Lidská subkutánní zánětlivá reakce na glukózové senzory (TISSUESENSOR)

Bude zahrnuto 18 pacientů s DM 1. typu. Primární cíle

1. Definovat intraindividuální a interindividuální variabilitu počtu makrofágů v okolí senzoru
2. Posoudit, zda existuje vztah mezi počtem makrofágů, fibrózou a MARD registru MCG.

Sekundární cíle 1. Popsat histologii tkáňové odpovědi. Tento popis bude zahrnovat:

1. HE barvení: typy buněk, uspořádání, cévní struktury, známky krvácení-sraženiny. Barvení Giemsa: žírné buňky. Massonovo trichromové mořidlo: str. cévní.

2. Imunohistochemie: Cévní hodnocení, charakterizace makrofágů (CD 68 +), makrofágů typu 1 (CD 68 + CD 163 -), makrofágů typu 2 (CD 163 +), CD31 jako vaskulární marker, CD 117 žírné buňky 2. Popsat hromadění proteinů (bioznečištění), ke kterému dochází na povrchu senzoru.

   Kritéria zařazení 1. Diabetes 1. typu (trvající déle než 6 měsíců), potvrzený pozitivitou na Ab antiGAD 65 2. Být pravidelným uživatelem systému kontinuálního monitorování glukózy 3. Porozumět navrženému protokolu a přijetí účasti. Kritéria vyloučení

   1. Léčba léky, které by mohly potenciálně modifikovat zánětlivou odpověď během 10 dnů před operací (nesteroidní protizánětlivé léky nebo kortikosteroidy, antioxidanty nebo antiagregancia krevních destiček).

   Každý pacient bude mít v nedominantní paži vložen 1 glukózový senzor. Bude stanoveno HbA1c (HbA1c; DCA 2000+; Siemens Healthcare Diagnostics).

   . Během životnosti senzoru (10) budou provedena minimálně 4 stanovení glykémie v kapilární krvi/den (před snídaní, před obědem, před večeří, před spaním); (získání 1 mikroL plné krve) vždy pomocí stejného glukometru.

   Snímač má délku 8 mm a průměr 0,4 mm. Bude poskytnut veškerý potřebný materiál, včetně kontrolního deníku, který pacientovi pomůže zapamatovat si provedení sebekontroly a nastavit její časové rozložení.

   V poslední den použití senzoru bude odstraněn a o 5 minut později bude provedena biopsie kůže děrovací 4 mm.

   Vzorky tkání budou fixovány ve 4% roztoku formaldehydu, vyrobeny a nařezány parafínové bloky. Výsledné vzorky budou obarveny hematoxylinem/eosinem (HE), Giemsovým a Massonovým trichromem. Bude provedeno semikvantitativní stanovení lymfocytů, neutrofilů, žírných buněk, makrofágů (- 0; +/- <20; + 20-40; ++ 40-80; +++ > 80 buněk / pole vysokého výkonu); fibrin, fibróza, vaskulární proliferace a karyorrhexe (-, chybí; +/-, velmi mírná; +, mírná, ++, střední; +++, těžká).

   Podskupina 6 senzorů od 6 pacientů bude vyříznuta skalpelem z kořene a uložena v glutaraldehydu při 4ºC pro vyhodnocení skenovací elektronovou mikroskopií.

   Ve všech případech bude provedena kvantitativní imunohistochemická studie s x40 polem s fotografiemi a mřížkou (Dako omnis se systémem envision) pro: Makrofágy fenotyp I (CD68), fenotyp II CD163 • žírné buňky (CD 117)

   • vaskulární proliferace (CD34)
   • TGFb

   Monitor-glukometr bude obnoven pro stažení a prostudování záznamu. Intersticiální páry glukóza - krev budou vytvořeny s páry zaznamenanými, ale nepoužitými pro kalibraci.