Безопасность и эффективность внутрикожной трехвалентной вакцинации против гриппа у пожилых людей, находящихся в специализированных учреждениях

Это проспективное, рандомизированное, одноцентровое исследование с параллельными группами в больнице Королевы Марии и больнице Фунг Ю Кинг. Исследователи планируют набрать 100 человек, которые будут квалифицированы для участия в Программе массовой вакцинации Управления больниц (HA)/Центра охраны здоровья (CHP) для трехвалентной вакцины против гриппа (TIV). К таким пациентам относятся находящиеся в лечебных учреждениях пожилые взрослые пациенты в возрасте 65 лет и старше.

После информированного согласия (дайте пациенту на рассмотрение в течение одной недели) субъекты будут случайным образом разделены на 2 группы для получения следующих вакцин: Группа 1: полная доза (1 доза) стандартной TIV (15 мкг гемагглютинина TIV), вводимая внутримышечно с помощью обычной иглы, Группа 2: полная доза (1 доза) внутрикожной инъекции (15 мкг гемагглютинина TIV), введенная с Intanza 15 в день 0. Все вакцины TIV, используемые в этом исследовании, будут вакцинами Vaxigrip® (группа 1) или Intanza® Intradermal (группа 2), Sanofi-Pasteur и предоставлены Управлением больниц или Университетом Гонконга. Базовый уровень HI для TIV будет измеряться в день 0.

Пациенты, отвечающие критериям включения, будут отобраны исследователями из Группы гериатрической оценки сообщества (CGAT) больницы Фунг Ю Кинг. Прежде чем начать, пациентам будет предоставлена ​​одна неделя, чтобы рассмотреть вопрос о присоединении к исследованию. Между тем, исследователи также брали 5 мл сыворотки у участника для проверки на исходное антитело к TIV. Главный исследователь имеет опыт введения внутримышечных инъекций, и он будет нести ответственность за повторное наполнение внутрикожных инъекций с низкими дозами стерильным методом. Устройство с микроиглами, используемое в этом исследовании, состоит из трех микроигл диаметром 0,6 мм, изготовленных из кристалла кремния и прикрепленных к кончику пластикового адаптера, который можно установить на любой стандартный шприц. Во время инъекции устройство с микроиглами слегка прижимали к плечу, так что микроиглы проникали в крайний слой кожи. Затем будет введена вся доза вакцины, в результате чего появится побелевший пузырь. Внутримышечную инъекцию обычной полной дозы вакцины проводят обычным образом с помощью предварительно заполненного шприца. Главный исследователь будет нести ответственность за обескровливание субъекта, выделение сыворотки, хранение в двойных копиях, замораживание и архивирование в соответствии с протоколами HKU.

Анализ MN и HI (см. ниже) должен проводиться лабораторией HKU в соответствии со следующими протоколами:

Анализ микронейтрализующих антител (MN) NT будет проводиться в боксе биобезопасности типа II в учреждении с уровнем биологической безопасности III. NT будет выполняться в 96-луночных планшетах для микротитрования, засеянных клетками MDCK. Двукратные серийные разведения парных сывороток (до и после вакцинации) будут протестированы в двух повторностях против 100 TCID50 следующих 3 вирусов: A/California/7/2009 (H1N1)pdm09-подобный вирус; вирус, подобный A/Victoria/361/2011 (H3N2); и вирус, подобный B/Wisconsin/1/2010, в присутствии трипсина, обработанного L-1-тозиламид-2-фенилэтилхлорметилкетоном (TPCK) (TPCK-трипсин; Sigma). Соответствующий набор клеточных контролей с сывороткой, но без инокуляции вируса, будет использоваться в качестве контроля. Клетки оценивают по ингибированию цитопатического эффекта (CPE) через 72-96 часов. Титр нейтрализующих антител определяют как максимальное разведение сыворотки, при котором процентное содержание ЦПД меньше или равно 50%.

Анализ HI Образцы сыворотки будут протестированы на наличие антител ингибирования гемагглютинации (HI) против следующих вирусов: A/California/7/2009 (H1N1)pdm09-подобный вирус; вирус, подобный A/Victoria/361/2011 (H3N2); и вирус, подобный B/Wisconsin/1/2010, с использованием эталонных антигенов (набор реагентов ВОЗ для гриппа, предоставленный Сотрудничающим центром Всемирной организации здравоохранения по гриппу, CDC, Атланта, Джорджия, США. Анализы антител HAI будут выполняться стандартными методами микротитрования после удаления неспецифических ингибиторов в сыворотке с помощью фермента, разрушающего рецепторы (RDE) (1: 3), инкубации в течение ночи при 37 ° C с последующей инактивацией нагреванием при 56 ° C в течение 30 минут. . Все образцы сыворотки от каждого субъекта будут протестированы на каждый из тестируемых антигенов. Серийные двукратные разведения сыворотки, обработанной RDE, начиная с 1:10, титруют против 4 единиц гемагглютинина эталонных антигенов с использованием 0,25% эритроцитов индейки. Резервная копия каждого образца сыворотки будет подготовлена ​​и заморожена в двух отдельно расположенных морозильных камерах при температуре -20ºC для потенциального будущего анализа и/или проверки.

Критерии оценки:

Первичный результат:

а. Изменение по сравнению с исходным уровнем (0-й день вакцинации) титра нейтрализующих антител против гриппа на 21-й и 180-й день вакцинации

Вторичные результаты:

а. Побочные эффекты на 0-7 день