Validering af en urinbiomarkør som diagnostisk værktøj til AKI i sepsis

BAGGRUND:

Tidlig diagnose og prognosticering af akut nyreskade hos patienter med sepsis er nøglen til at fremme vores forståelse af denne sygdom og i evalueringen af ​​nye interventioner for denne tilstand. Mange urinbiomarkører er blevet foreslået, men ingen enkelt ser ud til konsekvent at give yderligere information oven på kliniske og rutinemæssige biokemiske parametre. Nogle forfattere har foreslået at bruge et panel af urinbiomarkører for at øge nøjagtigheden. Denne tilgang er dog indtil videre ikke blevet testet i en stor gruppe patienter med sepsis. Derudover er der udviklet nyere og mere effektive analytiske teknikker, der berettiger til test på det kliniske område.

PATIENTER OG METODER:

Mindst 150 på hinanden følgende patienter, der er indlagt på en tertiær intensiv afdeling (ICU) med sepsis, vil blive inkluderet. Efter blærekateterisering vil der blive udtaget urinprøver på tidspunkter 0, 4 timer og 24 timer efter indlæggelsen og yderligere dagligt på dag 1-5. Prøver vil straks blive centrifugeret og frosset ved -80°C indtil analyse. Prøver vil blive ekstraheret ved at fjerne større proteiner (>20 kDa) og afsaltningstrin før massespektrometrianalyse. Efterforskere vil bruge kapillær elektroforese-massespektrometri (CE-MS) til at vurdere urinpeptider, der forudsiger AKI: 20 peptider, der udgør det AKI-markørmønster, der tidligere er etableret fra en kohorte af ICU-patienter. Samtidig vil prøver blive analyseret ved hjælp af matrix-assisteret laserdesorption ionisering time-of-flight massespektrometri (MALDI-TOF MS), en alternativ platform til CE-MS, som i øjeblikket udvikles til rutinemæssig ICU-brug. Et proof of concept af den involverede teknik er med succes blevet anvendt på et sæt urinprøver fra patienter diagnosticeret med diabetes, der viser normoalbuminuri (kontroller) og makroalbuminuri (tilfælde).

Kliniske, demografiske og biokemiske data fra patienter vil blive indsamlet i løbet af de første 5 dage.

PATIENTRESULTAT

• på kort sigt:

  • udvikling af akut nyreskade efter RIFLE kriterier
  • død
  • behov for nyreudskiftningsterapi under intensivophold

• på længere sigt

  • død
  • behov for nyresubstitutionsterapi
  • estimeret glomerulær filtrationshastighed som beregnet af MDRD ved 3 måneder, 1 år og 2 år.

Ved at bruge cut-offs, kurver for modtagerdriftskarakteristika, vil negative og positive prædiktive værdier blive brugt til at beskrive den diagnostiske ydeevne af biomarkørpanelet alene eller i kombination med grundlæggende kliniske og/eller rutinemæssige biokemiske parametre. Univariat og multivariat logistisk regression for død vil blive brugt til at evaluere prognosticeringsværdien af ​​biomarkørsættet.

Derudover vil nye diskriminerende afskæringer af proteomiske mønstre som bestemt af nyere proteomiske analyseteknikker blive bestemt i et træningssæt (halvdelen af ​​kohorten) og valideret i den anden halvdel af kohorten. Ved at bruge MALDI-TOF MS-platformen vil efterforskerne vurdere urinpeptider, der var forudsigelige for AKI i et træningssæt (ca. 75 patienter) med god diagnostisk ydeevne af markørpanelet (nøjagtighed over 0,8). Biomarkørpanelets ydeevne vil blive vurderet i et blindet testsæt på ca. 75 patienter til at evaluere validiteten af ​​modellen i AKI-detektion.