implacabile e porta alla morte prematura. L'AT genera un carico di malattia significativo per gli individui, le loro famiglie allargate e le risorse sanitarie. Poiché le cure palliative sono l'unica opzione attuale per le famiglie, una sperimentazione terapeutica per l'AT soddisfa un'esigenza insoddisfatta. I dati preliminari dei ricercatori forniscono prove convincenti della disfunzione mitocondriale reversibile e della morte cellulare prevenibile nelle cellule dei pazienti A-T e degli effetti benefici dell'eptanoato (C7), il principale metabolita della trieptanoina. C7 corregge un difetto nella segnalazione mitocondriale del reticolo endoplasmatico (ER) nelle cellule AT e ha un grande potenziale per l'applicazione nel trattamento dei partecipanti. Il C7 è stato utilizzato con efficacia e sicurezza negli ultimi 15 anni per gli errori congeniti del metabolismo (IEM) come i difetti degli acidi grassi a catena lunga (LC-FAOD).

A-T è dovuto a un difetto genetico che si traduce in una proteina chinasi serina/treonina difettosa, nota come ATM. Normalmente, l'ATM svolge un ruolo centrale nella protezione del genoma dai danni. È sempre più evidente che l'ATM protegge le cellule dallo stress ossidativo. Questa proteina è presente anche al di fuori del nucleo, dove viene attivata dallo stress ossidativo attraverso un meccanismo separato dal danno al DNA, fornendo una spiegazione del perché gli antiossidanti hanno un ruolo protettivo nelle cellule A-T in coltura e nei modelli animali. Da questi e altri studi è evidente che le anomalie mitocondriali caratterizzano l'ATM ed è stato suggerito che l'A-T dovrebbe essere considerata, almeno in parte, una malattia mitocondriale. Gli investigatori hanno aggiunto sostanza a tale affermazione dimostrando che le cellule carenti di ATM (B3) sono squisitamente sensibili all'inibizione della glicolisi mediante privazione del glucosio, rispetto ai controlli (HBEC). I ricercatori hanno anche dimostrato questa maggiore sensibilità alla privazione dei nutrienti per le cellule epiteliali primarie dei pazienti e nelle cellule dei pazienti immortalizzate. Insieme, questi dati indicano una ridotta capacità dei mitocondri AT di supportare il metabolismo energetico e forniscono ulteriori prove di un difetto mitocondriale nelle cellule AT. I ricercatori hanno recentemente dimostrato che questa ipersensibilità alla privazione del glucosio può essere spiegata da un nuovo meccanismo che coinvolge una segnalazione difettosa tra l'ER e il mitocondrio. I ricercatori hanno dimostrato che ciò era causato da un assemblaggio difettoso del canale del calcio VDAC1-GRP75-IP3R1 e da meno punti di contatto ER-mitocondri come determinato dalla microscopia elettronica a trasmissione. Ciò a sua volta ha comportato un ridotto rilascio di calcio dal pronto soccorso e un minore trasferimento ai mitocondri, fornendo ulteriori prove della disfunzione mitocondriale nelle cellule AT.

I ricercatori hanno selezionato la trieptanoina, un trigliceride a catena dispari medio altamente purificato che viene catabolizzato in eptanoato e può attraversare la membrana mitocondriale senza il vettore della carnitina. L'eptanoato libero viene quindi metabolizzato dagli enzimi di ossidazione degli acidi grassi a catena media per produrre sia acetil CoA che propionil CoA che agiscono come anaplerotici per ricostituire il ciclo TCA e migliorare il metabolismo energetico fornendo NADPH e generando ATP. I ricercatori hanno dimostrato che l'eptanoato corregge parzialmente l'estrema sensibilità all'inibizione della glicolisi sia nella linea cellulare carente di ATM che nelle cellule epiteliali primarie di un paziente con AT. È interessante notare che l'eptanoato ha anche corretto tutti i difetti nella segnalazione mitocondriale dell'ER, incluso l'assorbimento del calcio nei mitocondri. Sulla base dell'importanza della disfunzione mitocondriale nel fenotipo AT e dei nostri risultati che rivelano la correzione della funzione mitocondriale da parte dell'eptanoato, i ricercatori ritengono che la trieptanoina abbia un eccellente potenziale nella correzione di molti aspetti del fenotipo AT compreso il fenotipo neurodegenerativo progressivo.

