Нейтрофильные внеклеточные ловушки и тромболизис при остром инсульте (NETs)

Внеклеточные ловушки нейтрофилов (НВЛ) измеряли в сыворотке на момент госпитализации, затем через 4 часа, 24 часа и 72 часа после инсульта. Из-за нестабильности нуклеосом следовали строгому преаналитическому протоколу. Образцы крови центрифугировали в течение 1-2 ч после забора крови. Соблюдался строгий преаналитический протокол, включающий раннее центрифугирование образцов и хранение при температуре -80°C. NET количественно определяли в партиях, содержащих все образцы от пациента, с использованием обнаружения MPO (миелопероксидазы), а затем с помощью ELISAPLUS для обнаружения гибели клеток (Roche Diagnostics, Германия), как описано ранее. Нуклеосомы количественно определяли в относительных произвольных единицах (AU). Образцы крови каждого пациента были измерены в рамках одного цикла для улучшения сопоставимости результатов.

Для статистического анализа рассматривались различные переменные нуклеосом, такие как абсолютные концентрации, определенные при поступлении, через 24 часа и через 72 часа после инсульта. Проверяли влияние концентрации нуклеосом на реканализацию. Непрерывные корреляции нуклеосом и объема инфаркта, нуклеосом и размера сгустка, а также объема инфаркта и NIHSS рассчитывали с помощью ранговой корреляции Спирмена вместе с 95% доверительным интервалом. Значение p <0,05 считалось статистически значимым.

Степень морфологического поражения определяли при поступлении в стационар и через 24 ч после тромболизиса методом диффузионно-взвешенной магнитно-резонансной томографии (МРТ). Повреждения DWI до лечения и последующего наблюдения были сегментированы с использованием интерактивных инструментов, основанных на установлении порога интенсивности сигнала DWI в пределах трехмерной маски, охватывающей видимую область яркой интенсивности сигнала DWI и морфометрической фильтрации. Расположение и длину сгустка оценивали по знаку восприимчивости сосуда на Т2*, как описано ранее.