Risposta infiammatoria sottocutanea umana ai sensori di glucosio (TISSUESENSOR)

Saranno inclusi diciotto pazienti con DM di tipo 1. Obiettivi primari

1. Definire la variabilità intra-individuale e inter-individuale del conteggio dei macrofagi intorno al sensore
2. Valutare se esiste una relazione tra numero di macrofagi, fibrosi e MARD del registro MCG.

Obiettivi secondari 1. Descrivere l'istologia della risposta tissutale. Questa descrizione includerà:

1. Colorazione HE: tipi cellulari, disposizione, strutture vascolari, segni di emorragia-coagulo. Colorazione Giemsa: mastociti. Colorazione tricromica di Masson: str. vascolare.

2. Immunoistochimica: valutazione vascolare, caratterizzazione dei macrofagi (CD 68 +), macrofagi di tipo 1 (CD 68 + CD 163 -), macrofagi di tipo 2 (CD 163 +), CD31 come marcatore vascolare, mastociti CD 117 2. Per descrivere il accumulo di proteine ​​(biofouling) che si verifica sulla superficie del sensore.

   Criteri di inclusione 1. Diabete di tipo 1 (durata superiore a 6 mesi), confermato dalla positività per Ab antiGAD 65 2. Essere un utente abituale di un sistema di monitoraggio continuo del glucosio 3. Per comprendere il protocollo proposto e l'accettazione della partecipazione. Criteri di esclusione

   1. Trattamento con farmaci potenzialmente in grado di modificare la risposta infiammatoria nei 10 giorni precedenti l'intervento (farmaci antinfiammatori non steroidei o corticosteroidi, antiossidanti o antiaggreganti piastrinici).

   Ogni paziente avrà 1 sensore di glucosio inserito nel braccio non dominante. Verrà determinata l'HbA1c (HbA1c; DCA 2000+; Siemens Healthcare Diagnostics).

   . Durante la vita utile del sensore (10), verranno eseguite almeno 4 determinazioni glicemiche capillari/giorno (prima colazione, prima pranzo, prima cena, prima di andare a letto); (ottenendo 1 microL di sangue intero) utilizzando sempre lo stesso glucometro.

   Il sensore ha una lunghezza di 8 mm e un diametro di 0,4 mm. Verrà fornito tutto il materiale necessario, compreso un diario di controllo per aiutare il paziente a ricordarsi di effettuare l'autocontrollo e fissarne la distribuzione dei tempi.

   L'ultimo giorno di utilizzo del sensore, verrà rimosso e 5 minuti dopo verrà eseguita una biopsia cutanea del punch da 4 mm.

   I campioni di tessuto saranno fissati in una soluzione di formaldeide al 4%, preparati in blocchi di paraffina e sezionati. I campioni risultanti saranno colorati con ematossilina/eosina (HE), Giemsa e tricromica di Masson. Verrà eseguita la determinazione semiquantitativa di linfociti, neutrofili, mastociti, macrofagi (- 0; +/- <20; + 20-40; ++ 40-80; +++ > 80 cellule/campo ad alta potenza); fibrina, fibrosi, proliferazione vascolare e carioressi (-, assente; +/-, molto lieve; +, lieve, ++, moderata; +++, grave).

   Un sottogruppo di 6 sensori di 6 pazienti sarà tagliato con un bisturi dalla radice e conservato in glutaraldeide a 4ºC per la valutazione al microscopio elettronico a scansione.

   In tutti i casi, verrà eseguito uno studio immunoistochimico quantitativo con conta di campo x40 con fotografie e griglia (Dako omnis con sistema envision) per: Macrofagi fenotipo I (CD68), fenotipo II CD163 • mastociti (CD 117)

   • proliferazione vascolare (CD34)
   • TGF b

   Il monitor-glucometro verrà recuperato per il download e lo studio del record. Gli accoppiamenti glucosio - sangue interstiziali verranno effettuati con quelli registrati ma non utilizzati per la calibrazione.