La trieptanoina è stata utilizzata per oltre 15 anni per il trattamento della LC-FAOD, con miglioramenti dimostrati della funzione cardiaca e riduzioni degli episodi di rabdomiolisi. È noto che la trieptanoina e l'eptanoato proteggono dalla morte cellulare in condizioni sperimentali ampiamente caratterizzate da stress ossidativo, come ictus e malattia dei motoneuroni, malattia del corpo poliglucosano dell'adulto, emiplegia alternata dell'infanzia, deficit del trasportatore del glucosio-1 e modelli murini e umani con epilessia . L'eptanoato protegge i neuroni in coltura dalla morte cellulare indotta da H2O2. Collettivamente, questi studi dimostrano che la trieptanoina è ben tollerata ed è efficace nel trattamento di una serie di condizioni neurologiche associate alla carenza di energia neuronale.

Criteri go/no-go senza soluzione di continuità dalla fase II alla fase III Il monitoraggio ad interim per il programma di intervento nello studio A-T2020/01 avverrà al momento delle due analisi ad interim (prima, quando la coorte dello studio avrà completato i primi 2 mesi di trattamento e in secondo luogo, dopo 6 mesi di trattamento quando il Gruppo Uno ha completato 2 mesi della dose del 35%). Verrà presentato all'iDSMB un rapporto in cieco contenente statistiche descrittive pertinenti dei gruppi, un confronto standard tra i gruppi per gli esiti primari e secondari e una stima bayesiana della probabilità (posteriore) che ciascuno dei tre gruppi di intervento sia superiore per gli esiti primari. Le informazioni da presentare all'iDSMB saranno concordate con l'iDSMB prima della prima riunione dell'iDSMB e saranno aggiornate al momento delle riunioni dell'iDSMB. I dati saranno presentati all'iDSMB in modo cieco, ma l'iDSMB può richiedere dati non ciechi per confermare o ratificare qualsiasi risultato provvisorio riportato. L'iDSMB può tuttavia formulare una raccomandazione sull'interruzione degli interventi in corso se mostrano scarse promesse o futilità.

Gli endpoint primari per i rapporti iDSMB ad interim sono la percentuale di morte cellulare indotta dalla privazione del glucosio nella coltura cellulare e l'inversione/correzione del loro profilo mitocondriale anomalo nelle cellule epiteliali primarie con conseguente morte cellulare durante il periodo di trattamento.

Le valutazioni neurologiche cliniche delle scale secondarie aiutano a formulare i criteri go/no-go e includeranno: SARA e ICARS. SARA è uno strumento convalidato per l'atassia cerebellare, che misura l'andatura, la posizione, la posizione seduta, il linguaggio, il test dell'inseguimento delle dita, il test del naso delle dita, i movimenti alternati rapidi e il test tallone-stinco. Ha otto categorie con punteggio cumulativo che va da 0 (nessuna atassia) a 40 (atassia più grave); Andatura (0-8 punti), Posizione (0-6 punti), Posizione seduta (0-4 punti), Disturbi del linguaggio (0-6 punti), Inseguimento delle dita (0-4 punti), Test naso-dito (0-4 punti) punti), movimento veloce alternato delle mani (0-4 punti), scivolata tallone-tibia (0-4 punti). ICARS è una scala registrata su 100 con 19 item e 4 sottoscale ed è stata utilizzata in A-T. I disturbi classificati come sottoscale all'interno dell'ICARS sono: Disturbi posturali e dell'andatura (7 item, 0-34 punti) Atassia degli arti (7 item, 0-52 punti), Disartria (2 item, 0-8 punti) e Disturbi oculomotori ( 3 articoli, 0-6 punti). Punteggio minimo: 0 Punteggio massimo: 100.

trigger go/no-go

go triggers Il progresso senza soluzione di continuità dalla Fase II alla Fase III verrà attivato in base ai seguenti parametri preimpostati;

• Se si osserva un miglioramento clinicamente o statisticamente significativo nell'esito dello studio primario in combinazione con un miglioramento misurato di almeno ½ deviazione standard nelle principali scale cliniche che include:
• miglioramento significativo dei punteggi combinati totali delle scale SARA e ICARS.
• E/o miglioramenti significativi di qualsiasi aspetto delle scale SARA e ICARS individualmente, in particolare relative a; Miglioramenti posturali e dell'andatura, Disturbi del linguaggio, Miglioramento delle capacità motorie fini, Disturbi motori fini, Funzioni cinetiche

No-go trigger Il progresso continuo dalla Fase II alla Fase III non si verificherà con i seguenti parametri preimpostati;

• Eventi avversi
• Se non si osserva alcun miglioramento clinicamente significativo nell'esito dello studio primario
• Se si verifica un miglioramento clinicamente significativo nell'esito dello studio primario senza alcun miglioramento nelle scale secondarie chiave, in particolare SARA e ICARS.