Resposta Inflamatória Subcutânea Humana a Sensores de Glicose (TISSUESENSOR)

Dezoito pacientes com DM tipo 1 serão incluídos. Objetivos primários

1. Para definir a variabilidade intraindividual e interindividual da contagem de macrófagos ao redor do sensor
2. Avaliar se existe relação entre número de macrófagos, fibrose e MARD do registro MCG.

Objetivos secundários 1. Descrever a histologia da resposta tecidual. Esta descrição incluirá:

1. Coloração HE: tipos de células, disposição, estruturas vasculares, sinais de hemorragia-coágulo. Coloração de Giemsa: mastócitos. Coloração tricrômica de Masson: str. vascular.

2. Imuno-histoquímica: Avaliação vascular, caracterização de macrófagos (CD 68+), macrófagos tipo 1 (CD 68 + CD 163 -), macrófagos tipo 2 (CD 163+), CD31 como marcador vascular, CD 117 mastócitos 2. Descrever o acúmulo de proteínas (bioincrustação) que ocorre na superfície do sensor.

   Critérios de inclusão 1. Diabetes tipo 1 (mais de 6 meses de duração), confirmado pela positividade para Ab antiGAD 65 2. Ser um usuário regular de um sistema de monitoramento contínuo de glicose 3. Compreender o protocolo proposto e aceitar a participação. Critério de exclusão

   1. Tratamento com medicamentos potencialmente modificadores da resposta inflamatória durante os 10 dias anteriores à cirurgia (anti-inflamatórios não esteróides ou corticosteróides, antioxidantes ou antiagregantes plaquetários).

   Cada paciente terá 1 sensor de glicose inserido no braço não dominante. A HbA1c será determinada (HbA1c; DCA 2000+; Siemens Healthcare Diagnostics).

   . Durante a vida útil do sensor (10), serão realizadas no mínimo 4 determinações de glicemia capilar/dia (antes do café da manhã, antes do almoço, antes do jantar, antes de dormir); (obtenção de 1 microL de sangue total) utilizando sempre o mesmo glicosímetro.

   O sensor tem um comprimento de 8 mm e um diâmetro de 0,4 mm. Todo o material necessário será fornecido, incluindo um diário de controle para ajudar o paciente a se lembrar de realizar o autocontrole e definir sua distribuição de tempo.

   No último dia de uso do sensor, ele será removido e uma biópsia de pele com punch de 4 mm será realizada 5 minutos depois.

   As amostras de tecido serão fixadas em solução de formaldeído a 4%, blocos de parafina confeccionados e seccionados. As amostras resultantes serão coradas com hematoxilina/eosina (HE), Giemsa e tricrômico de Masson. Serão realizadas determinações semiquantitativas de linfócitos, neutrófilos, mastócitos, macrófagos (- 0; +/- <20; + 20-40; ++ 40-80; +++ > 80 células/campo de grande aumento); fibrina, fibrose, proliferação vascular e cariorrexe (-, ausente; +/-, muito leve; +, leve, ++, moderado; +++, grave).

   Um subgrupo de 6 sensores de 6 pacientes será cortado com bisturi da raiz e armazenado em glutaraldeído a 4ºC para avaliação em microscopia eletrônica de varredura.

   Em todos os casos, será realizado um estudo imuno-histoquímico quantitativo com contagem de campo x40 com fotografias e grade (Dako omnis com sistema envision) para: Macrófagos fenótipo I (CD68), fenótipo II CD163 • mastócitos (CD 117)

   • proliferação vascular (CD34)
   • TGFb

   O glicosímetro-monitor será recuperado para download e estudo do registro. Os pares de glicose intersticial - sangue serão feitos com aqueles registrados, mas não usados ​​para calibração.