Validering av en urinvägsbiomarkör som diagnostiskt verktyg för AKI vid sepsis

BAKGRUND:

Tidig diagnos och prognostisering av akut njurskada hos patienter med sepsis är nyckeln för att främja vår förståelse av denna sjukdom och i utvärderingen av nya interventioner för detta tillstånd. Många biomarkörer för urin har föreslagits, men ingen enskild verkar konsekvent ge ytterligare information utöver kliniska och rutinmässiga biokemiska parametrar. Vissa författare har föreslagit att använda en panel av urinbiomarkörer för att öka noggrannheten. Detta tillvägagångssätt har dock hittills inte testats i en stor grupp patienter med sepsis. Dessutom har nyare och mer presterande analystekniker utvecklats som motiverar testning inom det kliniska området.

PATIENTER OCH METODER:

Minst 150 på varandra följande patienter inlagda på en intensivvårdsavdelning för tertiär vård (ICU) med sepsis kommer att inkluderas. Efter blåskateterisering kommer urinprov att tas vid tidpunkterna 0, 4 timmar och 24 timmar efter intagningen och vidare dagligen dag 1-5. Proverna kommer omedelbart att centrifugeras och frysas vid -80°C fram till analys. Prover kommer att extraheras genom att ta bort större proteiner (>20 kDa) och avsaltningssteg före masspektrometrianalys. Utredarna kommer att använda kapillärelektrofores-masspektrometri (CE-MS) för att bedöma urinpeptider som förutsäger AKI: 20 peptider som utgör AKI-markörmönstret som tidigare etablerats från en kohort av ICU-patienter. Samtidigt kommer prover att analyseras med hjälp av matrisassisterad laserdesorptionjoniseringstid-flight-masspektrometri (MALDI-TOF MS), en alternativ plattform till CE-MS, som för närvarande utvecklas för rutinmässig ICU-användning. Ett proof of concept av den involverade tekniken har framgångsrikt tillämpats på en uppsättning urinprover från patienter som diagnostiserats med diabetes med normoalbuminuri (kontroller) och makroalbuminuri (fall).

Kliniska, demografiska och biokemiska data från patienter kommer att samlas in under de första 5 dagarna.

PATIENTRESULTAT

• på kort sikt:

  • utveckling av akut njurskada enligt RIFLE-kriterier
  • död
  • behov av njurersättningsterapi under intensivvårdsvistelse

• på längre sikt

  • död
  • behov av njurersättningsterapi
  • uppskattad glomerulär filtrationshastighet beräknad av MDRD vid 3 månader, 1 år och 2 år.

Med användning av cut-offs, kurvor för mottagarens funktionsegenskaper, kommer negativa och positiva prediktiva värden att användas för att beskriva diagnostisk prestanda för biomarkörpanelen ensam eller i kombination med grundläggande kliniska och/eller rutinmässiga biokemiska parametrar. Univariat och multivariat logistisk regression för dödsfall kommer att användas för att utvärdera prognostiseringsvärdet för biomarköruppsättningen.

Dessutom kommer nya diskriminerande cut-offs av proteomiska mönster som bestäms av nyare proteomiska analystekniker att bestämmas i en träningsuppsättning (hälften av kohorten) och valideras i den andra halvan av kohorten. Med hjälp av MALDI-TOF MS-plattformen kommer utredarna att bedöma urinpeptider som var förutsägande för AKI i en träningsuppsättning (ca 75 patienter) med god diagnostisk prestanda hos markörpanelen (noggrannhet över 0,8). Biomarkörpanelens prestanda kommer att bedömas i en blindad testuppsättning av ca. 75 patienter för att utvärdera modellens validitet vid AKI-detektion.